Вивчення психотропної активності селеніту натрію і селеніту цинку в умовах тотальної ішемії мозку
Введення
При судинної патології мозку в клініці відзначається ряд розладів його діяльності: порушення поведінки, пам'яті (в тому числі, амнезія) емоційного статусу, тривожні розлади. Порушення в онтогенезі нервово-психічних процесів, перш за все когнітивних, можуть проявлятися не відразу, а через тривалий період після патогенетичного впливу. Однак при наданні допомоги пацієнтам практично всі системи лікування спрямовані на ліквідацію вже розвилася патології, хоча часто церебральної катастрофи передує тривалий період оборотних порушень, коли ще можливо превентивний вплив. Формування 50% від остаточного обсягу інфаркту відбувається протягом перших 90 хвилин з моменту розвитку інсульту, 80% - протягом 360 хвилин, у зв'язку з чим перші 3-6 годин отримали назву «терапевтичного вікна», всередині якого лікувальні заходи можуть бути найбільш ефективними . Час «доформування» інфарктних змін після НМК в кожному випадку індивідуально і становить від 3 до 7 діб [1].
Згідно з даними літератури оклюзія артерій мозку супроводжується значною варіабельністю ішемічних ушкоджень і ступенем неврологічного дефіциту. Відомо, що поздовжні гравітаційні перевантаження при краніокаудальном векторі прискорення викликають порушення кровопостачання головного мозку. Ступінь прояву цереброваскулярних порушень залежить від величини і тривалості перевантаження, а також від градієнту її наростання і спаду, що дозволяє їх дозувати. Поряд із змінами показників мозкової гемодинаміки у тварин, які зазнали впливу гіпергравітації, відзначаються зміни неврологічного статусу, поведінкової активності та рівня емоційної тривожності.
Відомо, що антиоксиданти мають ноотропні властивості. Враховуючи виражену антигипоксическую активність селеніту натрію і селеніту цинку становило інтерес вивчити їх вплив на здатність до навчання і процеси пам'яті, на рухову, орієнтовно-дослідницьку, емоційну активність і координацію рухів у тварин, які зазнали тотальної ішемії мозку.
1. Вивчення впливу селеніту натрію і селеніту цинку на психоневрологічний статус білих щурів, які зазнали впливу гравітаційних перевантажень (профілактичне введення)
Поздовжні гравітаційні перевантаження створювалися центрифугою. В експерименті використовувалися білі щури масою 220-250г, які вижили після перевантажень. Тварини були розділені на три досліджувані групи. Контрольну групу склали 7 щурів, які отримували ізотонічний розчин, другу групу - щури, яким профілактично до перевантажень вводили селеніт натрію в дозі 100 мкг / кг (8 тварин). Третій групі тварин (11 щурів) за 10-15 хвилин до ішемії вводили селеніт цинку в дозі 100 мкг / кг. Надалі в кожній групі тварин проводилася оцінка психоневрологічного статусу.
Оцінку впливу селеніту натрію і селеніту цинку на рухову, орієнтовно-дослідницьку та емоційну активність тварин проводили в тесті «відкрите поле». Установка являє собою коло діаметром 80 см, з бортиком 20 см, поділений на 8 радіальних секторів і одним в центрі. Тестоване тварина поміщали в центральний сектор, спиною до експериментатору. Протягом 3 хвилин спостереження реєстрували число пересічених секторів (рухова активність), вставання на задні лапи і число пересічених центральних секторів (орієнтовно-дослідницька активність), кількість стереотипних рухів (грумінг), емоційну активність (дефекація, урінаціі).
Дослідження проводили на другий, четвертий і сьомий день після перенесених перевантажень. Це дозволило стежити за динамікою змін психоневрологічного статусу ішемізованих тварин.
Результати проведених досліджень показали, що в постішеміческом періоді в контрольних дослідах зазначалося зниження рухової активності, про що свідчить зменшення числа пересічених секторів, зниження пізнавальної активності (зменшення числа вертикальних стійок) щурів та їх емоційного стану (зменшення актів груминга і число дефекацій). Ці порушення найбільш яскраво виявлялися протягом перших днів після ішемії, а в наступні добу кілька слабшали. Селеніт натрію і селеніт цинку при їх попередньому до ішемії введення підвищували рухову активність щурів, які перенесли ішемію мозку. Більш виражений ефект надавав селеніт цинку, під впливом якого значно збільшувалося число пересічених тваринами секторів. Профілактичне введення селеніту натрію зменшувало у щурів число вертикальних стійок, стереотипних рухів і не змінювало число дефекацій в порівнянні з контролем, що свідчить про деяке зниження дослідної та емоційної активності. Селеніт цинку підвищував орієнтовно-дослідницьку активність (збільшував число стійок) і знижував рівень емоційного стану (зменшував акти груминга і дефекацій) щурів в постішеміческом періоді.
Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблицях 28 - 30.
Введення
При судинної патології мозку в клініці відзначається ряд розладів його діяльності: порушення поведінки, пам'яті (в тому числі, амнезія) емоційного статусу, тривожні розлади. Порушення в онтогенезі нервово-психічних процесів, перш за все когнітивних, можуть проявлятися не відразу, а через тривалий період після патогенетичного впливу. Однак при наданні допомоги пацієнтам практично всі системи лікування спрямовані на ліквідацію вже розвилася патології, хоча часто церебральної катастрофи передує тривалий період оборотних порушень, коли ще можливо превентивний вплив. Формування 50% від остаточного обсягу інфаркту відбувається протягом перших 90 хвилин з моменту розвитку інсульту, 80% - протягом 360 хвилин, у зв'язку з чим перші 3-6 годин отримали назву «терапевтичного вікна», всередині якого лікувальні заходи можуть бути найбільш ефективними . Час «доформування» інфарктних змін після НМК в кожному випадку індивідуально і становить від 3 до 7 діб [1].
