Контрольна робота №1 «Морфологія і фізіологія мікроорганізмів. Інфекція. Імунітет. Загальна та спеціальна вірусологія. Біозахист та біотероризм»

Ім'я файлу: ВАРІАНТ 3 ВІДПОВІДІ.docx
Розширення: docx
Розмір: 47кб.
Дата: 03.06.2021
скачати
Пов'язані файли:
курсовая мерчандайзинг.docx
Реферат №1.docx
Система орфографічних вправ.doc
лаб 2 Карита.docx
лабораторна 3.docx
лабораторна 4.docx
ЕП-2.2 Федосенко.docx
Биполярный транзистор КТ3107 - StudentLib.com.doc
Практична робота 4 (1).doc
Практична робота 4 (2).doc
Практична робота 4 (3).doc
Практична робота 4 (4).doc
full_166850588223930.docx
ЗБТв221 Залюбівська обмін речовин.pptx
ТЕМА 5.docx
курсовая важно!.docx
Новий Документ Microsoft Office Word (2).docx
Медовець О.І_стаття_Фарм.doc
СРСР.docx
Ендокрина_система_Скемська_Сніжана.docx
TPZSAP_lab_1.docx
Порівняння_Борисп_та_бровар_Правки_29_01.docx
Анілін (1).pptx

Кафедра мікробіології

заочна форма навчання -20/21 н.р.

Контрольна робота №1

«Морфологія і фізіологія мікроорганізмів. Інфекція. Імунітет.

Загальна та спеціальна вірусологія. Біозахист та біотероризм»
Варіант 3

Особливості білкового, вуглеводного та ліпідного обміну в бактерій.

Під метаболізмом (від грец. Metabole - зміна, перетворення) розуміють сукупність біохімічних реакцій і перетворень речовин, що відбуваються в мікробної клітині, спрямованих на отримання енергії і подальше використання її для синтезу органічних речовин.

Термін «метаболізм» об'єднує два взаємопов'язаних, але протилежні процеси - анаболізм і катаболізм. Вони притаманні всім живим істотам і є основними ознаками живого.

Анаболізм (харчування; асиміляція; конструктивний, або будівельний, обмін; обмін речовин) зводиться до засвоєння, до використання мікроорганізмами поживних речовин, що надійшли із зовнішнього середовища, для біосинтезу компонентів (речовин) власного тіла. Це досягається частіше відновними ендотермічними реакціями, для перебігу яких потрібна енергія.

Катаболізм (дихання, дисиміляція, біологічне окислення) характеризується розщепленням (окисленням) складних органічних речовин до більш простих продуктів із звільненням укладеної в них енергії, яка використовується мікроорганізмами для синтезу речовин даної клітини. Цей обмін називається також енергетичним.

У більшості випадків один і той же речовина використовується як в асиміляції, так і в дисиміляції. Винятком є вуглеводи, які піддаються розщепленню і не беруть участі в конструктивному обміні.

Метаболізм у мікроорганізмів характеризується інтенсивним споживанням поживних речовин. Так, при сприятливих умовах протягом доби одна клітина бактерій засвоює речовин в 30-40 разів більше величини своєї маси.

В обміні речовин беруть участь різні хімічні речовини. Залежно від цього розрізняють білковий, вуглеводний, ліпідний і водно-сольовий обмін.

Білковий обмін. Розпад білка спочатку відбувається до пептоноз під дією ферментів екзопротеаз. Надалі пептони під впливом ендопротеаз розщеплюються до амінокислот, які надходять в клітину. Тут амінокислоти можуть піддаватися дезамінуванню і декарбоксилюванню.

В результаті дезамінування утворюються аміак, кетокислот або оксикислоти, спирт та інші речовини.

Декарбоксиліровання амінокислот відбувається при розвитку гнильних бактерій з утворенням токсичних продуктів «трупних отрут». При декарбоксилюванні гістидину утворюється гістамін, орнитина - путресцин, лізину - кадаверин, тирозину - тирамін. Деякі мікроби виробляють фермент тріптофаназу, під впливом якої амінокислота триптофан розпадається з утворенням індолу. Наявність індолообразованія використовують при ідентифікації мікроорганізмів.

Поряд з реакціями розщеплення білків відбуваються і процеси їх синтезу. Для побудови білків бактерії використовують амінокислоти. Бактеріальні клітини задовольняють свої потреби в амінокислотах двома шляхами: одні мікроорганізми отримують амінокислоти при розщепленні білка, інші синтезують їх з простих сполук азоту. Важливою властивістю мікробів є здатність синтезувати незамінні амінокислоти (метіонін, триптофан, лізин). Синтез білка відбувається в рибосомах клітини.

Білковий обмін знаходиться в тісному зв'язку з вуглеводним обміном. Для побудови білкових з'єднань використовується піровиноградна кислота, а дикарбонові кислоти є активними посередниками в біосинтезі амінокислот.

Вуглеводний обмін. Вуглеводи розщеплюються під дією ферментів з утворенням глюкози і мальтози. Під впливом ферментів мальтази, сахарази, лактази дисахариди, що надійшли всередину клітини бактерії, піддаються гідролізу і розпаду на моносахариди, які потім ферментують з розривом ланцюга молекул вуглеводу і звільненням значної кількості енергії.

Розщеплення мікробами вуглеводів супроводжується утворенням органічних кислот, які можуть розпадатися до кінцевих продуктів.

