Хламідії - це облігатні внутрішньоклітинні паразити, які мають розміри 250-300 нм і при первинній інфекції вражають клітини основних бар'єрних систем організму. Так як вони мають РНК, ДНК, клітинну стінку і рибосоми, подібні з рибосомами грамнегативних бактерій, їх класифікують як бактерії. Раніше їх називали гальпровіямі, бедсоніямі, міягаванелламі, з 1 січня 1980 згідно з рішенням Міжнародної Асоціації мікробіологічного товариства (МАМО) ці мікроорганізми отримали родова назва "Chlamydia".
Збудники хламідійних інфекцій відносяться до сімейства Chlamidiaceae, роду Сhlamydia. У межах цього роду виділяють 4 види хламідій: Chl.trachomatis, Chl.psittaci, Chl. pneumoniae і Сhl. pecorum. Серед Chl.trachomatis виділяють 3 групи сероварів: збудники трахоми - A, B, Ba, C; збудники урогенітального хламідіозу - D, E, F, G, H, I, J, K і група венеричною лімфогранулеми - L1, L2, L3. Вид Chl.psittaci включає кілька десятків сероварів. У 80% випадків інфекції Chl.trachomatis і Chl. pneumoniae протікають безсимптомно. За певних умов, а саме при декомпенсації імунологічних функцій, захворювання може переходити в глибокі системні ураження багатьох органів і тканин, а також провокує аутоімунні реакції.
При захворюваннях, що викликаються Chl.psittaci часто спостерігається гематогенний тип розповсюдження інфекції, супроводжується ураженням ЦНС і внутрішніх органів: печінки, селезінки, легенів. Можливо лімфогенне поширення хламідій (Chl.trachomatis, венеричний лімфогранулематоз). Гематогенний шлях поширення інфекції найбільш часто спостерігають при захворюваннях Chl.trachomatis (серовар D і K). Різні біологічні варіанти (підвиди) хламідій викликають ураження різних органів і систем. Chl.trachomatis викликає кон'юнктивіти, локально вражає слизові очей і урогенітального тракту.
Ця інфекція може прогресувати в хронічну стадію, таку як трахома або хронічне запалення тазових органів. Хронічні запалення органів малого тазу призводять до трубної оклюзії або ектопічної вагітності. Біовар венеричного лімфогранулематозу Chl.trachomatis інфікує і макрофаги, і епітеліальні клітини і розповсюджується через лімфатичну систему. Chlamydia pneumoniaе викликає пневмонії, бронхіти і фарингіти, більше того, Chl. pneumoniaе вважається пов'язаної з широким колом таких хронічних станів, як астма, хронічний бронхіт, хвороби коронарних артерій. Chl.psittaci більш рідкісний патоген людини, що викликає в основному захворювання респіраторного тракту, відомі як пситтакоз.
Хламідії викликають увеїти, отити, синусити, лімфаденіти, підгострі тиреоїдити, менінгоенцефаліти, міеліти, менінгіти, енцефаломієліту у поєднанні з уртикарний васкулітами, демієлінізуючі захворювання в поєднанні з полірадікулопатіямі, міокардити, міоперікардіти, саркоїдоз, перінефріти, перигепатити, абсцеси печінки, періспленіти, ендометрити, аднексити, сальпінгіти, уретрити, епідидиміти, простатити, проктити, гідраденіта, олігоартріти, спондилоартрити, можуть провокувати малігнізуються процеси.
Дані (Gaydos CA, Palmer L, Quinn et al., 1998) за генетичної організації послідовностей основних білків - функціональних компонентів білкового синтезу хламідій показали більше філогенетичне спорідненість між Chl.psittachi і Chl. pneumoniaе, ніж між цими видами і Chl.trachomatis. Stephens RS, Kalman S, Lammel C et al. (1998) проаналізували 1042519 пар основ геному Chl. trachomatis і виявили значну филогенетическую мозаїку генів хламідій, що включає величезне число генів, що походять від еукаріотів, безсумнівно, еволюційно обумовлену і пов'язану з особливостями внутрішньоклітинного паразитизму, властивого хламидиям і які виникають при цьому феноменом "генетичного дрейфу" (Р. Б. Хесин, 1984).
Так, у хламідій були виявлені деякі асоційовані з хроматином білки, типові тільки для еукаріотів і забезпечують еукаріотичний механізм нуклеотидної конденсації і деконденсації. Ці дані можуть пояснювати причини ініціювання в процесі хламідійної інфекції аутоімунних захворювань організму-господаря, що, ймовірно, пов'язано із захопленням хламідіями фрагментів послідовностей білків організму-господаря, які, будучи експресувати хламідіями на поверхні клітин в порядку молекулярної мімікрії при захисті від швидкого раcпознаванія иммуной системою , провокують надалі аутоімунні реакції проти власних тканинних антигенів. Доказом цього положення, зокрема, явлются роботи Yi Y, Yang X, Brunham RC et al. (1997), які пояснили Иммунопатологию хламідійної інфекції кореляцією з імунною відповіддю на білок хламідій hsp60.
Цю асоціацію може пояснити індукція аутоімунного відповіді на власне hsp60, так як ці 2 білки мають високу ступінь ідентичності амінокислотної послідовності. Іншим прикладом є L7 - один з рибосомальних білків, найбільш часто взаємодіючих з антитілами при ревматичних аутоімунних захворюваннях. (Hemmerich P, Neu E, Macht M, (1998)). Комп'ютерний аналіз виявив область всередині іммунодомінантного епітопів L7 (пептид II), яка у високому ступені гомологічна амінокислотної послідовності 264-286 головного сигма-фактора РНК-полімерази хламідій (Chl. trachomatis). Зв'язування аутоантитіл з пептидом II інгібувати гомологічним сигма-пептидом.
Ці результати припускають, що молекулярна мімікрія включена в ініціацію анти - L7 - аутоантіответа і пояснює Иммунопатологию хламідій в плані системних ревматоїдних захворювань. O існування впливу на генетичну організацію білків зовнішньої мембрани хламідій з боку імунної системи організму-господаря свідчать дані з порівняльного генетичного аналізу головного білка зовнішньої мембрани хламідій (МОМР), отримані Stothard DR, Boguslawski G, Jones RB (1998) на прикладі 40 штамів і 11 сероварів, які показали, що варіації в послідовності МОМР обумовлені скоріше тиском з боку імунної системи (оскільки цей білок є основним лігандом для відповіді з боку різних типів імунокомпетентних клітин), ніж функціями патогенності, тканинного тропізму, типами маніфестації захворювання і т.п.
Інвазивності хламідій пов'язують з будовою вуглеводної частини головного ліпополісахариди їх зовнішньої мембрани. Kuo C, Takahashi N, (1996) показали, що провідна роль у інвазивності по відношенню до різних клітин організму належить залишкам манози в олігосахаридів, пов'язаних з головним білком зовнішньої мембрани хламідій, які опосередковує прикріплення хламідій до заражають клітини. Проникнення хламідій в організм відбувається через слизові оболонки: очі, нижнього відділу урогенітального тракту, прямої кишки, легенів. Зараження відбувається пасивно, шляхом фагоцитозу "елементарного тільця". Стадії хвороби, які розвиваються після інфікування хламідіями, опосередковані імунною відповіддю. В експерименті на тваринах показано важливість імунної відповіді для звільнення від інфекції.
Будучи облігатним внутрішньоклітинним паразитом, хламідії проходять двофазний жізненнний цикл, який включає розмноження паразита всередині клітин, недоступне для циркулюючих антитіл. Пептиди, що відбуваються з білків зовнішньої мембрани хламідій не включаються до презентірованіе ні по класу I, ні по класу II. Це обумовлює широке поширення інфекції, персистенції її в організмі, перехід в переважно субклінічні форми перебігу. Встановлено, що 90% людей, інфікованих Chl.pneumoniae, мають незначні клінічні симптоми інфекції або повна їх відсутність Це пов'язано з тим, що хронічний хламідіоз робить неефективними захисні тригерні перемикання імунної системи.