Згідно з даними літератури оклюзія артерій мозку супроводжується значною варіабельністю ішемічних ушкоджень і ступенем неврологічного дефіциту. Відомо, що поздовжні гравітаційні перевантаження при краніокаудальном векторі прискорення викликають порушення кровопостачання головного мозку. Ступінь прояву цереброваскулярних порушень залежить від величини і тривалості перевантаження, а також від градієнту її наростання і спаду, що дозволяє їх дозувати. Поряд із змінами показників мозкової гемодинаміки у тварин, які зазнали впливу гіпергравітації, відзначаються зміни неврологічного статусу, поведінкової активності та рівня емоційної тривожності.
Відомо, що антиоксиданти мають ноотропні властивості. Враховуючи виражену антигипоксическую активність селеніту натрію і селеніту цинку становило інтерес вивчити їх вплив на здатність до навчання і процеси пам'яті, на рухову, орієнтовно-дослідницьку, емоційну активність і координацію рухів у тварин, які зазнали тотальної ішемії мозку.
1. Вивчення впливу селеніту натрію і селеніту цинку на психоневрологічний статус білих щурів, які зазнали впливу гравітаційних перевантажень (профілактичне введення)
Поздовжні гравітаційні перевантаження створювалися центрифугою. В експерименті використовувалися білі щури масою 220-250г, які вижили після перевантажень. Тварини були розділені на три досліджувані групи. Контрольну групу склали 7 щурів, які отримували ізотонічний розчин, другу групу - щури, яким профілактично до перевантажень вводили селеніт натрію в дозі 100 мкг / кг (8 тварин). Третій групі тварин (11 щурів) за 10-15 хвилин до ішемії вводили селеніт цинку в дозі 100 мкг / кг. Надалі в кожній групі тварин проводилася оцінка психоневрологічного статусу.
Оцінку впливу селеніту натрію і селеніту цинку на рухову, орієнтовно-дослідницьку та емоційну активність тварин проводили в тесті «відкрите поле». Установка являє собою коло діаметром 80 см, з бортиком 20 см, поділений на 8 радіальних секторів і одним в центрі. Тестоване тварина поміщали в центральний сектор, спиною до експериментатору. Протягом 3 хвилин спостереження реєстрували число пересічених секторів (рухова активність), вставання на задні лапи і число пересічених центральних секторів (орієнтовно-дослідницька активність), кількість стереотипних рухів (грумінг), емоційну активність (дефекація, урінаціі).
Дослідження проводили на другий, четвертий і сьомий день після перенесених перевантажень. Це дозволило стежити за динамікою змін психоневрологічного статусу ішемізованих тварин.
Результати проведених досліджень показали, що в постішеміческом періоді в контрольних дослідах зазначалося зниження рухової активності, про що свідчить зменшення числа пересічених секторів, зниження пізнавальної активності (зменшення числа вертикальних стійок) щурів та їх емоційного стану (зменшення актів груминга і число дефекацій). Ці порушення найбільш яскраво виявлялися протягом перших днів після ішемії, а в наступні добу кілька слабшали. Селеніт натрію і селеніт цинку при їх попередньому до ішемії введення підвищували рухову активність щурів, які перенесли ішемію мозку. Більш виражений ефект надавав селеніт цинку, під впливом якого значно збільшувалося число пересічених тваринами секторів. Профілактичне введення селеніту натрію зменшувало у щурів число вертикальних стійок, стереотипних рухів і не змінювало число дефекацій в порівнянні з контролем, що свідчить про деяке зниження дослідної та емоційної активності. Селеніт цинку підвищував орієнтовно-дослідницьку активність (збільшував число стійок) і знижував рівень емоційного стану (зменшував акти груминга і дефекацій) щурів в постішеміческом періоді.
Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблицях 28 - 30.
Таблиця 28.
Показники психоневрологічного статусу контрольної групи тварин у постішеміческом періоді
Таблиця 29
Показники психоневрологічного статусу у тварин в постішеміческом періоді попереднім введенням селеніту натрію (100 мкг / кг)
Примітка - достовірно щодо контролю, * р ≤ 0,05
Таблиця 30.
Показники психоневрологічного статусу у тварин в постішеміческом періоді з попереднім введенням селеніту цинку (100 мкг / кг)
Примітка - достовірно щодо контролю, * р ≤ 0,05
Показники психоневрологічного статусу контрольної групи тварин у постішеміческом періоді
| Час експерименту (Добу) | Досліджувані речовини | Кількість пройдених секторів | Кількість Стійкий | Дефекація | Число урінаціі | Грумінг | Кількість пройдених центральних секторів |
| 2 день | фіз. розчин | 12,0 ± 2,6 | 7,9 ± 2,7 | 2,4 ± 1,5 | 0,9 ± 0,7 | 2,6 ± 1,1 | 0,0 ± 0,0 |
| 4 день | фіз. розчин | 10,6 ± 3,6 | 4,7 ± 2,5 | 2,9 ± 2,1 | 0,7 ± 0,6 | 3,4 ± 0,7 | 0,0 ± 0,0 |
| 7 день | фіз. розчин | 13,0 ± 2,6 | 7,0 ± 7,0 | 1,9 ± 1,3 | 0,3 ± 0,5 | 2,3 ± 0,7 | 0,2 ± 0,2 |
Показники психоневрологічного статусу у тварин в постішеміческом періоді попереднім введенням селеніту натрію (100 мкг / кг)
| Час експерименту (Добу) | Досліджувані речовини | Кількість пройдених секторів | Кількість стійок | Дефекація | Число урінаціі | Грумінг | Кількість пройдених центральних секторів |
| 2 день | Селеніт натрію | 10,8 ± 1,9 | 4,1 ± 1,0 * | 2,3 ± 1,3 | 0,3 ± 0,6 | 1,0 ± 1,0 | 0,1 ± 0,3 |
| 4 день | Селеніт натрію | 12,4 ± 3,3 | 5,4 ± 2,2 | 3,3 ± 2,2 | 1,3 ± 0,3 | 1,3 ± 0,8 * | 0,1 ± 0,3 |
| 7 день | Селеніт натрію | 14,4 ± 2,0 | 6,4 ± 1,2 | 1,3 ± 1,0 | 0,1 ± 0,3 | 1,6 ± 0,8 | 0,3 ± 0,4 |
Таблиця 30.
