Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на церебральну гемодинаміку, системний артеріальний тиск і частоту серцевих скорочень умовах експериментальної норми
Гострі досліди проведені на 90 мишах масою 20 - 22 г і 48 щурах масою 200 - 250 р. Реєстрацію об'ємної швидкості мозкового кровотоку здійснювали методом водневого кліренсу. Системний артеріальний тиск і частоту серцевих скорочень у стережуть тварин проводили з використанням одноразових датчиків SP-01 (США) та комп'ютерної програми Bioshell. Досліджувані речовини вводили в дозах 30, 50, 100 мкг / кг внутрішньоочеревинно.1. Вивчення гострої токсичності досліджуваних сполук
Визначення гострої токсичності селеніту натрію, селеніту цинку і розрахунки LD50 проводили за методом Кербера. Білим мишам (90 особин) масою 20-22 г, обох статей селеніт натрію і селеніт цинку вводили в 0,5 мл ізотонічного розчину внутрішньоочеревинно в дозах 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 мг / кг. Спостереження за поведінкою і станом піддослідних тварин проводилося протягом 7 діб, при цьому зазначали зміна зовнішнього вигляду, поведінкових реакцій і кількість загиблих тварин. Контрольній групі тварин (10 особин) вводили фізіологічний розчин у еквівалентному обсязі.LD50 розраховували за формулою:
LD50 = LD100 - Σ (Z * D) / m, де
Σ - сума.
Z - половина суми числа тварин полеглих від двох наступних доз;
D - інтервал між кожними двома наступними дозами;
m - число тварин на кожну дозу;
За час спостереження в контрольній групі не загинуло жодної тварини, а також не спостерігалося особливих змін у зовнішньому вигляді і поведінці мишей.
У дослідних групах кількість загиблих тварин в залежності від дози наведено у таблицях 1 і 2.
Таблиця 1 - Вплив різних доз селеніту натрію на виживаність тварин
| Доза селеніту натрію мг / кг | Загальна кількість тварин у групі | Число загиблих тварин | Z | D | Z * D |
| 1 | 6 | 0 | - | - | - |
| 2 | 6 | 0 | 0 | 1 | 0 |
| 3 | 6 | 2 | 1 | 1 | 1 |
| 4 | 6 | 3 | 3.5 | 1 | 3.5 |
| 5 | 6 | 3 | 4.5 | 1 | 4.5 |
| 6 | 6 | 5 | 5.5 | 1 | 5.5 |
| 7 | 6 | 5 | 7.5 | 1 | 7.5 |
| 8 | 6 | 6 | 8 | 1 | 8 |
LD50 = 8 - (1,0 +3,5 +4,5 +5,5 +7,5 +8,0) / 6 = 3 мг / кг
Результати проведених досліджень показали, що відповідно до вимог табуляції класів токсичності селеніт натрію відноситься до другого класу токсичності. LD50 склала 3 мг / кг.
Таблиця 2 - Вплив різних доз селеніту цинку на виживаність тварин
| Доза селеніту натрію мг / кг | Загальна кількість тварин у групі | Число загиблих тварин | Z | D | Z * D |
| 1 | 6 | 0 | - | - | - |
| 2 | 6 | 0 | 0 | 1 | 0 |
| 3 | 6 | 0 | 0 | 1 | 0 |
| 4 | 6 | 2 | 1 | 1 | 1 |
| 5 | 6 | 4 | 4 | 1 | 4 |
| 6 | 6 | 4 | 6 | 1 | 6 |
| 7 | 6 | 5 | 6.5 | 1 | 6.5 |
| 8 | 6 | 6 | 8 | 1 | 8 |
LD50 = 8 - (1,0 +4,0 +6,0 +6,5 +8,0) / 6 = 3,75 мг / кг
Результати проведених досліджень показали, що відповідно до вимог табуляції класів токсичності селеніт цинку відноситься до другого класу токсичності. LD50 склала 3,75 мг / кг.
2. Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на мозковий кровотік
Експерименти проведені на 40 білих безпородних щурах, вирощених у стандартних умовах віварію, масою 200,0-230,0 г. Як наркозу використовували хлоралгідрат в дозі 300 мг / кг. Речовини вводили внутрішньочеревно, одноразово, у вигляді ізотонічного розчину в дозах 100, 50 і 30 мкг / кг. МК реєстрували методом водневого кліренсу. Отримані результати порівнювали з вихідними значеннями МК.Внутрішньочеревне введення селеніту натрію в дозі 30 мкг / кг (6 дослідів) викликало достовірне зниження МК з перших хвилин експерименту. Так, на 5 хвилині спостереження ступінь зниження МК склала 25%, а на 15 хвилині - 41,2% по відношенню до вихідного рівня. Надалі МК продовжував знижуватися і на 60 хвилині був нижче початкового рівня на 53,7 ± 15,8% (таблиця 3).
Таблиця 3 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту натрію в дозі 30 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)
| Вихідні дані | МК мл/100г/мін 153,0 ± 66,3 |
| Час після введення фізіологічного розчину | % Від вихідних даних |
| Через 5 хв | -25,0 ± 19,4 * |
| 15 хв | -41,2 ± 17,1 * |
| 30 хв | -46,0 ± 10,6 * |
| 45 хв | -52,1 ± 13,7 * |
| 60 хв | -53,7 ± 15,8 * |
Аналогічно змінювався МК після введення селеніту натрію в дозі 50 мкг / кг (6 дослідів), однак ступінь його зниження була менш вираженою. На 5 хвилині спостереження МК був нижче початкового рівня на 28,1 ± 13,1%, а до кінця спостереження - на 41,3 ± 10,5% (таблиця 4).
Таблиця 4 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту натрію в дозі 50 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)
| Вихідні дані | МК мл/100г/мін 114,4 ± 30,4 |
| Час після введення фізіологічного розчину | % Від вихідних даних |
| Через 5 хв | -28,1 ± 13,1 * |
| 15 хв | -28,4 ± 13,7 |
| 30 хв | -25,3 ± 24,6 |
| 45 хв | -32,0 ± 8,1 * |
| 60 хв | -41,3 ± 10,5 * |
При введенні селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг (8 дослідів) ефект також наступав з перших хвилин спостереження, при цьому зниження МК було достовірно нижче ніж при введенні селеніту натрію в дозах 30 і 50 мкг / кг. Так, в ранні терміни спостереження мозковий кровотік зменшувався незначно (на 6-14%). До кінця експериментів на 60 хвилині МК був менше вихідного рівня на 20,5 ± 12,7% (таблиця 5).
Таблиця 5 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 8, D%)
| Вихідні дані | МК мл/100г/мін 184,6 ± 59,6 |
| Час після введення фізіологічного розчину | % Від вихідних даних |
| Через 5 хв | -6,6 ± 4,6 * |
| 15 хв | -13,4 ± 6,6 * |
| 30 хв | -16,2 ± 15,9 |
| 45 хв | -22,0 ± 11,1 * |
| 60 хв | -20,5 ± 12,7 * |
Сумарні результати дослідів представлені на малюнку 1.
Рисунок 1 - Динаміка зміни МК у білих щурів при введенні селеніту натрію в дозах 30 мкг / кг, 50 мкг / кг, 100 мкг / кг
Примітка - достовірно відносно вихідних даних, * р ≤ 0,05
По осі абсцис - час спостереження у хвилинах; по осі ординат - зміна мозкового кровотоку у відсотках від вихідного рівня
Внутрішньочеревне введення селеніту цинку в дозі 30 мкг / кг (6 дослідів) викликало достовірне зниження МК з перших хвилин експерименту. Так, на 5 хвилині спостереження ступінь зниження МК склала 18,3%, по відношенню до вихідного рівня. Надалі МК також зберігав тенденцію до зниження. До 30 хвилині спостереження МК був нижче початкового рівня в середньому на 39,8%. До 45 хвилині МК дослідних тварин стабілізувався. Зниження по відношенню до вихідного рівня склало 38,6%. На 60 хвилині спостереження МК залишився нижче початкового рівня на 39,9% (таблиця 6).