В даний час ідентифіковано лише кілька іммунодомінантних білків хламідій. Головний білок зовнішньої мембрани хламідій (МОМР) вважається первинним місцем взаємодії з Т-клітинами у Chl. trachomatis, специфічним у залежності від серовара хламідій. МОМР представляє собою трансмембранний порін, частини якого локалізовані на поверхні Chl. trachomatis. Відповідно, гуморальну імунну відповідь спрямований проти варіабельних, поверхнево-експонованих доменів цього білка (P. Mygind, G. Christianssen, et al., 1998). У Chl.pneumonia цей білок не виявляється на поверхні і, відповідно, інфекція, що викликається цим патогеном менш імуногенною. Білок зовнішньої мембрани хламідій-2 (ОМР 2) є ділянкою зв'язування з імунною системою і для Chl.pneumoniaе, і для Chl. trachomatis.
У модельних експериментах були ідентифіковані епітопи ОМР-2, за якими відбувається взаємодія з Т-хелперно клітинами. Цей білок є конституційним для зовнішнього мембранного комплексу хламідій, він був виділений із зруйнованих елементарних тілець. Точна топологія ОМР-2 не встановлена, відомо лише, що частина його епітопів експонуються в периплазмі. Тому, він, ймовірно, є хламідійний варіант пептидоглікану. Шляхи подальшого розповсюдження інфекції залежать від стану макрофагальної функції, від функцій інших імунокомпетентних клітин, від способу перемикання цитокінової відповіді по Th1 або Th2 типу, від рівня секреції інтерферону-гамма і цитокінів, від рівня іммуноопосредованную секреції NO, тощо. Dean D, Millman K et al. (1997), було показано, що клони Т-лімфоцитів миші пригнічують внутрішньоклітинний зростання мишачих штамів Chl. trachomatis шляхом цитокін-опосередкованої індукції системи NO-синтази в епітеліальних клітинах.
Ці дані і недавні статті, що показують, що епітеліальні клітини людини можуть секретувати NO через експресію NО-синтази, дозволили припустити, що NO включений в захист слизової від хламідій і інших патогенів, що інфікують епітеліальні клітини. Було виявлено, що хламидийно-специфічні, цитокіни-секретирующие Т-лімфоцити миші можуть пригнічувати интраэпителиальноклеточный зростання людських штамів Chl. trachomatis (серовар E і H) через активацію NO-cінтази, коли клони сокультівіруют з інфікованими хламідіями епітеліальними клітинами. Більш того, обробка інфікованих клітин 50 мМ донора NO - S-нітрозо-L-глютатіону безпосередньо придушувала штами хламідій людини. Ці результати свідчать про правильність гіпотези про інтерферон-індуковану NO - синтезі, який може вносити внесок у контроль хламідійної інфекції у людей.
Rasmussen SJ, Eckmann L, (1997) запропонували гіпотезу патофізіологічного механізму, що пояснює розвиток запалення при хламідійної інфекції і призводить до руйнування тканин. При запаленні гострий відповідь господаря на хламідії на поверхні слизової ініціюється і підтримується клітинами епітелію циліндричного типу, основною екологічною нішею хламідійної інфекції. Наступним етапом є up-регуляція експресії мРНК і секреція прозапальних цитокінів IL8, GRO-альфа, GM-CSF і IL6. Важливо, що на противагу швидкої і нетривалої індукції цитокінів, наступного після інфекції іншими інвазивними бактеріями, епітеліальний відповідь на хламідії відкладається на 20-24 години після інфікування, тобто на час тривалості життєвого циклу хламідій (2-4 дні) і вимагає білкового синтезу. При цьому підвищена секреція прозапальних цитокінів може бути опосередкована IL-1-альфа, який вивільняється при лізису інфікованих епітеліальних клітин і може підвищувати запальний відповідь шляхом стимулювання продукції цитокінів неінфікованими сусідніми клітинами.
Ojcius DM, Bravo de Alba Y, Kanellopoulos JM, et al. (1998) вивчили взаємодію хламідій з дендритними клітинами в місці інфекції і зробили висновок, що дендритні клітини руйнують "елементарні тільця" Chl.trachomatis і Chl.psittaci і грають важливу роль в ініціюванні Т-клітинної відповіді in vivo. Хламідії поглиналися дендритними клітинами неспецифічним чином через макропіноцітоз і макропіносоми, зливалися безпосередньо з лізосомами дендритних клітин, які експресують молекули MHC класу II. Дана взаємодія індукувало дозрівання дендритних клітин, причому презентірованіе екзогенного антигену було придушене протягом першого дня інкубації, хоча зазвичай антигени хламідій презентують і розпізнаються специфічними по відношенню до них CD4 + Т-клітинами. У роботі Magee DM, Williams DM, et al. (1998) визначали в експериментах з використанням мишачих моделей роль CD-4, CD-8-Т-клітин у первинній інфекції Chl.pneumoniaе / trachomatis. Отримані ними дані дозволяють припустити, що присутність інтерферону-гамма і подальша супресія внаслідок продукції IL-4 веде до відповіді Th1-типу, що знищує внутрішньоклітинні патогени. Здатність макрофагів відповідати агресією під час раннього контакту з антигеном, як виявилося, є критичним чинником в розвитку відповідного Т-клітинної відповіді.
Важливо, що деякі чинники організму можуть впливати на функції макрофагів і поляризацію Т-клітинної відповіді, а саме - перемикання Th1 відповіді на Th2 і, таким чином, різко знижувати можливості організму у придушенні хламідійної інфекції. Інтерферон-гамма є головним ефекторним механізмом клітинно-опосередкованого імунної відповіді проти хламідій. Це доведено значним числом робіт, в тому числі Lampe MF, Wilson CB, et al. (1998). Автори показали, що миші, дефектні за здатністю синтезу інферферона-гамма втрачали здатність пригнічувати інфекцію в порівнянні з тваринами контрольної групи з нормальною продукцією інтерферону. У той же час виявилося, що продукція інтерферону-гамма перенесеними цитотоксичними Т-лімфоцитами недостатня, щоб компенсувати недостатність імунної системи у дефектних за інтерферону мишей, і передбачає існування більш складного механізму захисту.
Tseng CTK, Rank RG, et al. (1998) показали, що домінантною клітинної популяцією у генітальному тракті є CD4-Th1 популяція і, що підвищена кількість інтерферон-гамма секретирующих клітин CD4 було виявлено в ранній фазі інфекції. Клітини-натуральні кілери відповідають за ранній синтез інтерферону-гамма. NK-клітини з'являються у генітальному тракті в ранні 12 годин після інокуляції інтравагінальної інфекції. Важливо, що при зменшенні кількості клітин-кілерів перебіг інфекції загострювалося і приводило до Th-2 відповіді, що підтверджувалося збільшеною продукцією іммуноглобулінових G1-антитіл. Отже, клітини-кілери не тільки відповідають за продукцію інтерферону-гамма у ранньому відповіді на хламідійну інфекцію у генітальному тракті мишей, але і є значним фактором розвитку Th-1-CD4 відповіді при контролі за інфекцією.
За даними Blander SJ, Amortegui AJ (1997) в імунологічний відповідь проти хламідій залучений IL-5, головний цитокін, відповідальний за продукцію еозинофілів. При цьому підвищені рівні гамма-інтерферону асоціювалися з раннім імунною відповіддю у генітальному тракті проти хламідій, тоді як підвищені рівні IL-5 - з персистуючою інфекцією. Які молекулярні особливості взаємодії хламідій і клітин-господарів? У роботі Hackstadt T, Fischer ER, et al. (1997) показано, що хламідії самодіссоцііруются з ендоцітозного шляху незабаром після поглинання клітиною шляхом активної модифікації вакуолі, яка набуває здатність до злиття з екзоцітознимі везикулами, що містять сфінгоміелін.
Взаємодія з цим секреторне шляхом, як виявилося, підтримує патогенетичний механізм, який дозволяє хламидиям не бути розчиненими і перевареними в лізосомах. Одним з важливих початкових подій, як показали Scidmore MA, Rockey DD, Fischer ER, (1996) під час хламідійної інфекції є експресія ранніх генних продуктів, які ефективно дисоціюють хламідійні вакуолі з ендоцітозно-лізосомне шляху і можуть зливатися зі сфінгоміелін-містять екзоцітознимі везикулами. З цими процесами пов'язана подальша доставка вакуолі в область апарату Гольджі клітини-господаря. Інгібування ранньої транскрипції чи трансляції хламідійних білків призводить до того, що містять хламідії везикули виявляються нездатними розподілятися в цитоплазмі, і вони зливаються з лізосомами. Отже, везикулярні взаємодії при включенні хламідій визначаються модифікацією ендоцітозних везикул паразитом.