Показники психоневрологічного статусу у тварин в постішеміческом періоді з попереднім введенням селеніту цинку (100 мкг / кг)
| Час експерименту (Добу) | Досліджувані речовини | Кількість пройдених секторів | Кількість стійок | Дефекація | Число урінаціі | Грумінг | Кількість пройдених центральних секторів |
| 2 день | Селеніт цинку | 15,4 ± 3,9 | 8,0 ± 3,1 | 1,6 ± 1,1 | 0,3 ± 0,4 | 0,5 ± 0,6 * | 0,3 ± 0,4 |
| 4 день | Селеніт цинку | 14,2 ± 2,2 | 11,3 ± 2,8 * | 2,8 ± 2,3 | 0,5 ± 0,6 | 1,0 ± 0,7 * | 0,3 ± 0,4 |
| 7 день | Селеніт цинку | 17,3 ± 2,4 * | 8,7 ± 2,3 | 1,5 ± 1,2 | 0,2 ± 0,3 | 0,9 ± 0,8 * | 0,4 ± 0,5 |
Таким чином, отримані експериментальні дані свідчать, про те, що одноразове введення селеніту натрію і селеніту цинку до ішемії зробило позитивний вплив на організм тварин у постішеміческом періоді. У дослідах з попереднім введенням досліджуваних речовин зменшився рівень емоційної тривожності, збільшилася рухова активність, а на тлі селеніту цинку підвищувалася і пізнавальна активність тварин порівняно з контрольною групою.
Для вивчення впливу досліджуваних сполук на різні фази пам'яті - навчання білих щурів проводили через 24 години після ішемії в методиці умовного рефлексу пасивного уникнення в модифікації Буреш, Бурешова. У кожній групі тварин проводили тест на відтворення УРПІ. При приміщенні щурів в експериментальну установку реєстрували латентний період заходу (ЛПЗ) пацюки в темну камеру і час перебування (ВП) у цій камері протягом 3 хвилин. Для вивчення ЛПЗ та ВП в темному відсіку в динаміці - дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після навчання тварин.
Оскільки навчання тварин проводилося після ішемії, а введення досліджуваних сполук проводили до ішемії - це дозволило судити про ступінь неврологічних порушень ішемізованих тварин. У ході експериментів було встановлено, що в контрольній групі тварин зазначалося погіршення процесів навчання і процесів відтворення пам'ятного сліду. Ці ефекти найбільш яскраво виявлялися в перші дні спостереження і кілька слабшали дня сьомого спостереження. Селеніт натрію і селеніт цинку значно збільшували ЛПЗ та ВП. Проте виразність ефекту селенитов була різною. Найбільш активним виявився селеніт цинку. Вивчаються з'єднання у інтактних тварин сприяли збереженню досвіду УРПІ. Ці дані дозволяють зробити висновок, що порушення пам'яті щурів, мабуть, пов'язано з погіршенням процесів фіксації навчання або консолідації пам'яті (перехід короткочасної пам'яті в довготривалу). Отримані експериментальні дані статистично оброблені і представлені в таблицях 31 - 34.
Таблиця 31.
Оцінка ЛПЗ у білих щурів отримували селеніт натрію і до ішемії мозку
Примітка - достовірно щодо контролю (інтактні щури),
# - Р ≤ 0,05
Таблиця 32.
Оцінка ЛПЗ у білих щурів отримували селеніт цинку до ішемії мозку
Примітка
1 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку),
- Р ≤ 0,05
2 достовірно щодо контролю (інтактні щури),
# - Р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту цинку (інтактні щури),
$ - Р ≤ 0,05
Таблиця 33.
Оцінка часу перебування білих щурів в темному відсіку у білих щурів, які отримували селеніт натрію до ішемії мозку
Примітка
1 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку),
- Р ≤ 0,05
2 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту цинку (щури перенесли ішемію мозку),
$ - Р ≤ 0,05
Таблиця 34
Оцінка часу перебування білих щурів в темному відсіку у білих щурів, які отримували селеніт цинку до ішемії мозку
Примітка
1 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку), * - р ≤ 0,05
2 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту натрію (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05
Наступним етапом дослідження була оцінка координації рухів у тесті «обертається стрижень». Селеніт натрію і селеніт цинку вводили внутрішньочеревно, одноразово, за 10-15 хвилин до проведення експерименту в дозі 100 мкг / кг. У контрольних дослідах в тих же умовах вводили фізіологічний розчин.
Щурів розміщували на горизонтальний стрижень діаметром 4 см, що обертається зі швидкістю 3 об / хв. Нездатність тварин утримувати рівновагу на стрижні протягом трьох хвилин розглядали як прояв порушення координації рухів. Для вивчення координації рухів в динаміці дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після ішемії. Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблиці 35 і 36.
Таблиця 35.
Вплив профілактичного введення селеніту натрію на координацію рухів білих щурів перенесли тотальну ішемію мозку
Примітка
1 достовірно відносно вихідних даних з речовиною, інтактні щури, & р ≤ 0,05
2 достовірно щодо селеніту цинку (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05
Таблиця 36.