Таблиця 6 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту цинку в дозі 30 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)
| Вихідні дані | МК мл/100г/мін 149,9 ± 27,1 |
| Час після введення фізіологічного розчину | % Від вихідних даних |
| Через 5 хв | -18,3 ± 17,3 * |
| 15 хв | -24,3 ± 10,9 * |
| 30 хв | -39,8 ± 9,8 * |
| 45 хв | -38,6 ± 15,3 * |
| 60 хв | -39,9 ± 22,2 * |
У дослідах з введенні селеніту цинку в дозі 50 мкг / кг також відзначалася тенденція до зниження МК. Однак достеменно МК знижувався тільки на 45 хвилині, ступінь його зниження склала в середньому 38,2% (таблиця 7).
Таблиця 7 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту цинку в дозі 50 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)
| Вихідні дані | МК мл/100г/мін 86,7 ± 19,1 |
| Час після введення фізіологічного розчину | % Від вихідних даних |
| Через 5 хв | -14,6 ± 22,4 |
| 15 хв | -29,5 ± 21,2 |
| 30 хв | -32,1 ± 27,2 |
| 45 хв | -38,2 ± 21,5 * |
| 60 хв | -39,8 ± 27,5 |
При введенні селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг (8 дослідів) виражений вазоконстрикторний ефект наступав з перших хвилин спостереження, при цьому ступінь зниження МК до кінця спостереження була нижчою, ніж при введенні селеніту цинку в дозах 30 і 50 мкг / кг. Так, на 5 хвилині спостереження відзначалося достовірне зниження МК на 24,0 ± 18,3%. Найбільш виражена вазоконстрикторное реакція спостерігалася на 15 хвилині, коли МК був у середньому на 30,7% нижче початкового рівня. Надалі величина МК не змінювалась (таблиця 8).
Таблиця 8 - Динаміка зміни швидкості мозкового кровотоку (МК) у білих щурів при введенні селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 8, D%)
| Вихідні дані | МК мл/100г/мін 101,2 ± 22,3 |
| Час після введення фізіологічного розчину | % Від вихідних даних |
| Через 5 хв | -24,0 ± 18,3 * |
| 15 хв | -30,7 ± 17,1 * |
| 30 хв | -29,1 ± 13,2 * |
| 45 хв | -25,4 ± 17,3 * |
| 60 хв | -27,4 ± 15,0 * |
Дані про вплив різних доз селеніту цинку на мозковий кровотік представлені на малюнку 2.
Рисунок 2 - Динаміка зміни МК у білих щурів при введенні селеніту цинку в дозах 30мкг/кг, 50 мкг / кг, 100 мкг / кг
Примітка - достовірно відносно вихідних даних, * - р ≤ 0,05
По осі абсцис - час спостереження у хвилинах; по осі ординат - зміна мозкового кровотоку у відсотках від вихідного рівня
3. Вплив селеніту натрію і селеніту цинку на артеріальний тиск і частоту серцевих скорочень у стережуть щурів
Відомо, що зниження рівня артеріального тиску, а отже, і перфузійного тиску у хворих з ішемічним інсультом, викликає подальше погіршення ішемізованих ділянок мозку. Тому нейропротектори не повинні володіти вираженим гіпотензивним ефектом і не викликати істотної зміни частоти серцевих скорочень. У зв'язку з цим наступним етапом нашої роботи було вивчення впливу досліджуваних речовин на САТ і ЧСС.Експерименти проведені на 12 стережуть нормотензивних щурах обох статей, масою 220 - 250г. Попередньо за 24 - 48 годин до початку експерименту під хлоралгідратним наркозом (300 мг / кг, внутрішньоочеревинно) імплантували поліетиленовий катетер в сонну артерію. Реєстрацію даних у стережуть щурів виробляли з використанням одноразових датчиків SP-01 (США) та комп'ютерної програми "Bioshell 1.00" в реальному масштабі часу на базі персонального комп'ютера IBM AT 486 [202]. Тривалість реєстрації показників становила 60 хвилин з моменту введення досліджуваного речовини. Досліджувані сполуки вводили внутрішньочеревно, одноразово в дозі 100 мкг / кг, оскільки в цій дозі в меншій мірі знижувався мозковий кровотік.