У роботі van Ooij C, Apodaca G, Engel J et al. (1997) показано, що Сhl.trаchomatis реплікується всередині мембранно-зв'язаного компартмента, що знаходиться в цитоплазмі клітини-господаря і що екзогенномечение ліганди можуть транспортуватися всередину вакуолі. Змінена розподіл деяких маркерів ендоцітозного шляху і повільне Рециклювання міченого трансферину відповідає гіпотезі про те, що хламідійна вакуоль взаємодіє з ендоцітозним шляхом клітини-господаря. Хламідійна вакуоль не пов'язана міцно з ендоцітозним компартментом. Це унікальна і динамічна органела, яка має деякі загальні характеристики з реціклірующімі ендосомамі клітини-господаря.
Взаємодії між ранніми і пізніми ендосомальнимі компартментах, а також з апаратом Гольджі, мабуть, є джерелом мембранних компонентів і нутрієнтів для реплицируются хламідій. Але при цьому, як було показано Heinzen RA, Hackstadt T (1998), мембрана паразітоформной вакуолі хламідій представляє собою активний бар'єр між реплікується бактерією і багатою життєво необхідними речовинами цитоплазмою клітини-господаря, так як не було виявлено пересування молекул з молекулярною масою менше 520 кДа з цитоплазми в паразітоформную вакуоль. Отже, хламідійна паразітоформная вакуоль не є проникною для пасивної дифузії невеликих молекул, а необхідні нутрієнти отримує тільки через відкриваються в мембрані канали.
Дані з клінічної картині різних видів хламідіозу досить різноманітні і великі. Особливо цікаві, на наш погляд, нові дані про участь Chl.pneumoniae в патогенезі атеросклерозу і серцево-судинних захворювань. Кардіоваскулярні захворювання є лідерами за морбідності і смертності у всьому світі. Існують численні незалежні фактори ризику атеросклерозу і серцево-судинних захворювань, включаючи вік, стать, кров'яний тиск, індекс маси тіла, куріння, рівні ліпідів (тригліцериди, загальний холестерин, ліпопротеїди холестерину високої щільності, низької щільності та дуже низької щільності), сечової кислоти, заліза, гомоцистеїну, гормонів, реніну, фібриногену, в'язкість плазми, кількість лейкоцитів, ступінь аггрегаціі тромбоцитів.
Яка роль мікроорганізмів у розвитку кардіоваскулярних захворювань? Протягом декількох років різні групи дослідників повідомляли про те, що респіраторний патоген бактерія Chl.pneumoniae асоційована з хворобами коронарних артерій. Дійсно, ці дослідження показали, що хламідії є незалежним чинником ризику, що знаходяться в більш сильному зв'язку з даною патологією, ніж вік, гіпертензія і рівень ліпідів. Muhlestein et al. (1998) повідомили, що 79% проб, узятих з коронарних артерій пацієнтів після коронарної атероектоміі були позитивні по хламідій. Хламідії руйнують ендотеліальні клітини, викликаючи критичний імунну відповідь. Місцеві лімфоцити і макрофаги, що стягують до місця інфекції, можливо, продовжують цикл руйнування і репарації.
Зруйновані клітини, включаючи інфіковані хламідіями артеріальні ендотеліальні клітини - викликають підвищення вивільнення тканинних факторів прокоагулянтной активності, які викликають тромбоз і адгезію тромбоцитів. У дослідженнях in vitro було показано, що тканинної фактор прокоагулянтной продукції в інфікованих клітинах вище в 4 - 12 разів, ніж у неінфікованих. Хронічне, індуковане хламідіями, руйнування ендотелію, запалення, адгезія тромбоцитів, тромбоз, проліферація гладко-м'язової тканини і відкладення холестерину призводять до формування атером.
Триваюче розмноження инфицирующего мікроорганізму посилює патологічний процес, створює хронічні умови, в які вносять свій внесок додаткові фактори, такі як дієта і стрес, інші інфекції. У значній кількості досліджень (Ouchi K, Fujii B, Kanamoto Y, et al, 1998; Gupta S, Camm AJ 1996; Cacoub P, et al, 1997; Pai J, Knoop FC, et al, 1998; Gibbs RG, Carey N , Davies AH, 1998; Fryer RH, Schwobe EP, et al. 1997; Kuo CC, Jackson LA et al, 1995) було також виявлено, що бактерії Chl.pneumoniae в значній мірі асоційовані з розвитком атеросклерозу і є досить поширеною причиною інфаркту міокарда та інсульту.
Ефект цей може бути результатом прямої колонізації стінок судин в процесі інфекції. Ця локальна інфекція прямо впливає на стінку посудини, результатом чого є прогресування атеросклерозу, але може опосередковано активувати ендотеліальні аутоімунні процеси. В інших випадках, вплив хронічної інфекції на прогресування атеросклерозу може надавати додатковий ефект на підвищення неспецифічних запальних реакцій у всьому організмі.
Як і інші варіанти запальної відповіді, хронічна бактеріальна інфекція може збільшувати предсуществующие атеросклеротичні освіти шляхом підвищення Т-клітинної активації, що може вносити свій внесок у руйнування внутрішньої поверхні "кришки", що призводить до деструкції атеросклеротичної бляшки зсередини, наростання атеросклеротичного процесу, і, отже, подальшого підвищення Т-клітинної активації і ще більшої дестабілізації внутрішнього вмісту і руйнування тромбоцитів, а в підсумку до прогресування ішемічного синдрому і значного посилення атеросклеротичного процесу. Отже, хронічна бактеріальна інфекція може грати роль в ініціації, прогресії і дестабілізації атеросклеротичних бляшок.
Ouchi K, Fujii B, Kanamoto Y, et al, (1998) припустили асоціацію атеросклеротичних кардіоваскулярних захворювань з наявністю інфекції Chl.pneumoniaе. Матеріал, отриманий від симптоматичних пацієнтів з коронарною хворобою серця (29) та облітеруючий атеросклероз (10), яких піддавали ендоатероектоміі, досліджували на наявність Chl.pneumoniaе методом ПЛР, а також методом імуногістохімічного фарбування з використанням специфічних моноклональних антитіл. Серед 29 пацієнтів з хворобою коронарних артерій Chl.pneumoniaе була виявлена у 13, 16 і 20 в різних методах або їх сполученнях. Chl.pneumoniaе була також виявлена в клубових артеріях у 4 пацієнтів, 3, 5, 10 різними методами або їх поєднаннями. На думку Gupta S, Camm AJ (1996), який нещодавно виник інтерес до взаємозв'язку інфекції Chl.pneumoniaе і патогенезу та прогресії атеросклеротичних захворювань заснований на цілій низці епідеміологічних досліджень, патофізіологічних досліджень, лабораторних експериментів, тварин моделях і на пілотних дослідженнях по застосуванню протівохламідійних антибіотиків.
Чи є Chl.pneumoniaе прямою причиною атеросклерозу (і його наслідків) і чи здатні антибіотики надавати протективное роль в плані вторинних рецидивів захворювання залишається неясним і необхідні додаткові дослідження. У роботі Cacoub P, et al (1997) описані системні васкуліти, викликані хламідійною інфекцією. Доведено, (Pai J, Knoop FC, et al. (1998)) що респіраторний патоген Chl.pneumoniaе асоційований з оклюзивний васкулярні захворювання, включаючи атеросклероз і внутрішню гіперплазію. Більш того, використання імуногістохімії, ПЛР, трансмісивною електронної мікроскопії та гібридизації in situ підтвердило взаємозв'язок хламідіозу з патологією судин виявленням мікроорганізму в осередках атеросклерозу. Це підтверджено Gibbs RG, Carey N, Davies AH et al. (1998) довели, що Chl.pneumoniaе виявляється у вогнищах атеросклерозу прямими і непрямими методами значно частіше, ніж у стінці здорових судин.
У дослідах на тваринах моделях показано, що Chl.pneumoniaе може бути дисемінована гематологічних під час інфекції легенів і, що вона зумовлює чіткий тропізм атеросклеротичних утворень. У роботах in vitro показано, що Chl.pneumoniaе здатні інфікувати, виживати і розмножуватися в клітинах стінки судин людини і, що Chl.pneumoniaе може провокувати клітинно-опосередкований цитокінової відповідь, який спостерігається як системно, так і локально.