Вплив профілактичного введення селеніту цинку на координацію рухів білих щурів перенесли тотальну ішемію мозку
Примітка
1 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05
2 достовірно щодо селеніту натрію (щури перенесли ішемію мозку), *- р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту натрію (інтактні щури), $ - р ≤ 0,05
Проведені експерименти показали, що в постішеміческом періоді в групі контрольних тварин зазначалося погіршення координації рухів. Селеніт цинку і селеніт натрію значно послаблювали викликане ішемією порушення координації рухів, що проявлялося в збільшенні часу утримання щурів на обертовому стрижні. Так, в контрольних дослідах кількість тварин, утриматися на обертовому стрижні протягом 3-х хвилин, склало 42,9%. При попередньому введенні селеніту натрію і селеніту цинку значно підвищувався відсоток щурів, утриматися на стрижні, і до кінця тижня ці показники склали відповідно: 62,5% і 54,6%
Таким чином, після ішемії відзначалися значні порушення координації рухів тварин. Одноразове профілактичне введення селеніту натрію або селеніту цинку справляло позитивний вплив на даний показник у постішеміческом періоді.
2. Вивчення терапевтичної дії досліджуваних сполук на психоневрологічний статус тварин, які зазнали впливу гравітаційних перевантажень
Поздовжні гравітаційні перевантаження, величиною 9g протягом 10 хв. створювалися центрифугою. В експерименті використовувалися білі щури масою 220-250г. Тварини були розділені на три досліджувані групи, по 6 тварин у кожній. У контрольній групі - щури, які отримували ізотонічний розчин. Друга і третя група - щури, яким через 50 - 60 хвилин після перевантажень внутрішньочеревно вводили селеніт натрію і селеніт цинку в дозі 100 мкг / і потім протягом тижня за 30-40 хвилин до експерименту.
Для вивчення впливу досліджуваних сполук на різні фази пам'яті - навчання білих щурів проводили через 24 години після ішемії в методиці умовного рефлексу пасивного уникнення в модифікації Буреш, Бурешова. У кожній групі тварин проводили тест на відтворення УРПІ. При приміщенні щурів в експериментальну установку реєстрували латентний період заходу (ЛПЗ) пацюки в темну камеру і час перебування (ВП) у цій камері протягом 3 хвилин. Для вивчення ЛПЗ та ВП в темному відсіку в динаміці - дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після навчання тварин.
Оскільки навчання тварин проводилося після ішемії, а введення досліджуваних сполук проводили до ішемії - це дозволило судити про ступінь неврологічних порушень ішемізованих тварин. У ході експериментів було встановлено, що в контрольній групі тварин зазначалося погіршення процесів навчання і процесів відтворення пам'ятного сліду. Ці ефекти найбільш яскраво виявлялися в перші дні спостереження і кілька слабшали дня сьомого спостереження. Селеніт натрію і селеніт цинку значно збільшували ЛПЗ та ВП. Проте виразність ефекту селенитов була різною. Найбільш активним виявився селеніт цинку. Вивчаються з'єднання у інтактних тварин сприяли збереженню досвіду УРПІ. Ці дані дозволяють зробити висновок, що порушення пам'яті щурів, мабуть, пов'язано з погіршенням процесів фіксації навчання або консолідації пам'яті (перехід короткочасної пам'яті в довготривалу). Отримані експериментальні дані статистично оброблені і представлені в таблицях 31 - 34.
Таблиця 31.
Оцінка ЛПЗ у білих щурів отримували селеніт натрію і до ішемії мозку
| Досліджувані речовини | Дози, мкг / кг | Кількість тварин | Латентний період першого заходу щурів в темний відсік в сек. | ||
| 2 день | 4 день | 7 день | |||
| Фіз. розчин | 7 | 88,6 ± 30,2 | 122,1 ± 41,0 | 153,6 ± 24,5 | |
| Селеніт натрію | 100 | 9 | 120,6 ± 30,7 | 127,8 ± 40,2 | 147,2 ± 34,8 |
# - Р ≤ 0,05
Таблиця 32.
Оцінка ЛПЗ у білих щурів отримували селеніт цинку до ішемії мозку
| Досліджувані речовини | Дози, мкг / кг | Кількість тварин | Латентний період першого заходу щурів в темний відсік у сек. | ||
| 2 день | 4 день | 7 день | |||
| Фіз. розчин | 7 | 88,6 ± 30,2 | 122,1 ± 41,0 | 153,6 ± 24,5 # | |
| Селеніт цинку | 100 | 11 | 155,5 ± 31,2 | 145,9 ± 22,6 | 150,0 ± 27,3 |
1 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку),
- Р ≤ 0,05
2 достовірно щодо контролю (інтактні щури),
# - Р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту цинку (інтактні щури),
$ - Р ≤ 0,05
Таблиця 33.
Оцінка часу перебування білих щурів в темному відсіку у білих щурів, які отримували селеніт натрію до ішемії мозку
| Досліджувані речовини | Дози, мкг / кг | Кількість вожівотних | Час перебування щурів у темному відсіку в сек. | ||
| 2 день | 4 день | 7 день | |||
| Фіз. розчин | 7 | 20,0 ± 10,0 | 11,4 ± 7,8 | 3,6 ± 4,1 # | |
| Селеніт натрію | 100 | 9 | 9,4 ± 6,2 $ | 5,0 ± 5,0 # | 4,2 ± 4,0 # |
1 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку),
- Р ≤ 0,05
2 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту цинку (щури перенесли ішемію мозку),
$ - Р ≤ 0,05
Таблиця 34
Оцінка часу перебування білих щурів в темному відсіку у білих щурів, які отримували селеніт цинку до ішемії мозку
| Досліджувані речовини | Дози, мкг / кг | Кількість тварин | Час перебування щурів у темному відсіку в сек. | ||
| 2 день | 4 день | 7 день | |||
| Фіз. розчин | 7 | 20,0 ± 10,0 | 11,4 ± 7,8 | 3,6 ± 4,1 # | |
| Селеніт цинку | 100 | 11 | 1,8 ± 2,6 * # $ | 6,8 ± 5,3 # | 4,1 ± 4,5 # |
1 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку), * - р ≤ 0,05
2 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту натрію (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05
Наступним етапом дослідження була оцінка координації рухів у тесті «обертається стрижень». Селеніт натрію і селеніт цинку вводили внутрішньочеревно, одноразово, за 10-15 хвилин до проведення експерименту в дозі 100 мкг / кг. У контрольних дослідах в тих же умовах вводили фізіологічний розчин.