Синтез вуглеводів у мікроорганізмів відбувається фото- і хе-мосінтетічні. При фотосинтезі зелені і пурпурні бактерії, що містять пігменти типу хлорофілу, синтезують глюкозу з діоксиду вуглецю, що міститься в повітрі. При цьому для перебігу ндотермічних реакцій синтезу необхідна енергія світла.

Процес фотосинтезу у бактерій (прокаріотів) відрізняється від фотосинтезу у зелених рослин (еукаріоти). У рослин при фотолізі донором водню служить вода, в результаті чого виділяється молекулярний кисень.

У прокаріот, за винятком синьо-зелених водоростей, донорами водню є H₂S, Н₂, інші мінеральні та органічні сполуки, тому в результаті реакції фотосинтезу кисень не утворюється. Головним пігментом фотосинтезу у бактерій є бактеріохлорофіл, у зелених рослин - хлорофіл, що знаходиться в хлоропластах, кожен з яких еквівалентний прокариотической клітці. У бактерій хлоропласта відсутні.

Хемосинтез здійснюють мікроорганізми, які синтезують вуглеводи з глюкози, яка попередньо утворюється в результаті цукролітичних реакцій, оозщеплювання складних Сахаров. Для хемосинтезу використовується хімічна енергія, що звільняється при розпаді аденозин тріфосфорной кислоти (АТФ), енергія хімічних реакцій.

Ліпідний обмін включає процеси гідролізу ліпідів, всмоктування жирних кислот і моногліцеридів, біосинтезу специфічних ліпідів, їх розщеплення і виділення кінцевих продуктів розпаду.

Більшість видів бактерій засвоюють ліпіди у вигляді гліцерину, який служить джерелом енергії. Мікроорганізми використовують його також для синтезу ліпідів, які у вигляді включень є резервними поживними речовинами (поживним матеріалом).

Основні процеси ліпідного обміну здійснюються за допомогою ліпази та інших ліполітичних ферментів, міцно пов'язаних з клітинною цитоплазмою.

Водно-сольовий обмін включає надходження і виділення води і мінеральних солей, а також перетворення, що відбуваються з ними.

Тільки невелика кількість елементів Періодичної системи Д.І. Менделєєва потрібно мікроорганізмам у відносно високих концентраціях - це десять головних біологічних елементів (макроелементи): С, О, Н, N, S, Р, К, Mg, Са, Fe. Основними компонентами органічних сполук є перші чотири елементи - органогени.

Сірка потрібна для синтезу амінокислот цистеїну і метіоніну і деяких ферментів. Фосфор входить до складу нуклеїнових кислот, фосфоліпідів, тейхоевих кислот, багатьох нуклеотидів. Решта чотири елементи - це іони металів, що використовуються в якості кофакторів ферментів, а також компонентів металлокомплексов.

Крім перерахованих головних елементів мікроорганізмам потрібні ще десять мікроелементів: Zn, Mn, Na, CI, Mo, Se, З, Сі, W, Ni, які беруть участь в синтезі ферментів, активізують їх.

З різних елементів і їх з'єднань мікроорганізми синтезують білки, нуклеопротеїни, глюцідоліпіднопротеідние комплекси, нуклеїнові кислоти, ферменти, вітаміни та ін.

Особливості стерилізації розчинів для парентерального введення. Способи контролю за якістю стерилізації. Хімічні та мікробіологічні тести.

Контроль якості стерилізації проводиться бактеріологічними. термічними і технічними методами.

Бактеріологічний метод самий достовірний, але він має лише ретроспективне значення через довготривалості дослідження. Невеликі шматочки матеріалу забирають в пробірки і вкладають в бікс. які стерилізують. після стерилізації направляють пробірки в бак. лабораторію для дослідження. Якщо через 2 - 3 дні не виявляють росту колоній - то матеріал стерильний.

Технічний метод - це періодична перевірка показників манометрів і термометрів, а також шляхом розміщення максимальних термометрів в різні ділянки стерилізаційних камер, коробок.

Термічний (фізичний) контроль проводиться щоденно. Він грунтується на властивості ряду речовин змінювати свій колір чи плавитись під дією певної температури:

1. Сірка 111 - 120 градусів

2. Резорцин 110 - 119 градусів

3. Бензойна кислота 121 град.

4. Нафтол 120 -122 град.

5. Сечовина 132 град.

6. Фенацетин 134 - 135 град.

7. Тіосечовина 180 град.

8. Барітал 190 - 191 град.

9. Пілокарпіну гідрохлорид 200 град.

Газова стерилізація використовується для стерилізації хірургічних інструментів, виробів з скла, гуми, пластмаси. Вона здійснюється газовою сумішшю ОБ ( суміш етилену оксиду з бромистим метилбромідом ) Медична промисловість випускала з цією метою спеціальні апарати типу АД - 250А. Час стерилізації - 24 години. Причому простерилізовані вироби дозволяється використовувати на практиці лише після певної витримки. Терміни витримки після газової стерилізації для виробів металу та скла - 24 години, для гуми і полімерів - 5 діб, для виробів, які використовуються для лікування дітей - 21 добу. В цьому полягають головні недоліки газової стерилізації. Перевагою ж її є те, що суміш ОБ проникає через поліетиленову упаковку і матеріал залишається стерильним довгий час.

Радіаційний метод - це холодний метод стерилізації, який здійснюється іонізуючим випромінюванням. ( гамма - промені, прискорені електрони ). Його застосовують на підприємствах для стерилізації одноразових виробів (СНГ системи для в/в інфузій). Для знезараження повітря використовують ультрафіолетові промені.