Було показано, що, принаймні, 2 Клінічна значущих антибіотика-макроліда можуть надавати виражену протекторну дію у пацієнтів з інфарктом міокарда. Більш того, виявилися успішними спроби у встановленні терапевтичної ролі антибіотиків у лікуванні хвороб периферичних артерій. За даними Fryer RH, Schwobe EP, et al. (1997) Chl.pneumoniaе виявилася пов'язана з міокардіальних інфарктами і розвитком атеросклерозу, що було підтверджено епідеміологічними даними, імуногістохімічними і електронномікроскопічного дослідженнями.
Механізми цього процесу залишаються невивченими. Для вирішення цього питання використовували культивовані клітини ендотелію вен і перевіряли, чи можуть Chl.pneumoniaе і Chl. trachomatis (типи H and L2/434/BU) їх інфікувати. Додатково визначали здатність інфікованих клітин експресувати прокоагулянтних тканинні фактори (за допомогою хромогенних субстратів), кількісно оцінювали адгезію тромбоцитів до клітин, інфікованих хламідіями. Виявили, що типи Chl. pneumoniae, Chl. trachomatis тип H, і Chl. trachomatis L2/434/BU можуть інфікувати людські ендотеліальні клітини вен і стимулювати експресію тканинного фактора, який досягає піку через 18 годин після інфікування.
Адгезія тромбоцитів значно підвищувалася, якщо ендотеліальні клітини інфікувалися різними видами хламідій. Ці дослідження, проведені in vitro, припускають можливий патогенний механізм, який може пояснити асоціацію тромбоутворення з інфекцією Chl.pneumoniae, включаючи патологічне збільшення тканинного фактора людськими ендотеліальними клітинами, які посилюють локальне склеювання тромбоцитів. Вплив хламідійної інфекції на патогенез аутоімунних захворювань органів дихання - питання багато в чому спірне. З одного боку, були отримані чіткі докази ролі інфекції Chl.pneumoniae у розвитку астми (Szulakowski P, Pierzchala W (1998), Hahn DL, Dodge W, McDonald R (1991,1998)), але багато дослідників сумніваються в справедливості даної гіпотези, що цілком зрозуміло, з огляду на досить широке поширення даної інфекції в багатьох країнах світу на сьогоднішній день.
На думку Hahn DL, McDonald R et al. (1998) Chl.pneumoniae може викликати гострі респіраторні захворювання (синусити, бронхіти, пневмонію). Автори вважають, що гостра респіраторна інфекція Chl.pneumoniae може призвести до розвитку астми. Хронічний бронхіт, гострі респіраторні захворювання Chl.pneumoniae у раніше не хворіли, неастматичного пацієнтів можуть призвести до хронічної астмі. Отже, пацієнти з цією патологією повинні бути досліджені на присутність Chl.pneumoniae. Отже, Chl.pneumoniae є найчастішою причиною гострих і персистуючих інфекцій респіраторного тракту, може призводити до ускладнень у івде отитів. (Falck G, Engstrand I, et al. (1998).
Korman TM, Turnidge JD, Grayson ML et al. (1997) описали пацієнта з інфекцією Ch.pneumoniae, у якого була виявлена церебральна дисфункція, що супроводжується розладом дихання, яке довелося підтримувати шляхом штучної вентиляції легенів. Chl.pneumoniae є важливим респіраторним патогеном з безліччю клінічних проявів, включаючи неврологічні синдроми, і досить часто виявляємо при менінгоенцефалітах та інших неврологічних ускладненнях. Таким чином, слід обов'язково включати обстеження на хламідіоз при різних церебральних дисфункціях.
Чи може хламідійна інфекція бути пов'язаної зі злоякісним ростом? Згідно з даними Anttila TI, Lehtinen T, Leinonen M, et al. (1998), це в достатній мірі ймовірно, враховуючи, що маркери хронічної інфекції Chl.pneumoniae асоційовані з раком легенів. Автори даної роботи досліджували взаємозв'язок між хронічної хламідійної інфекцією (Chl.pneumoniae і Chl.trachomatis) і злоякісними лімфомами у 72 пацієнтів з лімфомами. Вони виявили високий ступінь їх кореляції у вигляді присутності імунних комплексів до Chl.pneumoniae у хворих з неходжкінської лімфомою.
До цих пір не визначені основні механізми, що лежать в основі розвитку реактивних артритів, що розвиваються після інфікування хламідіями. Чи є синовіоцити природними клітинами-господарями хламідій, служать чи резервуаром інфекції в організмі? Які механізми ініціювання та розвитку аутоімунних процесів у тканинах суглобів? Мабуть, в їх основі лежать особливості організації геному хламідій, при якій внаслідок тривалого паразитичного існування усередині клітин еукаріотичних господарів, склалася така філогенетична мозаїка генів хламідій, при якій продукти генів, що походять від еукарітов експресуються на поверхні зовнішньої мембрани хламідій, що може грати певну роль у порушенні механізмів нормальної імунологічної толерантності організму-господаря і приводити до розвитку імунної відповіді організму-господаря проти власних антигенів. Феномен "молекулярної мімікрії" був описаний в ряді робіт, але отримує все більше підтверджуючих даних.
Braun J, Tuszewski M, et al (1997,1997) при дослідженні методами ПЛР внутрішньосуглобового присутності ДНК 8 видів бактерій показали, що бактерії, можливо, відіграють критичну патогенетичну роль у розвитку реактивного артриту та інших форм спондилоартропатий, а також хвороби Лайма. Однак, хоча й існують докази локальної персистенції бактеріальних антигенів всередині суглобів, тим не менше до сих пір не існувало методів прямого визначення життєздатних мікробів в периферичних суглобах. У даній роботі визначали ДНК окремих видів бактерій в синовіальної матеріалі методом ПЛР. Застосування молекулярних технологій дозволило одночасно визначати 8 бактеріальних геномів при артритах.
Біопсію брали з крижових зв'язок пацієнтів реактивний артрит, недиференційованим спондилоартрити, недиференційованим олігоартріти, ювенільний хронічний артрит, ревматоїдний артрит, анкілозивний спондиліт, щоб дослідити на утримання бактеріальної ДНК. Отримані зразки перевіряли на наявність ДНК наступних бактерій: Chl. trachomatis, Chl. pneumoniae, Yersinia enterocolitica, Salmonella enteritidis, Campylobacter jejuni, Shigella flexneri, Klebsiella pneumoniae, і Borrelia burgdorferi. Бактеріальну ДНК виявили в периферичних суглобах, а також у крижових. Відсутність бактеріальної ДНК у пацієнтів зі спондилоартритами пояснюється, можливо, наявністю аутоімунних механізмів, що включаються на пізніх стадіях хвороби.
Бактеріальну ДНК виявили в периферичних суглобах пацієнтів з олігоартропатіямі і хронічним ювенільний артрит, (але не у випадках реактивного артриту), неспецифічних спондилоартропатий, або ревматоїдного артриту. Визначення бактеріальної ДНК в синовіальної матеріалі методом ПЛР дає корисну діагностичну інформацію, особливо в тих випадках, коли присутні декілька мікробів або антитіла не визначаються. Неможливість виявлення бактеріальної ДНК у пацієнтів з реактивним артритом і неспецифічними спондилоартропатиях пов'язана, ймовірно, з тривалістю захворювання і припускає, що тут включаються аутоімунні механізми пізніх стадій хвороби.
Inman RD, Chiu B (1998) використовували експериментальну модель у вигляді стабільних клітинних ліній синовіоцити, отриманих із суглобів щурів, які сокультівіровалі з Chl.trachomatis таким чином, що відбувалося мікробне зараження клітин, які потім ін'єктувати всередину суглоба, розділяючи ранню та пізню фази інфекції . Рання фаза характеризувалася інтенсивним переважно нейтрофільний синовітом, що обмежують рухливість суглоба, дисемінацією хламідій в печінці і в селезінці, наявністю життєздатних хламідій в суглобах. Пізня фаза характеризувалася значною змішаної мононуклеарной інфільтрацією в суглобі, його диспластичними змінами, що розвивається потім часткової репарацією, відсутністю живих хламідій і розвитком вираженого гуморального процесу. Ця модель показала, що інтенсивний синовіт може бути індукований цим внутрішньоклітинним патогеном і що синовіоцити є реальними клітинами-господарями для хламідій і можуть функціонувати як природний резервуар інфекції в організмі.