Щурів розміщували на горизонтальний стрижень діаметром 4 см, що обертається зі швидкістю 3 об / хв. Нездатність тварин утримувати рівновагу на стрижні протягом трьох хвилин розглядали як прояв порушення координації рухів. Для вивчення координації рухів в динаміці дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після ішемії. Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблиці 35 і 36.
Таблиця 35.
Вплив профілактичного введення селеніту натрію на координацію рухів білих щурів перенесли тотальну ішемію мозку
| Досліджувані речовини | Дози, мкг / кг | Кількість щурів | Кількість тварин залишилися на стрижні | |||||
| 2 день | 4 день | 7 день | ||||||
| Абс. | % | Абс. | % | Абс. | % | |||
| Фіз. розчин | 7 | 3 | 42,9 | 4 | 57,2 | 3 | 42,9 | |
| Селеніт натрію | 100 | 9 | 4 | 44,4 $ | 3 | 33,3 & | 6 | 66,7 |
1 достовірно відносно вихідних даних з речовиною, інтактні щури, & р ≤ 0,05
2 достовірно щодо селеніту цинку (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05
Таблиця 36.
Вплив профілактичного введення селеніту цинку на координацію рухів білих щурів перенесли тотальну ішемію мозку
| Досліджувані речовини | Дози, мкг / кг | Кількість щурів | Кількість тварин залишилися на стрижні | |||||
| 2 день | 4 день | 7 день | ||||||
| Абс. | % | Абс. | % | Абс. | % | |||
| Фіз. розчин | 7 | 3 | 42,9 | 4 | 57,2 | 3 | 42,9 | |
| Селеніт цинку | 100 | 11 | 2 | 18,2 # * | 3 | 27,3 # $ | 6 | 54,5 & |
1 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05
2 достовірно щодо селеніту натрію (щури перенесли ішемію мозку), *- р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту натрію (інтактні щури), $ - р ≤ 0,05
Проведені експерименти показали, що в постішеміческом періоді в групі контрольних тварин зазначалося погіршення координації рухів. Селеніт цинку і селеніт натрію значно послаблювали викликане ішемією порушення координації рухів, що проявлялося в збільшенні часу утримання щурів на обертовому стрижні. Так, в контрольних дослідах кількість тварин, утриматися на обертовому стрижні протягом 3-х хвилин, склало 42,9%. При попередньому введенні селеніту натрію і селеніту цинку значно підвищувався відсоток щурів, утриматися на стрижні, і до кінця тижня ці показники склали відповідно: 62,5% і 54,6%
Таким чином, після ішемії відзначалися значні порушення координації рухів тварин. Одноразове профілактичне введення селеніту натрію або селеніту цинку справляло позитивний вплив на даний показник у постішеміческом періоді.
2. Вивчення терапевтичної дії досліджуваних сполук на психоневрологічний статус тварин, які зазнали впливу гравітаційних перевантажень
Поздовжні гравітаційні перевантаження, величиною 9g протягом 10 хв. створювалися центрифугою. В експерименті використовувалися білі щури масою 220-250г. Тварини були розділені на три досліджувані групи, по 6 тварин у кожній. У контрольній групі - щури, які отримували ізотонічний розчин. Друга і третя група - щури, яким через 50 - 60 хвилин після перевантажень внутрішньочеревно вводили селеніт натрію і селеніт цинку в дозі 100 мкг / і потім протягом тижня за 30-40 хвилин до експерименту.
Оцінка впливу селеніту натрію і селеніту цинку на орієнтовно дослідну та рухову активність тварин проводили в тесті «відкрите поле». Протягом 3 хвилин спостереження реєстрували число пересічених секторів (рухова активність), вставання на задні лапи і число пересічених центральних секторів (орієнтовно-дослідницька активність), кількість стереотипних рухів (грумінг), емоційну активність (дефекація, урінаціі).
Дослідження проводили на другий, четвертий і сьомий день після перенесених перевантажень. Це дозволило стежити за динамікою змін психоневрологічного статусу ішемізованих тварин. Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблицях 37-39.
Результати проведених досліджень показали, що в постішеміческом періоді в контрольних дослідах відзначено зниження рухової активності, про що свідчить зменшення числа пересічених секторів, зниження пізнавальної активності (зменшення числа вертикальних стійок) щурів та їх емоційного стану (зменшення актів груминга і числа дефекацій).
Дослідження проводили на другий, четвертий і сьомий день після перенесених перевантажень. Це дозволило стежити за динамікою змін психоневрологічного статусу ішемізованих тварин. Отримані експериментальні дані статично оброблені і представлені в таблицях 37-39.
Результати проведених досліджень показали, що в постішеміческом періоді в контрольних дослідах відзначено зниження рухової активності, про що свідчить зменшення числа пересічених секторів, зниження пізнавальної активності (зменшення числа вертикальних стійок) щурів та їх емоційного стану (зменшення актів груминга і числа дефекацій).
Таблиця 37.
Показники психоневрологічного статусу тварин контрольної групи тварин у постішеміческом періоді
Таблиця 38.