Світлова стерилізація - це холодний метод стерилізації повітря, який здійснюється випромінюванням коливань ультрафіолетового проміжку. Його застосовують в операційних блоках, хірургічних відділеннях (маніпуляційні, перев'язній, палатах). При стандартній вологості 30 куб.м. опромінюють 30 хв. лампами з потужністю 30 ват. Недолік - неможна застосовувати при високій вологості повітря >90%, оскільки лампи швидко нагріваються і появляється небезпека вибуху.

Хімічна стерилізація здійснюється антисептичними речовинами ( 6% розчин перикису водню, спирт). Але головний недолік хімічних методів стерилізації - необхідність відмивання інструментів від залищків антисептичних речовин під час якого можливе забруднення інструментів.

Патогенність та вірулентність мікроорганізмів. Особливості біології мікробів – паразитів

Інфекційна хвороба виникає тільки при наявності збудника, який володіє патогенністю і вірулентністю зокрема.

Патогенність – видова генетична ознака збудника. Він має можливість викликати при сприятливих умовах специфічний інфекційний процес.

За цією ознакою всі існуючі мікроби поділяють на патогенні, умовно-патогенні і сапрофіти. Фактично всі збудники інфекційних захворювань є патогенними, але щоб викликати захворювання, вони повинні володіти вірулентністю.

Мікроорганізм вважається вірулентним, якщо він при впровадженні в організм тварини, навіть в малих дозах, викликає розвиток інфекційного процесу. Наприклад, ніхто не сумнівається в патогенних властивості збудника сибірки, однак серед культур цього мікроорганізму зустрічаються авірулентние штами, які не здатні викликати захворювання у тварини.

Вірулентність – це ступінь патогенності конкретного мікроорганізму, тобто це індивідуальна ознака. Вірулентність – це величина, яка піддається вимірюванню. За одиницю виміру вірулентності умовно прийняті летальна і інфікуюча дози.

Мінімальна смертельна доза (DLM) – це найменша кількість живих мікробів або їх токсинів, що викликає за певний термін загибель більшості тварин одного виду, взятих в досвід.

Оскільки індивідуальна чутливість тварин до патогенного мікроба (токсину) різна, то була введено поняття безумовно смертельна доза (DCL) – це найменша кількість мікроорганізмів, що викликає загибель 100% заражених тварин.

Найбільш точна одиниця вірулентності середня летальна доза (LD50) – це найменша кількість мікроорганізмів (токсинів), що викликає загибель половини тварин в досвіді. Для встановлення середньої летальної дози збудника беруть до уваги спосіб введення збудника, вік піддослідних тварин, їх масу.

У одного і того ж мікроорганізму вірулентність може значно коливатися в залежності від ряду біологічних, фізичних і хімічних чинників, що впливають на нього. Вірулентність мікроорганізму можна посилити або послабити штучними прийомами.

Ослаблення вірулентності викликає тривале вирощування культур поза організмом на поживних середовищах при максимальній температурі, дія хімічних речовин. Наприклад, антисептиків: карболова кислота; луг; жовч і т. д.

Крім того ослаблення збудника викликає тривале пасажирування (послідовне проведення) через організм певного виду тварини шляхом перенесення збудника від хворої тварини до здорової. Наприклад, пасажирування збудника пики свиней через організм кролика призводить до ослаблення вірулентності збудника.

У деяких випадках можливе посилення вірулентності мікроорганізмів. Наприклад, під дією протеолітичних ферментів відбувається посилення вірулентності Cl. perfringens при природній асоціації зі збудниками гниття (наприклад, сарцин) або при штучному впливі ферментами тваринного походження (наприклад, трипсином). Пов’язаний цей ефект зі здатністю протеаз активізувати протоксін, тобто попередників токсинів, синтезованих Cl. perfringens.

Паразитування, тобто існування за рахунок людського організму, є формою життя багатьох видів живих організмів, які населяють нашу планету. На сьогоднішній день наука налічує понад 300 таких видів: від найпростіших одноклітинних до багатоклітинних.

Паразити - це такі організми, які використовують організми іншого виду (хазяїна) як джерело харчування і середовище існування, завдаючи їм шкоди; при цьому паразит не вбиває свого хазяїна одразу, на відміну від того, як це робить хижак зі своєю жертвою.

Не завжди паразитизм є єдиною формою існування організму, тому його поділяють на факультативний і облігатний.

Факультативний (від лат. facultatis - можливість) характерний для тих організмів, які звичайно вільно живуть у природі, але, випадково потрапляють до організму іншого виду (хазяїна) і ведуть паразитичне існування (деякі круглі черви, хижі п'явки).

Облігатний (від лат. obligatus - обов'язковий) - характерний для тих організмів, що не здатні вільно жити у природі. Для них паразитизм - умова існування.

Від справжніх паразитів слід відрізняти псевдо-паразитів та омеопаразитів.

Псевдопаразити (від грец. ψεύδος - омана, вигадка) - це вільноживучі організми, які в разі випадкового проникнення до іншого організму деякий час там перебувають, іноді викликають кишкові розлади (тирогліфоїдні кліщі - шкідники зерна, сиру; личинки мух). Серед них є:

справжні, що дійсно перебувають в іншому організмі, виводяться з його фекаліями, де їх можна знайти (личинки хатньої мухи);
несправжні (удавані), що можуть випадково потрапити у фекалії, принесені, наприклад, на аналіз (мухи можуть відкласти на них яйця, а з них швидко вилуплюються личинки).

Омеопаразити (від грец. όμοιος - подібний) - це подібні до паразитів утвори (згортки слизу з кишківника), які можуть нагадувати, наприклад, аскариду.