Rodel J, Straube E et al (1998) при вивченні здатності хламідій стимулювати цитокінової відповідь у фібробластоподібних синовіоцити в культурі інфікували їх Chl.trachomatis серотипу Е. Виявилося, що ці клітини здатні підтримувати зростання хламідій в системах in vitro. Chl.trachomatis стимулювала синовіоцити до продукції IL-6, TGF-beta, GMCSF, а IL-1 бета підвищував продукцію IL-6 і GMCSFв інфікованих клітинах. Обробка інтерфероном-гамма приводила до вивільнення TNF-альфа у відповідь на хламідійну інфекцію. Таким чином, індукований хламідіями цитокінової відповідь синовіальних фібробластів може вносити свій внесок у зміну синовіальної мембрани, викликаючи запалення.
Yin Z, Braun J, Neure L, Wu P, et al. (1997) досліджували, чи присутній предомінантний тип 1 Т-хелперів (Th1) або Th2 цитокінової патерн в суглобах пацієнтів з реактивними артритами або рівні цитокінів можуть модулюватися іншими цитокінами або антіцітокінамі. 11 пацієнтів з реактивними артритами, розвиненими внаслідок інфекцій Chl.trachomatis, Yersinia enterocolitica, або Salmonella enteritidis були обстежені на присутність Th1/Th2 цитокінів в суглобах. Виявлено, що після стимуляції специфічними бактеріями мононуклеари синовіальної рідини секретують низькі кількості інфтеферона-гамма і TNF-альфа, але високі кількості IL-10. IL-10 відповідає за супресію IFN-гамма і TNF-альфа. Ці дані вказують, що Th2 цитокінової патерн необхідний для елімінації асоційованих з реактивними артритами бактерій. Отже, баланс IL10-IL-12 відіграє критичну роль у регуляції цитокінового патерну в суглобах хворих реактивними артритами.
Згідно Gerard HC, Kohler L, Branigan PJ, Zeidler H, et al. (1998) головним клітинним господарем персистуючої синовіальної інфекції Chl.trachomatis є макрофаги. У результаті інфекції в культурі людських моноцитів-макрофагів останні набували аберантних морфологію і не продукували нових елементарних тілець, що, мабуть, відображає ситуацію всередині суглоба. Важливо, що гени, що кодують 57 кДа hsp 60 білок експресуються бактерією вже через 10 днів після інфікування культури, але рівні транскриптів гена головного білка зовнішньої мембрани хламідій (omp1), як виявилося, регулюються додатково.
Вестерн-аналіз цих пізніх білків підтвердив присутність генного продукту hsp60 і явна відсутність головного білка зовнішньої зовнішньої мембрани хламідій в інфікованих моноцитах. Таким чином, під час починається інвазії моноцитів людини in vitro хламідії не продуктивні, але метаболічно активні, що підтверджує патерн їх транскрипционной активності. Все це у високому ступені співвідноситься з відомим персистированием інфекції Chl.trachomatis в синовіальній тканині in vivo.
Deane KH, Jecock RM, Pearce JH, Gaston JS (1998) охарактеризували епітопи всередині 60кДа hsp60 білка, що розпізнається HLA-DRB1 * 0401рестріктірованнимі Т-клітинним клоном, отриманим у пацієнта з реактивним артритом. Виявилося, що для ефективного розпізнавання важлива середня довжина пептиду, а також наявність валіну. Оптимальна відповідь спостерігали з 14-членні пептидом.
Послідовність певного епітопів була ідентичною hsp 60 з обох видів Chl.trachomatis і Chl. pneumoniae. У зв'язку з досить широким розповсюдженням хламідійної інфекції у всьому світі, (тільки в США виявляють близько 2.5 млн нових випадків на рік), останнім часом значно зросла кількість даних про її шкідливу дію на репродуктивну систему. У більшому відсотку випадків висхідні генітальні інфекції є полімікробних (Judlin P (1998)). Chl.trachomatis часто поєднується з E.coli, стрептококами і анаеробними інфекціями.
Діагностика хламідійної інфекції важка, оскільки звичайні симптоми: біль у нижній частині живота і цервікальні порушення не мають специфічності або можуть бути зовсім. При дослідженні на генітальний хламідіоз обов'язкові бактеріологічні дослідження внутрішньоматкових і внутріцервікальних проб. Вважають, що Chl.trachomatis є головним патогеном репродуктивного тракту. Виявилося також, що імунопатологічні механізми хламідіозу у відношенні органів і тканин репродуктивного тракту, як і у випадку ураження суглобів, опосередковані ініціюванням аутоімунної реакції через білок hsp60.
Sziller I, Witkin SS, Ziegert M, Csapo Z, Ujhazy A, Papp Z (1998) вивчали клінічні та гістологічні кореляції імунореактивності до Chl.trachomatis і до епітопів hsp60 серед жінок з ектопічної вагітністю. Серологічний відповідь до 13 синтетичним пептидів, що відповідають головним епітопів hsp60 визначали у 67 жінок з ектопічної вагітністю та у 45 жінок з мимовільними викиднями. Сальпінгіт був виявлений в 43.3% випадків пацієнток з позаматковою вагітністю.
Його наявність корелювало з антитілами до двох епітопів hsp60 (від 260-271 а.о. і 411-422 а.о.). Антитіла до цих двох епітопів в порівнянні з іншими 5 епітопи були виявлені у хворих з формуванням спайкового процесу в області придатків матки. Антитіла до епітопів 260-271 і 188-199 виявлялись у пацієнток із запаленнями малого тазу. Пацієнти з ектопічної вагітністю мали більший в порівнянні з внутрішньоматкової локалізацією вагітності рівень антитіл IgG до Chl.trachomatis. Жінки, інфіковані Chl.trachomatis і з позитивної иммунореактивность по відношенню до епітопів hsp60, мали більшу частоту сальпінгітів і спайок. Навпаки, пацієнти, позитивні тільки по відношенню до антитіл до Chl.trachomatis не відрізнялися від серонегативних пацієнтів за цими категоріями. Отже, індукція спайкового процесу в присутності Chl.trachomatis визначається наявністю антитіл до hsp60.
Схоже дослідження, але на більш широкому клінічному матеріалі провели Kligman I, Grifo JA, Witkin SS (1996), які також прийшли до висновку, що експресія hsp 60 є одним з механізмів, що ведуть до локальної активації макрофагів і Т-лімфоцитів і вивільненню цитокінів. Жінки з спайковимпроцесом мали підвищену кількість антитіл до Chl.trachomatis і hsp60 в перитонеальній рідині.
Присутність hsp60 пов'язують також з розвитком перигепатити і спайкового процесу. Money DM, Hawes SE, Eschenbach DA, (1997) в проспективному дослідженні 157 жінок з клінічним діагнозом пельвіолярного запалення. У 27 жінок лапароскопічно виявили перігепатіт і сальпінгіт, у порівнянні з 46 пацієнтками з одним тільки сальпингитом. Антитіла до хламідійної hsp60 виявили у 67% пацієнтів перігепатітно-сальпінгітной групи і в 28% випадків у групі з одними сальпінгіту. Середній титр був значно вище в першій групі. У порівнянні з жінками з одним тільки сальпингитом пацієнти з перигепатити і сальпингитом не мали значних клінічних або мікробіологічних відмінностей між групами, але демонстрували значно більшу присутність спайок і більш високі титри антитіл до hsp60 білку хламідій.
У роботі Claman P, Honey L et al, (1997) визначали присутність головного білка зовнішньої мембрани (МОМР) Chl.trachomatis в тканини фаллопієвих труб жінок з безпліддям і з хронічним сальпингитом, а також з білатеральної оклюзією труб. МОМР був виявлений у зразках з фаллопієвих труб у 11 з 56 пацієнтів. Середній титр IgG антитіл проти хламідій був значно вище у жінок з наявністю МОМР, ніж у пацієнтів без цього антигену.