Вплив селеніту натрію (100 мкг) на показники психоневрологічного статусу тварин, які перенесли тотальну ішемію мозку (лікувального введення)
Примітка
1 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05
2 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту цинку (щури перенесли ішемію мозку), *- р ≤ 0,05
Таблиця 39.
Вплив селеніту цинку (100 мкг) на показники психоневрологічного статусу тварин, які перенесли тотальну ішемію мозку (лікувального введення)
Примітка
1 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05
2 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту натрію (щури перенесли ішемію мозку), *- р ≤ 0,05
Показники психоневрологічного статусу тварин контрольної групи тварин у постішеміческом періоді
| Час експерименту (Добу) | Досліджувані речовини | Кількість пройдених секторів | Кількість стійок | Дефекація | Число урінаціі | Грумінг | Кількість пройдених центральних секторів |
| 2 день | фіз. розчин | 13,0 ± 4,0 | 5,7 ± 4,3 | 3,0 ± 1,7 | 0,3 ± 0,4 | 0,8 ± 0,6 | 0,3 ± 0,6 |
| 4 день | фіз. розчин | 12,2 ± 3,2 | 6,5 ± 2,5 | 3,0 ± 1,0 | 0,3 ± 0,4 | 0,8 ± 0,8 | 0,3 ± 0,4 |
| 7 день | фіз. розчин | 11,8 ± 5,4 | 6,0 ± 3,7 | 3,2 ± 1,8 | 0,7 ± 0,7 & | 1,0 ± 0,7 | 0,3 ± 0,4 |
Вплив селеніту натрію (100 мкг) на показники психоневрологічного статусу тварин, які перенесли тотальну ішемію мозку (лікувального введення)
| Час експерименту (Добу) | Досліджувані речовини | Кількість пройдених секторів | Кількість стійок | Дефекація | Число урінаціі | Грумінг | Кількість пройдених центральних секторів |
| 2 день | Селеніт натрію | 12,5 ± 3,3 | 5,5 ± 2,8 | 2,7 ± 1,8 | 0,8 ± 0,8 | 2,0 ± 1,0 # $ | 0,3 ± 0,4 |
| 4 день | Селеніт натрію | 11,5 ± 2,3 * | 5,7 ± 2,9 | 2,5 ± 2,2 | 0,5 ± 0,7 | 0,7 ± 0,7 # | 0,5 ± 0,7 |
| 7 день | Селеніт натрію | 10,3 ± 3,3 # $ | 6,5 ± 3,7 | 1,8 ± 1,8 | 0,2 ± 0,3 | 1,2 ± 0,6 | 0,2 ± 0,3 |
1 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05
2 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту цинку (щури перенесли ішемію мозку), *- р ≤ 0,05
Таблиця 39.
Вплив селеніту цинку (100 мкг) на показники психоневрологічного статусу тварин, які перенесли тотальну ішемію мозку (лікувального введення)
| Час експерименту (Добу) | Досліджувані речовини | Кількість пройдених секторів | Кількість стійок | Дефекація | Число урінаціі | Грумінг | Кількість пройдених центральних секторів |
| 2 день | Селеніт цинку | 18,7 ± 5,7 | 7,2 ± 4,9 | 3,7 ± 1,8 | 0,8 ± 0,8 | 1,5 ± 1,2 | 1,0 ± 1,0 |
| 4 день | Селеніт цинку | 17,0 ± 4,0 * | 7,2 ± 2,9 | 2,7 ± 1,7 | 0,5 ± 0,7 | 1,2 ± 0,9 | 0,7 ± 0,7 |
| 7 день | Селеніт цинку | 17,2 ± 4,5 * | 3,5 ± 2,2 # | 2,3 ± 2,3 | 0,7 ± 0,7 | 0,5 ± 0,5 | 0,8 ± 0,8 |
1 достовірно щодо контролю (інтактні щури), # - р ≤ 0,05
2 достовірно щодо контролю (щури перенесли ішемію мозку), $ - р ≤ 0,05
3 достовірно щодо селеніту натрію (щури перенесли ішемію мозку), *- р ≤ 0,05
Ці порушення найбільш яскраво виявлялися протягом перших днів після ішемії, а в наступні добу кілька слабшали. Селеніт натрію і селеніт цинку, що вводяться після ішемії мозку, підвищували рухову активність щурів. Більш виражений ефект надавав селеніт цинку, під впливом якого достовірно збільшувалося число пересічених тваринами секторів. Лікувальне введення селеніту натрію зменшувало число вертикальних стійок, стереотипних рухів і не змінювало число дефекацій в порівнянні з контролем, що свідчить про деяке зниження дослідної та емоційної активності. Селеніт цинку підвищував орієнтовно-дослідницьку активність (збільшував число стійок) і знижував рівень емоційної напруги (зменшував акти груминга і дефекацій) щурів в постішеміческом періоді.
Для з'ясування впливу досліджуваних сполук на мнестичні функції проводили тест на відтворення УРПІ. Експериментальні тварини були розділені на 3 групи по 6 тварин. Навчання білих щурів здійснювали за 24 години до ішемії за описаною раніше методикою умовного рефлексу пасивного уникнення. При приміщенні тварин в експериментальну установку реєстрували латентний період заходу (ЛПЗ) пацюки в темну камеру і час перебування (ВП) в ній. Для вивчення координації рухів в динаміці дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після ішемії.
Під впливом ішемії, пацюки забували ситуацію і частіше заходили в темний відсік установки, при цьому збільшувався час перебування в ньому. В ходе экспериментов было установлено, что изучаемые соединения у животных, перенесших ишемию мозга, способствовали сохранению навыка УРПИ, что проявлялось в увеличении ЛПЗ и ВП в тёмной камере. Однако выраженность эффектов селенитов была различной. Наиболее активным оказался селенит натрия.
Полученные экспериментальные данные статически обработаны и представлены в таблицах 40 и 41.
Таблиця 40.