Буває, що паразити випадково потрапляють не до свого звичайного хазяїна, а до іншого, і продовжують в ньому жити; таких паразитів звуть ксенопаразитами (від грец. ξενία - чужий), тобто чужопаразитами. Наприклад, аскариди деяких м'ясоїдних тварин можуть паразитувати й у людини.

Класифікація паразитів:

1. Залежно від кількості ймовірних хазяїнів:

евриксенні (від грец. ωύρύω - широкий) - ті, що мають широке коло хазяїнів (іксодові кліщі, комарі);
моноксенні (від грец. μόνος - один, єдиний) - ті, що паразитують на хазяїні певного виду (кривоголовка, неозброєний ціп'як - у кишківнику людини; головна воша - на тілі людини);
стеноксенні (від грец. στενός - вузький і ξενία) - ті, що мають певний вид хазяїна, але можуть паразитувати й на інших (коростяний кліщ людини й коня); серед них є звичайні - такі, що трапляються у певного хазяїна (собача блоха - у собаки, людська блоха - в людини), і випадкові - ті, що випадково потрапляють до невластивого їм хазяїна; наприклад, при проковтненні блохи, зараженої пистицеркоїдами, людина може стати хазяїном собачого ціп'яка - паразита собак і котів;
гетероксенні (від грец. έτερος - інакший, інший) - ті, що проходять складні цикли розвитку за рахунок декількох хазяїнів. Так, собачий кліщ проходить три стадії розвитку: личинка, німфа, імаго - і на кожній стадії має свого хазяїна.

2. Залежно від терміну паразитування:

тимчасові - такі, що живуть поза організмом хазяїна і нападають на нього лише для живлення кров'ю (кліщі, блохи, комарі, москіти) тривалістю від півхвилини до кількох діб;
постійні - живуть в організмі хазяїна чи на його покривах на всіх стадіях розвитку.

3. Залежно від місця локалізації:

✵ ектопаразити (від грец. έχτας - поза, зовні):

✵ зовнішні - живуть на зовнішніх покривах хазяїна (воші, блохи, комарі);

✵ шкірні - живуть у товщі шкірного покриву, а почасти і на його поверхні (коростяний свербун);

✵ порожнинні - живуть у порожнинах, що сполучаються із зовнішнім середовищем - у зовнішньому слуховому ході, в порожнині носа (личинки вольфартової мухи).

✵ ендопаразити (від грец. ένδον - всередині):

✵ порожнинні - живуть у порожнинах тіла внутрішніх органів (аскарида, гострик);

✵ тканинні - у м'язовій, нервовій тканинах (трихінела);

✵ внутрішньокчітинні (споровики, джгутикові).

Діагностичні препарати і системи для діагностики, специфічної та неспецифічної терапії і корекції неінфекційних хвороб. Моноклональні антитіла.

Діагностичні препарати – для специфічної і неспецифічної діагностики інфекційних та неінфекційних захворювань.

Імунопрофілактика може бути специфічною і неспецифічною.

Специфічна - формується проти конкретного збудника. Поділяється:

1.Активную - створення тимчасового або постійного імунітету шляхом введення вакцин. Повторна імунізація сприяє більш вираженого імунної відповіді по відношенню до збудника.

2.Пасивну - створення імунітету шляхом введення сироваткових препаратів і гамаглобулін.

Імунітет створюваний таким шляхом має тривалість від 1 до 6 тижнів, дія його проявляється негайно. повторна пасивна імунізація не посилює імунної відповіді і часто супроводжується ускладненнями.

Неспецифічна імунопрофілактика активізація імунної системи взагалі.

Моноклональні антитіла - це новітнє досягнення медицини, яке застосовується при лікуванні важких захворювань. Серед них злоякісні новоутворення, аутоімунні, системні, захворювання серцево-судинної системи, деякі інфекції і багато іншого. Крім цього, моноклональні антитіла широко використовуються в діагностиці, наприклад, в імуногістохімії, іммуноферментному аналізі, проточною цитофлуориметрії і ін. Таким чином, дана технологія використовується в багатьох галузях сучасної медицини.

Людство вже давно відкрило для себе дію антитіл - особливих молекул, які виробляються клітинами імунної системи для розпізнавання чужорідних агентів - антигенів і їх знищення. Антитіла володіють специфічністю. Це означає, що вони дізнаються тільки свій антиген, причому не просто антиген, а окремий його фрагмент - детермінантності групу. В одному антигене може бути кілька таких детермінантних груп, і до них будуть утворюватися різні антитіла. Більш того, до однієї детермінанті може утворюватися відразу кілька видів антитіл, які можуть відрізнятися за структурою, ступеня споріднення і міцності зв'язування. Таким чином, при введенні антигену в організм утворюється велика кількість різних видів антитіл, спрямованих виключно на один вид антигену. Це дозволяє забезпечити адекватну імунну захист.

Антитіла утворюються спеціальними антітелообразующіх клітинами. Причому кожен їх вид утворюється окремою групою генетично однорідних клітин - клонів. Чим більше необхідно видів антитіл, тим більше утворюється клонів. Відповідно, антитіла, які виробляються одним клоном клітин називаються моноклональними антитілами.

Раніше для виробництва антитіл застосовувалася імунізація тварин, після якої відбиралася їх плазма і використовувалася для приготування окремих препаратів - імунних сироваток для боротьби з різними токсинами (дифтерія, правець), вірусами, отрутами і ін. Але бувають ситуації, коли потрібно конкретне антитіло, спрямоване на конкретну детерминанту антигену. Тут вже звичайною імунізацією не обійтися. Потрібні більш прицільні технології.