Отже, присутність МОМР асоційоване з хронічним сальпингитом і з трубної оклюзії. Завданням дослідження Mol BW, Dijkman B, Wertheim P.et al. (1998) було визначення дискримінаційних значень титрів до хламідій в діагностиці патології труб у хворих з безпліддям. Загальна кількість пацієнтів склало 2729 жінок з субфертільностью в 23 самостійних дослідженнях, які привели до важливого висновку про те, що діагностична значимість титрів антитіл до хламідій методами ELISA, мікрофлюоресцентним або імунофлюоресцентний в діагностиці будь трубної патології цілком можна порівняти з результатами ГСГ при діагностиці трубної оклюзії.
Як впливає хламідійна інфекція на гормональну функцію яєчників? Згідно з даними цілого ряду дослідників хламідіоз викликає значні зміни оваріальної функції. Так, Crowley T, Horner P, et al. (1997) досліджували 1055 жінок на наявність Chl.trachomatis методом ELISA. З 1022 проаналізованих проб, узятих з шийки матки і уретри Chl.trachomatis була виявлена в 8.8% випадків в одному з сайтів, в 2.3% випадків в обох сайтах, 4.9% випадків тільки в пробах з шийки цервіксе і 1.5% випадків тільки з уретри. Таким чином, у зразках з уретри хламідії виявили в 17% випадків.
Аналіз 808 жінок з регулярним менструальним циклом показав зв'язок виявлення Chl.trachomatis з прийомом комбінованих контрацептивів, фазою циклу, віком і станом шийки матки. Значно більша частота хламідіозу була виявлена під час взяття зразків у другій половині циклу. Вік і стан ендоцервікса виявилися більш важливими факторами ризику захворювання, ніж контрацептиви або менструальний цикл. Не менш важливі докази впливу хламідійної інфекції на гормональний статус яєчників були отримані при дослідженні груп хворих безпліддям при проведенні процедур IVF (Sharara FI, Queenan JT Jr, Springer RS, et al. (1997) Keay SD, Barlow R, Eley A, Masson GM , et al. (1998)).
Метою даних робіт є вивчення впливу інфекції Chl.trachomatis на ефективність стимуляції овуляції гонадотропінами. Досліджували 242 пацієнток, що проходять цикли IVF (81 пацієнт у контролі). 94 пацієнтки з недостатнім відповіддю на оваріальна стимуляцію, визначилися в програмі щоденної стимуляції 300 IU ФСГ. У 148 пацієнток був отриманий хороший відповідь на стимуляцію. Сироваткові рівні IgG до хламідій визначали методом ELISA. Значно більш висока частота виявлення сироваткових антитіл до хламідій спостерігалася у пацієнтів зі зниженим відповіддю на стимуляцію ФСГ.Ето дозволяє думати про несприятливий вплив інфекції Chl.trachomatis на оваріальна функцію.
В іншій роботі Sharara FI, Queenan JT Jr, Springer RS, et al. (1997) досліджували сироваткові рівні IgG у великої кількості пацієнтів при проведенні процедури IVF: 194 жінки до 40 років, що пройшли в загальній складності 316 циклів IVF. У 107 жінок (55,2%) при цьому були виявлені підвищені сироваткові рівні антитіл класу IgG проти хламідій. У результаті IVF були отримані дві ектопічні вагітності в групі з позитивними титрами і жодної в групі з негативними титрами.
Експериментальні дані, отримані на тваринах моделях є прямий доказ порушення гормональної функції яєчників при інокуляції Chl.trachomatis. Pal S, Hui W, Peterson EM, de la Maza LM (1998) досліджували фактори, що впливають на індукцію безпліддя на моделі хламідійної інфекції генітального тракту у мишей. Самкам мишей С3Н інтравагінально інокулювати різні дози Chl.trachomatis, в результаті чого у них розвивався цілий ряд клінічних проявів від безпліддя до безсимптомних викиднів, причому інфекцію в середніх і верхніх відділах генітального тракту виявляли в більшому відсотку випадків у мишей, інфікованих під час лютеїнової фази, ніж під час фолікулярної. Ці результати вказують, що швидке терапевтичне втручання може дозволити уникнути наслідків інфікування хламідіями і припускає, що гормональні чинники відіграють вирішальну роль у патогенезі захворювання.
Ми досліджували криві базальної температури, рівні антитіл класу IgG проти мембранного ліпополісахарідной антигену Chl.trachomatis, сироваткові рівні прогестерону (в периферичній венозній крові на 22-23 день менструального циклу) у 15 жінок з безпліддям тривалістю не менше 8 місяців і виявили значну кореляцію між зростанням титрів антитіл до Chl.trachomatis і зниженням рівнів прогестерону (менше 7 нгмл), крива базальної температури у таких хворих була монофазной або мала зниження базальної температури (менше 37 "С) вже через 2-3 дні після среднеціклового підйому. Наші дані підтверджують значний вплив інфекції Chl.trachomatis на функції яєчників і, зокрема, на функцію жовтого тіла, що може в певних випадках бути причиною переривання вагітності на ранніх термінах.
Яка ультраструктура інфікованого Chl.trachomatis ендоцервікса? На тварин моделях було показано (Phillips DM, Burillo CA, 1998), що якщо на початку інфекції спостерігається значна кількість елементарних тілець на поверхні епітеліальних клітин, то через 2 дні після інфікування вони включають в себе значну кількість ретикулярних тілець і деяку кількість проміжних форм. У процесі інфекції in vivo може відбуватися руйнування хламідійних включень усередині цитоплазми інфікованих клітин, в результаті чого формуються аберантних і мініатюрні ретикулярні тільця, описані як персистуючі форми хламідій. Отже, вже в процесі інфікування цервікального епітелію в деяких клітинах формуються персистуючі форми хламідій.
Fejgin MD, Cohen I, Horvat-Kohlmann M, (1997) досліджували наявність внутрішньоматкової фетальної хламідійної інфекції у 26 жінок, у яких був отриманий позитивний результат на присутність специфічних IgA, IgG IgM антитіл до Chl.trachomatis в сироватках пупкового канатика. Було виявлено, що 34.6% обстежених жінок мали значні рівні антитіл до Chl.trachomatis в сироватці пупкового канатика, що вказує на внутрішньоматкову інфекцію. Ці дані вказують, що існує низький, але ймовірний ризик внутрішньоматкової передачі інфекції в результаті присутності її в нижній відділах генітального тракту.
Хламідії у досить великому відсотку випадків є причиною чоловічого безпліддя. Ми вважаємо, що існує принаймні кілька взаємодіючих механізмів пошкодження чоловічої репродуктивної системи в процесі розвитку хламідійної інфекції. Gorpinchenko II, Dobrovol'skaia LI (1997) показали, що при дослідженні чоловіків з запальними захворюваннями статевих органів хламідії виявляються до 57.1% випадків уретритів, уретропростатитів і безпліддя, причому частіше в асоціації з іншими видами мікроорганізмів (бактерії, протозоа, гриби роду Candida та т.д.). Можна припустити, що хламідійна інфекція є провідним патогенетичним ланкою по відношенню до інших видів інфекцій, оскільки порушує безпосередньо функції первинного захисної ланки - макрофагальної.
Мабуть, первинним механізмом пошкодження різних відділів чоловічого репродуктивного тракту є інфікування хламідіями епітеліоцитів та місцевих макрофагів. Зараження епітеліоцитів хламідіями веде до того, що ці клітини починають секретувати цитокіни та активувати макрофаги. Ця захисна реакція не представляє великої небезпеки для хламідій. У той же час метаболіти реактивного кисню макрофагів ("респіраторний вибух") пошкоджують як самі макрофаги, так і епітеліоцити, завдяки активації перекисного окислення ліпідів (ПОЛ) і руйнування подвійного фосфоліпідного шару мембран власних клітин. Далі, активовані макрофаги секретують ряд цитокінів (інтерферон-гамма, фактор некрозу пухлин-альфа, інтерлейкін-1), які призводять до активації фібробластів і епітеліальних клітин і, в тому числі, зростанням адгезивної здатності мембран розташованих поруч неуражених клітин і якнайшвидшому їх інфікування. До порушення цілісності слизової оболонки призводить і пошкодження ендотелію мікросудин чоловічого репродуктивного тракту, що призводить до порушень мікроциркуляції. Здатність Chl. trachomatis тип H, і Chl. trachomatis L2/434/BU інфікувати стінки ендотелію вен була показана Fryer RH, Schwobe EP, et al. (1997), що також стимулює процес тромбоутворення і призводить до порушень мікроциркуляції.