Оценка ЛПЗ у белых крыс получавших селенит натрия и селенит цинка после ишемии мозга
Примечание - достоверно относительно контроля (интактные крысы), # - р≤0,05
Таблиця 41.
Оценка ВП в тёмном отсеке белых крыс получавших селенит натрия и селенит цинка после ишемии мозга
Примечание - достоверно относительно контроля (интактные крысы), # - р≤0,05
Под влиянием ишемии, неврологические нарушения в контрольной группе животных было значительно. Однократное введение селенита натрия или селенита цинка оказывали положительное влияние на «качество» жизни животных в постишемическом периоде. Таким образом, селенит натрия и селенит цинка оказывали положительное влияние на процессы воспроизведения памятного следа в постишемическом периоде.
Для оценки координации движений крыс помещали на горизонтальный стержень диаметром 4 см, вращающийся со скоростью 3 об/мин. Неспособность животных удерживать равновесие на стержне в течение трёх минут рассматривали как проявление нарушения координации движений. Для изучения показателей в динамике исследование проводили на 2, 4 и затем на 7 сутки после ишемии.
Результаты проведённых исследований показали, что в постишемическом периоде в группе контрольных животных отмечалось ухудшение координации движений. Селенит цинка достоверно ослаблял вызванное ишемией нарушение координации движений, что проявлялось в увеличении времени удержания крыс на вращающемся стержне. Так, в контрольных опытах количество животных, удержавшихся на вращающемся стержне в течение 3-х минут, составило 66,7%. При лечебном введении селенита цинка повышался процент крыс, удержавшихся на стержне, и к концу недели эти показатели составил 83,3%. Менее активным оказался селенит натрия, координация движений на его фоне практически не отличалась от контроля.
Полученные экспериментальные данные статически обработаны и представлены в таблицах 42 и 43.
Таблиця 42.
Тест на координацию движений белых крыс получавших селенит натрия после ишемии мозга
Примечание - достоверно относительно селенита натрия (интактные крысы), $ - р≤0,05
Таблиця 43.
Тест на координацию движений белых крыс получавших селенит цинка после ишемии мозга
Таким образом селениты оказывали положительное влияние на восстановление координации движений в постишемическом периоде.
Висновки
1. Селенит натрия в дозе 100 мкг/кг при профилактическом и лечебном введении повышает горизонтальную и умеренно снижает вертикальную активность, уменьшает уровень эмоционального напряжения белых крыс в постишемическом периоде. Селенит цинка повышает двигательную, ориентировочно-исследовательскую и снижает уровень тревожности крыс перенесших тотальную ишемию мозга при его профилактическом введении.
2. Исследуемые соединения в дозе 100 мкг/кг оказывают существенное влияние на процессы выработки УРПИ: увеличивали длительность латентного периода захода в тёмный отсек и время пребывания в нём. Улучшение мнестических функций отмечалось как при профилактическом, так и при лечебном введении.
3. Селенит натрия и селенит цинка в дозе 100 мкг/кг улучшают координацию движений белых крыс, подвергшихся воздействию критических гравитационных перегрузок, при их профилактическом введении.
Література
1. Скворцова, В.І. Лікування і профілактика ішемічного інсульту / шпакових В.І., Стаховська Л.В. / / Діагностика і терапія в клініці внутрішніх хвороб: лекції для практикуючих лікарів, 10 Ріс. нац. конгр. - М., 2004. - С. 142-160.
2. Кузнєцов, Г.П. Клінічне значення селенодефеціта у хворих з серцево-судинними захворюваннями самарського регіону та його корекції препаратом «Cелена» / Г.П. Кузнєцов, П.Л. Лебедєв / / т фіз. і клинич. фармакологія. - 2005. - Т.58, № 5. - С. 26-28.
3. Демченко, І.Т. Кровопостачання бодрствующего мозку / І.Т. Демченко. - Л.: Наука, 2007. - 174 с.
4. Фізіологія ЦНС: Учеб. посібник. - Ростов н / Д: Фенікс, 2007. - 450 с.
5. Балуєва, Т.В. До питання про центральну норадренергической регуляції мозкового кровообігу / Т.В. Балуєва / / фізіолого. журн. СРСР ім. Сєченова. - 2006. - № 7. - С. 913-917.
6. Анатомія людини: У 2 т. / За ред. М.Р. Сапін. - М.: Медицина, 2007. - Т.2. - 479 с.
Для з'ясування впливу досліджуваних сполук на мнестичні функції проводили тест на відтворення УРПІ. Експериментальні тварини були розділені на 3 групи по 6 тварин. Навчання білих щурів здійснювали за 24 години до ішемії за описаною раніше методикою умовного рефлексу пасивного уникнення. При приміщенні тварин в експериментальну установку реєстрували латентний період заходу (ЛПЗ) пацюки в темну камеру і час перебування (ВП) в ній. Для вивчення координації рухів в динаміці дослідження проводили на 2, 4 і потім на 7 добу після ішемії.
Під впливом ішемії, пацюки забували ситуацію і частіше заходили в темний відсік установки, при цьому збільшувався час перебування в ньому. В ходе экспериментов было установлено, что изучаемые соединения у животных, перенесших ишемию мозга, способствовали сохранению навыка УРПИ, что проявлялось в увеличении ЛПЗ и ВП в тёмной камере. Однако выраженность эффектов селенитов была различной. Наиболее активным оказался селенит натрия.
Полученные экспериментальные данные статически обработаны и представлены в таблицах 40 и 41.
Таблиця 40.