Етапи одержання моноклональних антитіл:

1.Імунізація тварин певним антигеном.

2.Одержання лімфоцитів від імунізованої тварини.

3.Одержання гібридом. Лімфоцити поодинці розміщують у мік-рокамерах спеціальних панелей і додають мієломні клітини. Завдяки дії спеціального "ферменту злиття" або інших речовин, що впливають на клітинні мембрани, утворюються гібридні клітини. При цьому застосовують спеціальне інкубаційне середовище, в якому ні лімфоцит, ні мієломна клітина не виживають, а гібридома розмножується.

4.Відбір гібридом, які продукують потрібні антитіла. Досліджуючи наявність потрібних антитіл у культуральній рідині, відбирають необхідний клон.

5. Вирощування клону в промислових біотехнологічних умовах і одержання комерційних препаратів моноклональних антитіл.

Як правило, діагностичні моноклональні антитіла випускають міченими радіоізотопом або ферментом. Застосовують їх для виявлення антигенів, коли важливо уникнути перехресних реакцій із близькими антигенами. У мікробіології сфера їх застосування — ідентифікація бактеріальних, вірусних та інших антигенів. У неін-фекційній імунології — виявлення поліпептидних та білкових гормонів (наприклад, рання діагностика вагітності на основі' виявлення гормону гонадотропіну в сечі). Важливе значення має застосування моноклональних антитіл для ранньої діагностики злоякісних пухлин на основі виявлення "ракових" антигенів, розроблені спеціальні тест-системи для діагностики раку кишкового тракту, пухлин жіночих статевих органів та ін.

Моноклональні антитіла широко використовуються в лікуванні захворювань, у яких в патогенезі замішаний імунний компонент. З їх допомогою лікують псоріаз, аутоімунні захворювання, ревматоїдний артрит, розсіяний склероз. Великі перспективи ці технології отримали і в онкології в рамках таргетной терапії. При цьому, їх ефект заснований на різних механізмах, які розглянуті нижче.

1.Зміна клітинних сигналів Як приклад зміни клітинних сигналів можна привести рецептори факторів росту. Деякі злоякісні клітини мають на своїй поверхні велику кількість рецепторів до чинників зростання, що активує каскад реакцій, спрямований на посилення розмноження клітини. Чим більше таких рецепторів, тим активніше протікає цей процес. Якщо блокувати рецептор за допомогою моноклонального антитіла, він не зможе зв'язатися з лігандом (фактором росту), і відповідно каскад цих реакцій не буде запущений. Клітина не буде так активно розмножуватися і врешті-решт загине.

2.Комплемент-залежна цитотоксичністі. Цей механізм реалізується в такий спосіб. Антитіло зв'язується з антигеном, що знаходяться на поверхні злоякісної клітини, що призводить до активації багатоетапної системи комплементу (механізму імунної відповіді). Кінцевим етапом цих реакцій є утворення особливого білка З 9, який перфорує клітинну мембрану ракової клітини, що в кінцевому підсумку призводить до її загибелі.

3.Посилення цитотоксического впливу імунних клітин. Моноклональні антитіла можуть стимулювати імунні клітини, наприклад, макрофаги. Вони будуть розпізнавати клітини злоякісних пухлин і «пожирати» їх, тим самим знищуючи їх.

4.Розвиток адаптивного імунітету. Однією з причин, по якій стає можливим утворення і розвиток злоякісної пухлини в організмі, є те, що імунна система людини не розпізнає такі клітини як чужорідні. Моноклональні антитіла дають можливість імунітету «познайомитися» з раком і робить його доступним для зв'язування і подальшого знищення. Таким чином, організм отримує можливість самостійно боротися з пухлиною.

5. Препарати на основі моноклональних антитіл вже два десятиліття входять в протоколи протипухлинного лікування деяких злоякісних новоутворень.

Етапи виділення та ідентифікації вірусів.

При виділенні вірусів з різних інфекційних матеріалів (кров, сеча, слизові відокремлюються, змиви з органів) застосовують культури клітин, що володіють найбільшою чутливістю до передбачуваного вірусу. Для зараження використовують культури в пробірках з добре розвиненим моношаром клітин. Перед зараженням клітин живильне середовище видаляють і в кожну пробірку вносять по 0,1-0,2 мл суспензії досліджуваного матеріалу, попередньо обробленого антибіотиками для знищення бактерій і грибів. Після 30-60 хв контакту вірусу з монослоем клітин видаляють надлишок матеріалу, в культуру вносять підтримуючу середу і проби залишають в термостаті до виявлення ознак розмноження вірусу.

Виділення вірусів на лабораторних тваринах. При неможливості виділити та ідентифікувати вірус стандартними методами in vitro інфекційний матеріал вводять чутливим до збудника тваринам, і після розвитку типового інфекційного процесу проводять повторне зараження чутливих клітинних культур. Найбільш часто використовують мишей, кроликів і мавп; для виділення деяких вірусів (наприклад, вірусів Коксакі) заражають мишенят-шмаркачів. Внаслідок дорожнечі і складності змісту лабораторних тварин, практично повсюдно їх витіснили клітинні культури. Проте тварини моделі активно використовують для вивчення особливостей патогенезу і формування імунних реакцій при вірусних інфекціях.

Таким чином, для виділення чистих культур вірусів в лабораторних умовах в даний час використовуються наступні живі об'єкти (біологічні моделі): 1) культура клітин (тканин, органів); 2) курячі ембріони; 3) лабораторні тварини.