Відомо, що процес дозрівання сперматозоїдів регулюється як тестостероном і ФСГ, так і місцевими тканинними факторами, в тому числі - продуктами макрофагів. Можна припустити, що при наявності реплицируются хламідій всередині тестикулярних макрофагів патерн їх секреції буде значно змінено, що з свою чергу повинно призводити до порушень функцій клітин Сертолі, процесів нормального диференціювання зародкових кліток, а також функцій ряду ферментів біосинтезу тестостерону. Дійсно, Cengiz T, Aydoganli L, Baykam M, et al. (1997) виявили, що при наявності хламідійної інфекції змінюються концентрація сперматозоїдів, їх морфологія і рухливість.
Іншим патогенетичним механізмом порушення чоловічої репродуктивної функції є, мабуть, ініціація аутоімунних процесів. Так, Munoz MG, Jeremias J, Witkin SS (1996) досліджували присутність hsp60 в насінній плазмі і його вплив на антиспермальних імунітет або на локальний імунну відповідь до Chl.trachomatis. Hsp60 був присутній в спермі 14.1% чоловіків, 18.85% чоловіків мали антиспермальні антитіла, 25% були позитивні по IgA проти хламідій і 26.6% мали hsp60-м-РНК. Присутність hsp60 в спермі корелювало з антихламідійний IgA, hsp60-мРНК і антиспермальних антитіл. Таким чином, hsp60 присутній в розчинній формі в спермі в першу чергу тих чоловіків, які мали виражену імунну активацію по відношенню до Chl.trachomatis в їх генітальному тракті Horner PJ, Cain D,
McClure M, et al. (1997) досліджували присутність Chl.trachomatis у 90 чоловіків з гострими негонококковим уретритами після 10-92 днів лікування методами ПЛР і прямої флюоресцентної проби з антитілами. На початку захворювання і під час лікування визначали також hsp60. У 62 (69%) чоловіків хронічний уретрит розвинувся в процесі лікування, а після лікування Chl.trachomatis виявили лише у двох чоловіків.
Антитіла до hsp60 білку були асоціювалися з розвитком хронічного уретриту між 10 і 92 днями лікування. Ці результати підтверджують точку зору про те, що імунна відповідь на hsp60 дуже важливий для розвитку хронічного негонококового уретриту. Можна припустити, що хронічний негонококовий уретрит це не закономірне продовження персистенції хламідій в уретрі, а являє собою аутоімунне захворювання, спровоковане первинним присутністю цієї інфекції і його подальший розвиток не вимагає наявності самого мікробного агента.
Логічно було б очікувати, що додатковим механізмом пошкодження сперматогенного епітелію при хламідіозі буде стимуляція і вироблення антиспермальних антитіл, але не всі дослідники підтримують це положення. Так, Eggert-Kruse W, Rohr G, Probst S, Rusu R et al. (1998) у пацієнтів з асимптоматичною безпліддям не виявили значної взаємозв'язку присутності антиспермальних антитіл у сироватці та зразках сперми, диференційованих за результатами МАР - тесту - (IgA, IgG) і мікробної колонізацією еякулята широким спектром мікроорганізмів. Не було виявлено будь-якої взаємозв'язку між антиспермальних антитілами і мікробними популяціями у їхніх партнерок, навіть якщо у них були виражені ознаки запалення генітального тракту. Більше того, виявлення антиспермальних антитіл не корелювало з запальними змінами придаткових чоловічих залоз.
Ми, однак, вважаємо МАР-тест недостатньо чутливим для обгрунтування подібних тверджень і тому для визначення антиспермальних антитіл класу IgG у сироватці крові хворих хламідіозом використовували ІФА. Ми виявили антиспермальні антитіла одночасно з високими титрами антитіл до хламідій у 26.5% всіх обстежених випадків хламідіозу, при цьому наявність антиспермальних антитіл у високому ступені корелювало з величиною титру антитіл до хламідій, яку вважають залежною від тривалості захворювання.
Згідно з отриманими нами даними при тестуванні антиспермальних антитіл класу IgG, антитіл (IgG) проти ліпополісахарідной антигену хламідій, антитіл (IgG) до цитомегаловірусу (реактиви фірм Seratec, HUMAN, Medac, метод ELISA, система GLP, ІФА-фотометр STAT FAX 303 +) у 40 хворих на хронічний простатит, хламідійна інфекція в 65% випадків і в 100% випадків поєднувалася з цитомегаловірусною інфекцією. Мабуть, підсумкова мікст-інфекція викликає утворення антиспермальних антитіл, які ми виявили в 26.5% випадків. Відомо, що цитомегаловірус вражає клітини ендотелію, причому, цікаво, що патофізіологічної маніфестацією захворювання є руйнування ендотелію, фібробластів і гладком'язових клітин. Наступним найважливішим сайтом для інфекції є ендотеліальні клітини, які злущуються з поверхні судин і циркулюють у периферичній крові, і, мабуть, сприяють поширенню вірусу в організмі.
Оскільки ми виявили підвищені титри антитіл до цитомегаловірусу в 100% випадків у обстежених пацієнтів з хронічним простатитом, ми вважаємо, що простата є також органом - мішенню цитомегаловірусної інфекції, що може, у свою чергу, бути ведучим патогенетичним ланкою для супутніх інфекцій, в тому числі хламідійної. Частота ураження чоловічих допоміжних залоз Chl.trachomatis за даними різних авторів варіює від 8% до 56%, але ми вважаємо, що ця варіабельність зумовлена як популяційними відмінностями, так і застосуванням різних методів діагностики.
Дійсно, Benson S (1992) також показав присутність цитомегаловірусу в тканинах простати у хворих на хронічний простатит. Як відомо, простатит вражає від 25 до 50% всіх дорослих чоловіків. Розпізнають 4 клінічні категорії простатиту: гострий і хронічний бактеріальний простатит, небактерійний простатит і простатодініей. Деякі автори вважають, що в 90% випадків етіологія хронічного простатиту невідома, але багато авторів і ми поділяємо цю точку зору вважають, що в основі даного захворювання лежать вірусні та бактеріальні інфекції.
При інфекціях посилюються процеси перекисного окіленія ліпідів практично у всіх тканинах чоловічої сечостатевої системи, що призводить до руйнування клітинних мембран, зниження рецепції місцевих тканинних гормонів, порушення експресії рецепторів андрогенів в тестикулах, зниження забезпеченості тканин киснем і активності антиоксидантних систем. При хламідійної і супутніх інфекціях чоловічих допоміжних залоз знижується їх оксигенація та рівні ключових цитокінів. Анатомічна близькість джерела масивної мікробної дисемінації, в тому числі цитомегаловірусної - прямої кишки, а також особливу будову простати, в якій знижено присутність кровоносної та лімфатичної систем, обумовлює високу частоту хронічних захворювань чоловічих допоміжних залоз.
Обстеження біопсійного матеріалу методами ПЛР в дослідженнях Krieger JN, Riley DE, Roberts MC, Berger RE (1998) виявило не тільки присутність мікоплазм, хламідій або трихомонад у частини обстежених пацієнтів з хронічним простатитом, але також і мРНК інших мікроорганізмів, некультівіруемих у звичайних умовах, але присутніх у простаті, особливості анатомічної будови якої дозволяють їй служити резервуаром для багатьох мікроорганізмів, які не виявляються традиційними методами. Ці організми можуть бути пов'язані з ознаками запалення в соку простати.
Таким чином, молекулярні методи дозволяють збільшити можливості для ідентифікації мікроорганізмів, некультівіруемих в звичайних умовах у пацієнтів з хронічним простатитом. Ostaszewska I, Zdrodowska-Stefanow B, (1998) при обстеженні 78 чоловіків з симптомами хронічного і підгострого простатиту на вміст антитіл класу IgG проти хламідій виявили підвищені рівні цих антитіл у 30.4% пацієнтів з простатитом і у 8.3% пацієнтів з простатодініей. Corradi G, Bucsek M, Panovics J, et al. (1996) показали присутність Chl. trachomatis у простаті методами електронної мікроскопії і гібридизації in situ.