Оценка ЛПЗ у белых крыс получавших селенит натрия и селенит цинка после ишемии мозга
| Досліджувані речовини | Дози, мкг / кг | Кількість тварин | Латентный период первого захода крыс в тёмный отсек в сек. | ||
| 2 день | 4 день | 7 день | |||
| Фіз. розчин | 6 | 76,7±30,0# | 85,8±36,1 | 105,8±33,9 | |
| Селеніт натрію | 100 | 6 | 83,3±43,9# | 98,3±54,4 | 110,8±46,1 |
| Селеніт цинку | 100 | 6 | 81,7±56,7 | 102,5±42,5 | 112,5±45,8 |
Таблиця 41.
Оценка ВП в тёмном отсеке белых крыс получавших селенит натрия и селенит цинка после ишемии мозга
| Досліджувані речовини | Дози, мкг / кг | Кількість тварин | Время пребывания крыс в тёмном отсеке в сек. | ||
| 2 день | 4 день | 7 день | |||
| Фіз. розчин | 6 | 15,8±7,8 | 14,2±7,2 | 11,7±6,7 | |
| Селеніт натрію | 100 | 6 | 14,2±6,1 | 10,0±6,7# | 7,5±5,8# |
| Селеніт цинку | 100 | 6 | 15,0±11,7 | 14,2±9,2 | 10,0±8,3 |
Под влиянием ишемии, неврологические нарушения в контрольной группе животных было значительно. Однократное введение селенита натрия или селенита цинка оказывали положительное влияние на «качество» жизни животных в постишемическом периоде. Таким образом, селенит натрия и селенит цинка оказывали положительное влияние на процессы воспроизведения памятного следа в постишемическом периоде.
Для оценки координации движений крыс помещали на горизонтальный стержень диаметром 4 см, вращающийся со скоростью 3 об/мин. Неспособность животных удерживать равновесие на стержне в течение трёх минут рассматривали как проявление нарушения координации движений. Для изучения показателей в динамике исследование проводили на 2, 4 и затем на 7 сутки после ишемии.
Результаты проведённых исследований показали, что в постишемическом периоде в группе контрольных животных отмечалось ухудшение координации движений. Селенит цинка достоверно ослаблял вызванное ишемией нарушение координации движений, что проявлялось в увеличении времени удержания крыс на вращающемся стержне. Так, в контрольных опытах количество животных, удержавшихся на вращающемся стержне в течение 3-х минут, составило 66,7%. При лечебном введении селенита цинка повышался процент крыс, удержавшихся на стержне, и к концу недели эти показатели составил 83,3%. Менее активным оказался селенит натрия, координация движений на его фоне практически не отличалась от контроля.
Полученные экспериментальные данные статически обработаны и представлены в таблицах 42 и 43.
Таблиця 42.
Тест на координацию движений белых крыс получавших селенит натрия после ишемии мозга
| Досліджувані речовини | Дози, мкг / кг | Кількість тварин | Кол-во животных оставшихся на стержне | |||||
| 2 день | 4 день | 7 день | ||||||
| Абс. | % | Абс. | % | Абс. | % | |||
| Фіз. розчин | 6 | 3 | 50,0 | 3 | 50,0 | 4 | 66,7 | |
| Селеніт натрію | 100 | 6 | 3 | 50,0 | 4 | 66,7$ | 4 | 66,7 |
Таблиця 43.
Тест на координацию движений белых крыс получавших селенит цинка после ишемии мозга
| Досліджувані речовини | Дози, мкг / кг | Кількість тварин | Кол-во животных оставшихся на стержне | |||||
| 2 день | 4 день | 7 день | ||||||
| Абс. | % | Абс. | % | Абс. | % | |||
| Фіз. розчин | 6 | 3 | 50,0 | 3 | 50,0 | 4 | 66,7 | |
| Селеніт цинку | 100 | 6 | 2 | 33,3 | 3 | 50,0 | 5 | 83,3 |
Висновки
1. Селенит натрия в дозе 100 мкг/кг при профилактическом и лечебном введении повышает горизонтальную и умеренно снижает вертикальную активность, уменьшает уровень эмоционального напряжения белых крыс в постишемическом периоде. Селенит цинка повышает двигательную, ориентировочно-исследовательскую и снижает уровень тревожности крыс перенесших тотальную ишемию мозга при его профилактическом введении.
2. Исследуемые соединения в дозе 100 мкг/кг оказывают существенное влияние на процессы выработки УРПИ: увеличивали длительность латентного периода захода в тёмный отсек и время пребывания в нём. Улучшение мнестических функций отмечалось как при профилактическом, так и при лечебном введении.
3. Селенит натрия и селенит цинка в дозе 100 мкг/кг улучшают координацию движений белых крыс, подвергшихся воздействию критических гравитационных перегрузок, при их профилактическом введении.
Література
1. Скворцова, В.І. Лікування і профілактика ішемічного інсульту / шпакових В.І., Стаховська Л.В. / / Діагностика і терапія в клініці внутрішніх хвороб: лекції для практикуючих лікарів, 10 Ріс. нац. конгр. - М., 2004. - С. 142-160.
2. Кузнєцов, Г.П. Клінічне значення селенодефеціта у хворих з серцево-судинними захворюваннями самарського регіону та його корекції препаратом «Cелена» / Г.П. Кузнєцов, П.Л. Лебедєв / / т фіз. і клинич. фармакологія. - 2005. - Т.58, № 5. - С. 26-28.
3. Демченко, І.Т. Кровопостачання бодрствующего мозку / І.Т. Демченко. - Л.: Наука, 2007. - 174 с.
4. Фізіологія ЦНС: Учеб. посібник. - Ростов н / Д: Фенікс, 2007. - 450 с.
5. Балуєва, Т.В. До питання про центральну норадренергической регуляції мозкового кровообігу / Т.В. Балуєва / / фізіолого. журн. СРСР ім. Сєченова. - 2006. - № 7. - С. 913-917.
6. Анатомія людини: У 2 т. / За ред. М.Р. Сапін. - М.: Медицина, 2007. - Т.2. - 479 с.