Визначення типу вірусу (його ідентифікація) засновано на нейтралізації біологічної активності вірусу за допомогою типоспецифічних сироваток. Кінцевий результат її може бути встановлений на підставі наступних ознак:

1) нейтралізація цитопатичної дії. в культуральне середовище, що містить досліджуваний вірус, вносять комерційну сироватку (наприклад, до вірусу краснухи при підозрі на неї), інкубують і заражають другу культуру; через 1-2 дня в неї вносять відомий Цитопатогенні вірус. При наявності цитопатогенного ефекту роблять висновок про те, що перша культура була заражена вірусом, що відповідав антитіл застосованої сироватки;

2) нейтралізація реакції гемадсорбції;

3) зміна прояви кольоровий проби;

4) затримка (гальмування) реакції гемаглютинації. змішують культуральну середу, со-тримає збудник, з відомою комерційної антисироватки і вносять в культуру клітин. Після інкубації визначають здатність культури до гемаглютинації і при її відсутності роблять висновок про невідповідність вірусу антисироватки.

5) нейтралізація в дослідах на тваринах.

Таким чином РН (реакція нейтралізації) заснована на придушенні відповідної реакції, феномена, розвитку інфекційного процесу після внесення в культуру або введення в організм тварини суміші вірусу зі спеці-фічнимі AT, що містяться в діагностичної сироватці.

Вірус кору. Вірус паротиту. Особливості епідеміології та патогенезу, вірусологічна діагностика, препарати для специфічної терапії та профілактики.

Кір - гостра інфекційна хвороба, що характеризується лихоманкою, катаральним запаленням слизових оболонок верхніх дихальних шляхів і очей, а також плямисто-папульозний висипом на шкірі.

Таксономія. РНК-вірус. Сімейства Paramyxoviridae. Рід Morbillivirus.

Структура і антигенні властивості. Віріон оточений оболонкою з глікопротеїновими шипами. Під оболонкою знаходиться спіральний нуклеокапсид. Геном вірусу - однониткових, нефрагментовані мінус РНК. Є такі основні білки: NP - нуклеокапсідний; М - матриксний, а також поверхневі глікозильовані білки липопротеиновой оболонки - гемаглютинін (Н) і білок злиття (F), гемолізини. Вірус має гемагглютинирующей і гемолітичною активністю. Нейрамінідазу відсутня. Має спільні антигени з вірусом чуми собак і великої рогатої худоби.

Культивування. Культивують на первинно-трипсінізірована культурах клітин нирок мавп і людини, перевіваемих культурах клітин HeLa, Vero. Збудник розмножується з утворенням гігантських багатоядерних клітин - симпластов; з'являються цитоплазматические і внутрішньоядерні включення. Білок F викликає злиття клітин.

Резистентність. У навколишньому середовищі нестійкий, при кімнатній температурі інактивується через 3-4 ч. Швидко гине від сонячного світла, УФ-променів. Чутливий до детергентів, дезінфектантів.

Сприйнятливість тварин. Кір відтворюється тільки на мавпах, інші тварини малосприйнятливі.

Епідеміологія. Кір - антропонозная інфекція, поширена повсюдно. Сприйнятливість людини до вірусу кору надзвичайно висока. Хворіють люди різного віку, але частіше діти 4-5 років.

Джерело інфекції - хвора людина.

Основний шлях інфікування - повітряно-крапельний, рідше - контактний. Найбільша заражаемость відбувається в продромальному періоді і в 1-й день появи висипу. Через 5 днів після появи висипки хворий не заразний.

Патогенез. Збудник проникає через слизові оболонки верхніх дихальних шляхів і очей, звідки потрапляє в підслизову оболонку, лімфатичні вузли. Після репродукції він надходить в кров (вірусемія) і вражає ендотелій кровоносних капілярів, обуслав-ливая тим самим появу висипу. Розвиваються набряк і некротичні зміни тканин.

Клініка. Інкубаційний період 8-15 днів. Спочатку відзначаються гострі респіраторні прояви (риніт, фарингіт, кон'юнктивіт, світлобоязнь, температура тіла 39С). Потім, на 3-4-й день, на слизових оболонках і шкірі з'являється плямисто-папульозний висип, що розповсюджується зверху вниз: спочатку на обличчі, потім на тулубі і кінцівках. За добу до появи висипу на слизовій оболонці щік з'являються дрібні плями, оточені червоним ореолом. Захворювання триває 7-9 днів, висип зникає, не залишаючи слідів.

Збудник викликає алергію, пригнічує активність Т-лімфоцитів і імунні реакції, що сприяє появі ускладнень у вигляді пневмоній, запалення середнього вуха і ін. Рідко розвиваються енцефаліт і ПСПЕ.

Імунітет. Після перенесеного кору розвивається гуморальний стійкий довічний імунітет. Повторні захворювання рідкісні. Пасивний імунітет, який передається плоду через плаценту у вигляді IgG, захищає новонародженого протягом 6 місяців після народження.

Лабораторна діагностика. Досліджують змив з носоглотки, зіскрібки з елементів висипу, кров, сечу. Вірус кору можна виявити в патологічному матеріалі та в заражених культурах клітин за допомогою РІФ, РГГА і реакції нейтралізації. Характерно наявність багатоядерних клітин і антигенів збудника в них. Для серологічної діагностики застосовують РСК, РГГА і реакцію нейтралізації.

Лікування. Симптоматичне.