Чи можливо самовилікування від хламідій? Ми в нашій практиці спостерігали тільки 2 таких випадки (з 120), але Parks KS, Dixon PB et al. (1997) за результатами культурального тесту виявили цей феномен у 32% хворих. Отже, опосередковане імунною системою організму-господаря звільнення від інфекції присутня у невеликої кількості пацієнтів.
Якими мають бути з точки зору біології виду основні принципи лікування хламідіозів? Як це випливає з основних закономірностей взаємодії хламідій та імунної системи при лікуванні таких хворих необхідно проведення імуномодулюючої терапії, такою, яка б стимулювала цитотоксичні Т-лімфоцити на реакцію проти інфікованих хламідіями клітин.
За нашими даними і за даними ряду авторів, таким вимогам відповідає призначення препаратів гамма-інтерферону. При цьому важливо, що низькомолекулярні індуктори гамма-інтерферону викликають утворення недостатньої кількості гамма-інтерферону у іммуноослабленних предсуществующей інфекцією пацієнтів, що практично у всіх випадках призводить до персистенції хламідій, що, зокрема, виражається в збільшенні титрів протівохламідійних антитіл класу IgG і супроводжується посиленням симптоматики захворювання після стандартних курсів індукторів (циклоферон, аміксин та ін.)
Так, ми спостерігали результати лікування 30 хворих чоловіків, інфікованих Chl.trachomatis, які отримували терапію: коаліціада (доксициклін), циклоферон, ністатин, ципролет в рекомендованих дозуваннях у вигляді стандартного курсу, через 2 місяці після закінчення лікування спостерігали замість очікуваного зниження титрів антитіл класу IgG , збільшення величини титрів в 2 рази. Мабуть, недостатня стимуляція вироблення власного інтерферону, отримана при даному способі лікування, лише стимулювала непродуктивний фагоцитоз. Ми вважаємо також, що даному типу пацієнтів не можна призначати масаж простати і фізіопроцедури без одночасного застосування антибіотиків. Пацієнтам з синдромом Рейтера і наявністю антитіл до Chl. trachomatis не можуть бути рекомендовані мануальна терапія, масаж і фізіопроцедури на область суглобів і різних відділів хребта до повного лікування від хламідіозу. Дуже важливо, що після лікування дана група пацієнтів повинна досліджуватися з частотою 1 раз на 2 місяці протягом не менше 2 років на наявність антитіл до Chl. trachomatis.
Отже, хламідіоз - це широко поширене захворювання, відповідальний за широке коло патології органів і тканин. Істинний патогенез хламідіозу, як рецидивуючої інфекції, полягає в персистенції, яка може активувати імунну реактивність. За поточної інфекції незліченну кількість факторів з інгібіторних або модифікує ефектом, що діють з боку організму-господаря можуть викликати зміни в системі "бактерія-хазяїн", що дозволяють організму зберігати непродуктивну фазу зростання хламідій. Аномальні або персистуючі хламідії розпізнаються широким рядом клітин імунної системи. Незліченні чинники, пов'язані з персистенцією хламідій припускають початкову генетичну гнучкість систем їх репродукції, і, отже, імуногенних детермінант, експресують на клітинній поверхні.
Взаємодія будь-якого внутрішньоклітинного паразита (хламідій, цитомегаловірусу, та ін) з клітиною-господарем супроводжується її гетерогенізації, формуванням нових антигенів, ідентичних алогенних і ксеногенні. При хронічної інфекції в організмі підтримується високий рівень аутосенсибілізації даними антигенами, що включають детермінанти тих клітинних систем, в яких патоген розмножується. У результаті повторювані епізоди інфекції викликають хронічне запалення, пов'язане з патологічною стимуляцією імунної системи продуктами детритной походження.
З іншого боку, патологічна стимуляція імунної системи, що виражається розвитком різних аутоімунних реакцій ініціюється і підтримується циркуляцією хламідійних антигенів, що мають спільні епітопи з низкою антигенів людського організму. Це білки теплового шоку, а також L7 - один з рибосомальних білків, найбільш часто взаємодіючих з антитілами при ревматичних аутоімунних захворюваннях. Механізми цього феномена обумовлені специфічними особливостями організації геному хламідій, яка є еволюційно і молекулярно-генетично обумовленої, коли в результаті "генетичного дрейфу" та еволюційного відбору в напрямку "молекулярної мімікрії" антигенів мікробної поверхні в хламидийном геномі виявляються як окремі нуклеотидні послідовності, характерні для організму -господаря і невластиві іншим бактеріям, так і цілі гени, що кодують і окремі фрагменти специфічних еукаріотичних білків, і різні ферментні та реплікативні системи.
Інша частина загального патофізіологічного механізму хламідійної інфекції обумовлена реакціями захисних систем організму-господаря, завдяки якій при хламідійної інфекції розвивається запалення, що веде до пошкодження тканин і розвитку різних ускладнень. На поразку хламідіями епітеліальні клітини, основний сайт хламідійної інфекції в організмі, реагують up-регуляцією експресії мРНК і секрецією прозапальних цитокінів IL8, GRO-альфа, GM-CSF і IL6. Важливо, що на противагу швидкої і нетривалої індукції цитокінів, наступного після інфекції іншими інвазивними бактеріями, епітеліальний відповідь на хламідії відкладається на 20-24 години після інфікування, тобто на час тривалості життєвого циклу хламідій і вимагає білкового синтезу.
При цьому підвищена секреція прозапальних цитокінів може бути опосередкована IL-1-альфа, який вивільняється при лізису інфікованих епітеліальних клітин і може підвищувати запальний відповідь шляхом стимулювання цитокінової продукції неінфікованими сусідніми клітинами. За схожим цитокінового механізму забезпечується ініціювання і перебіг запального процесу в суглобах, коли Chl.trachomatis стимулює синовіоцити до продукції IL-6, TGF-beta, GMCSF, а IL-1 бета підвищує продукцію IL-6 і GMCSF інфікованих клітин.
Ключову роль у взаємодії хламідійної інфекції з імунною системою організму-господаря грає синтез інтерферону-гамма. Показано, що при достатній стимуляції інтерфероном-гамма цитотоксичних лімфоцитів відбувається лізис інфікованих хламідіями клітин, з яких виходять в позаклітинне середовище незрілі і нежиттєздатні проміжні форми хламідій, що і лежить в основі звільнення організму від інфекції.
Наступним критичним моментом звільнення організму від інфекції є поляризація Т-клітинної відповіді макрофагами, опосередкована як інтерфероном-гамма, так і IL4, продукція якого веде до відповіді Th1-типу, здатного знищити хламідійну інфекцію. Отже, початково організм має в своєму розпорядженні передіснуючою захисними механізмами, ефективно знищують хламідії. Але ці механізми досить складні, багатофакторний і в підсумку виявляється, що шляхи подальшого розповсюдження інфекції залежать від стану макрофагальної функції, від функцій інших імунокомпетентних клітин, від способу перемикання цитокінової відповіді по Th1 або Th2 типу, рівнів секреції цитокінів, від рівня іммуноопосредованную секреції NO та багатьох інших факторів, які ще належить визначити.
Отже, численні дані про біологію хламідій приводять до висновку про необхідність якомога більш ранньої діагностики різних видів хламідіозу, проведення такого обстеження, якщо не в скринінговому порядку, то при ряді досить широких показань, наприклад, при ранньому розвитку атеросклерозу, при астмі, при неврологічних порушеннях , оклюзії фаллопієвих труб, хронічному простатиті, лімфаденітах і т.д. Наступним принциповим моментом є моніторингове обстеження виявлених хворих протягом тривалого часу після закінчення курсу антибіотиків з метою своєчасного виявлення та попередження рецидивів. Абсолютним показанням під час лікування хламідіозу є застосування інтерферону-гамма або його індукторів, оскільки даний цитокін є ключовим для активації систем, що знищують хламідії в організмі.
Список літератури
Є. В. Дороніна, В. В. Гайворонський, А. Б. Овсієнко, А. Т. Терешин. Медичний центр ЮНЕСКО "Юнона" Ессентукскій Центральний військовий санаторій Державний НДІ курортології у м. П'ятигорську НДІЦ акушерства, гінекології та перинатології РАМН. Хламідійна інфекція. Механізми взаємодії з імунною системою організму-господаря.