Специфічна профілактика. Активну специфічну профілактику кору прово¬дят підшкірним введенням дітям першого року життя або живою коровою вакцини з аттенуірованних штамів, або асоційованої вакцини (проти кору, паротиту, краснухи). В осередках кору ослабленим дітям вводять нормальний імуноглобулін людини. Препарат ефективний при введенні не пізніше 7-го дня інкубаційного періоду.

Епідемічний паротит - гостре інфекційне вірусне захворювання, яке дає загальну інтоксикацію організму і вражає слинні залози, також інші залізисті органи і нервову систему людини.

Збудник інфекції - вірус паротиту, що проникає в організм через верхні дихальні шляхи. Джерелом епідемічного паротиту може стати будь хвора людина, яка стає заразним протягом дев'яти днів після початку хвороби. При епідемічному паротиті інфекція передається повітряно-крапельним шляхом. Самий битий контингент - діти дошкільного та шкільного віку.

Вірус епідемічного паротиту. Віріони мають вигляд частинок неправильної куполоподібної форми діаметром 150-170 нм., які містять однониткову РНК. Збудник паротиту добре культивується в курячих ембріонах, а також у культурах клітин ниркового епітелію ембріона людини, клітинах HeLA. Віруси мають виражені гемаглютинуючі, нейрамінідазні й гемолітичні властивості. Вони нестійкий до дії фізичних і хімічних факторів, швидко інактивуються ефіром, трипсином, формаліном, ультрафіолетовими променями. Резистентні до висушування, не втрачають інф. властивостей при 4 °С протягом 2 міс., при кімнатній t - 4 днів. При 55 °С гинуть ч/з 20 хв.

Вірус викликає епідемічний паротит (свинку) - гостре високозаразне захв., яке супроводжується збільш. навколовушних слинних залоз, можливе ураження інших органів. Хворіють переважно діти. Джерело інф - хвора людина й вірусоносії, шлях передачі - повітряно-краплинний. Інкубаційний період коливається від 11 до 23 днів. Хв. починається із нездужання, підвищ. t і швидкого збільш. привушних слинних залоз. Після перенесеної хв. розвивається стійкий, напружений, часто довічний імунітет. При народженні діти отримують противірусні антитіла від матері, тому протягом шести місяців вони нечутливі до паротитного вірусу. При проведенні лабор. діагностики виділення вірусу із слини, крові, цереброспінальної рідини із-за трудомісткості методу не використовують. Частіше застосовують серологічні реакції, особливо РЗК, РГГА для визначення приросту титру антитіл. Профілактику проводять живою паротитною вакциною, яку часто вводять разом із вакцинами проти кору й краснухи. З лікувальною метою застосовують Ig.
1. У хворої на слизовій оболонці піхви лікар виявив твердий шанкр і призначив мікроскопічне дослідження матеріалу з шанкру. Бактеріолог дослідив матеріал з шанкру і виявив спірохети. До якої групи бактерій за особливостями морфології необхідно віднести ці мікроорганізми?

Звивисті бактерії
Клостридії
Коки
Бактерії
Бацили

2.Вкажіть на фізичні бар’єри як чинники неспецифічної резистентності: (декілька відповідей)

Епітелій респіраторного тракту
Шкірні покриви
Слизові оболонки травної і сечостатевої систем
Нормальна мікрофлора травного тракту
Лізоцим
Фагоцити
Комплемент

3. 40-річна жінка звернулась до лікаря зі скаргами на свербіння, почервоніння, відчуття пекучості шкіри, набряк на щоках. За годину до появи цих симптомів пацієнтка користувалась косметичним кремом. Який вид алергічної реакції І типу, за класифікацією Джелла - Кумбса, розвинувся у пацієнтки?

Набряк Квінке.
Бронхіальна астма.
Анафілактичний шок.
Кропивниця.
Поліноз.

4. У 30-річної жінки після тривалого застосування губної помади з флуоресціюючою речовиною на облямівці губ з'явилась обмежена еритема, незначне лущення, а пізніше - поперечні дрібні борозни та тріщини. Під час мікроскопічного дослідження сполучної тканини лікар виявив сенсибілізовані лімфоцити та макрофаги, спостерігав явище цитолізу. Якому типу алергічної гіперчутливості характерні наведені симптоми?

ІУ типу (клітинно-опосередкованому).
II типу (цитотоксичному).
Гранулематозу.
III типу (імунокомплексному).
І типу (анафілактичному типу).

5. У наш час для експрес-діагностики інфекційних захворювань до широковживаних реакцій належить реакція імунофлуоресценції. Які властивості бактерій бактеріолог вивчає для ідентифікації бактерій за допомогою цієї реакції? (декілька відповідей)

Культуральні
Антигенні властивості
Імуногенні властивості
Особливості морфології
Ферментативні властивості

6. Виберіть компоненти, які характеризують структуру ВІЛ: (декілька відповідей)

Ліпопротеїнова оболонка оточує нуклеокапсид еліпсовидної форми, всередині якого знаходиться віріонна нуклеїнова кислота
РНК – залежна ДНК – полімераза
РНК – залежна РНК – полімераза
Ліпопротеїнова оболонка оточує нуклеокапсид у формі ікосаедра, всередині якого знаходиться геномна РНК
2 молекули однониткової +РНК
Зовнішній капсид оточує внутрішній капсид, який складається із гексагональних субодиниць

7. Які переваги перещеплюваної клітинної лінії перед первинно-трипсинізованими культурами? (декілька відповідей)

Зберігають диплоїдний набір хромосом
Низька швидкість росту
Можливість досягнення більш високої щільності моношару клітин та більший вихід біомаси клітин на одиницю площі
Висока швидкість росту
Здатність до росту в суспензії
Менша залежність від сироватки тварин

8. У дитячому дошкільному закладі напередодні Новорічних свят епідеміолог зареєстрував спалах кишкової інфекції. При бактеріологічному дослідженні випорожнень хворих патогенних бактерій бактеріолог не виділив. При електронній мікроскопії досліджуваного матеріалу вірусолог виявив утворення округлої форми з чітким обідком і товстою втулкою, які нагадували колесо. Назвіть найбільш імовірного збудника захворювання.

Ротавірус.
Аденовірус.
Вірус Коксакі.
Escherichia coli.
Proteus vulgaris.

9. У населеному пункті епідеміолог зареєстрував спалах гепатиту, який пов’язують з водним шляхом передачі інфекції. Який вірус міг спричинити спалах захворювання на гепатит?

Вірус гепатиту А
Вірус гепатиту D
Вірус гепатиту B
Вірус гепатиту C

E. Вірус гепатиту G
10. При ранній діагностиці використовують реакцію гальмування гемаглютинації. Які компоненти необхідні для постановки РГГА з метою ідентифікації віруса? (декілька відповідей)

Культуру клітин
Електроліт
Вірусмістний матеріал
Комплемент
Сироватку хворого
Типоспецифічні сироватки
Курячі еритроцити

Ситуаційні задачі

1. Дівчинка перехворіла на краснуху п’ять років тому. Нещодавно в класі виник спалах краснухи, але дана дівчинка не захворіла. Який вид імунітету лежить в основі захисту старшої сестри? Опишіть даний механізм імунної відповіді.

Після перенесеної краснухи імунітет до неї довічний. ... Випадки повторного зараження краснухою після захворювання, перенесеного в дитинстві, дуже рідкісні, як і після вакцинації.

2. Який результат лабораторного дослідження може підтвердити попередній діагноз “парагрипозна інфекція”, якщо культуру клітин інфікували носоглотковим змивом?

Опишіть дане дослідження.

Виявлення гемадсорбуючого агента при інфікуванні культури клітин носоглотковим змивом.

Яку реакцію доцільно застосувати вірусологу для виявлення антитіл у сироватці людей, щоб можна було спрогнозувати підсеротип вірусу, який можливо в цьому сезоні спричинить епідемію? Опишіть необхідні діагностичні препарати та постановку даної реакції.

Серологічні реакції – це реакції між антигенами та антитілами, які протікають у 2 фази (специфічна та неспецифічна). Специфічна фаза полягає у створенні імунного комплексу, а неспецифічна – поява видимих змін, які свідчать про наявність комплексу антиген-антитіло.
4. Бактеріологічна лабораторія отримала штами збудника дифтерії. Яку реакцію застосує бактеріолог для визначення у бактерії токсигенності?

Опишіть необхідний діагностичний препарат та постановку даної реакції.

Реакцію преципітації у гелі (тест імунодифузії Ілека).

Преципітація – це також реакція осадження антигенів під впливом антитіл імунної сироватки, але на відміну від аглютинації у даному випадку характерний дрібнодисперсний осад – преципітат – утворюють не корпускулярні, а розчинні антигени.В реакції преципітації антигени – це преципітиногени, а антитіла –преципітини. Реакція преципітації принципово мало відрізняється від аглютинації, вона теж проходить у дві фази у присутності електроліта (розчина солей).

Реакції преципітації в гелі проводяться на щільних середовищах – на 1% агарі чи агарозі у чашках Петрі або на скляних пластинках. Вперше цей метод запропонував Дж. Оудін ще у 1946 р., встановивши, що антитіла сироваток можуть здійснювати дифузію в гелі та зв’язуватись прямо в ньому з антигенами. Іншими вченими були запропоновані модифікації методу преципітації в гелі. Деякі з них ми розглянемо нижче.

5. У вірусологічну лабораторію мають доставити секційний проби для дослідження з попереднім діагнозом «Геморагічна гарячка з нирковим синдромом».

Що саме служить матеріалом для дослідження? Яким чином лаборант зможе провести індикацію та ідентифікацію віруса?
Диференційний діагноз проводять з іншими геморагічними лихоманками, гломерулонефритом, лептоспірозом, висипним тифом тощо. При Kримсько-Kонголезькій та Oмській геморагічних гарячках відсутні виражені ознаки ураження нирок. Для гломерулонефриту характерні набряки, підвищення артеріального тиску, тривала протеїнурія, відсутність зв’язку захворювання з перебуванням у природному осередку геморагічної лихоманки.

Значні труднощі може представляти диференційний діагноз з лептоспірозом. У цих випадках вирішальне значення мають виявлення лептоспір у крові і наростання титру антитіл у реакції мікроаглютинації і лізису лептоспір (РМАЛЛ) до них. Висипний тиф відрізняється відсутністю ниркового синдрому, переважною локалізацією висипу на шкірі грудей і живота. Для нього не характерні інші ознаки геморагічного синдрому – блювота кров’ю, гематурія тощо. При обстеженні хворого необхідно звертати увагу на послідовну зміну періодів хвороби. У диференційній діагностиці можуть надати допомогу відомості про прямий чи непрямий контакт хворого з гризунами.

Лабораторна діагностика

Крім загальних клінічних та біохімічних аналізів, показники яких розглянуто вище, застосовують непряму імунофлюоресценцію (РНІФ) з дослідженням сироватки крові, взятої в максимально ранній період захворювання і повторно – через 5–7 днів. Підтвердженням діагнозу є наростання титру антитіл не менше ніж у 4 рази. В крові антитіла зберігаються протягом багатьох років.
скачати