Внутрішньочеревне введення селеніту натрію і селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг (6 дослідів) не викликало істотної АТ порівняно з вихідним рівнем у стережуть тварин протягом усього терміну спостереження. Однак необхідно відзначити, що при введенні селеніту натрію відзначалася деяка тенденція до зниження артеріального тиску на 6%, а при введенні селеніту цинку - незначне збільшення артеріального тиску в середньому на 6%.
Результати експериментів представлені на рисунку 3 і в таблицях 9,10.
Рисунок 3 - Вплив селеніту натрію і селеніту цинку (100 мкг / кг) на системний артеріальний тиск у стережуть щурів (M ± m, n = 6, D%)
Примітка - достовірно відносно вихідних даних, * - р ≤ 0,05
По осі абсцис - час спостереження у хвилинах; по осі ординат - артеріального тиску у відсотках від вихідного рівня
Таблиця 9 - Динаміка зміни АТ у білих щурів при введенні селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%) в спати
| Вихідні дані мм. рт. ст. | 108,7 ± 13,6 | |
| Час після введення речовини | % Від вихідних даних | Абсолютні значення |
| Через 5 хв | 1,2 ± 6,7 | 110,0 ± 18,6 |
| 10 хв | 0,0 ± 5,7 | 108,7 ± 24,1 |
| 15 хв | -1,1 ± 5,9 | 107,5 ± 27,6 |
| 20 хв | -2,3 ± 7,1 | 106,2 ± 21,1 |
| 25 хв | -4,2 ± 6,9 | 104,2 ± 20,7 |
| 30 хв | -4,0 ± 7,3 | 104,3 ± 24,2 |
| 35 хв | -2,8 ± 7,6 | 105,7 ± 30,1 |
| 40 хв | -3,4 ± 9,5 | 105,0 ± 26,8 |
| 45 хв | -5,1 ± 10,8 | 103,2 ± 20,1 |
| 50 хв | -6,0 ± 11,6 | 102,2 ± 22,9 |
| 55 хв | -7,1 ± 11,6 | 101,0 ± 18,1 |
| 60 хв | -6,0 ± 13,8 | 102,2 ± 18,5 |
Таблиця 10 - Динаміка зміни АТ у білих щурів при введенні селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%) в спати
| Вихідні дані мм. рт. ст. | 92,0 ± 20,8 | |
| Час після введення речовини | % Від вихідних даних | Абсолютні значення |
| Через 5 хв | 6,0 ± 19,1 | 97,5 ± 18,6 |
| 10 хв | 3,8 ± 25,2 | 95,5 ± 24,1 |
| 15 хв | 4,0 ± 28,9 | 95,7 ± 27,6 |
| 20 хв | 5,4 ± 21,7 | 97,0 ± 21,1 |
| 25 хв | 7,2 ± 20,9 | 98,7 ± 20,7 |
| 30 хв | 0,4 ± 26,2 | 92,3 ± 24,2 |
| 35 хв | 0,5 ± 32,6 | 92,5 ± 30,1 |
| 40 хв | -4,2 ± 30,4 | 88,2 ± 26,8 |
| 45 хв | 4,0 ± 21,0 | 95,7 ± 20,1 |
| 50 хв | 1,3 ± 24,6 | 93,2 ± 22,9 |
| 55 хв | 8,9 ± 18,0 | 100,2 ± 18,1 |
| 60 хв | 6,3 ± 19,0 | 97,8 ± 18,5 |
Внутрішньочеревне введення селеніту натрію і селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг (6 дослідів) не викликало істотної ЧСС у порівнянні з вихідним рівнем у стережуть тварин протягом усього терміну спостереження. Однак необхідно відзначити, що при введенні селенитов відзначалася тенденція до деякого збільшення ЧСС в середньому на 6%.
Результати експериментів представлені в таблицях 11,12.
Таблиця 11 - Динаміка зміни ЧСС у білих стережуть щурів при введенні селеніту натрію в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)
| Вихідні дані уд / хв | 392,3 ± 39,5 | |
| Час після введення речовини | % Від вихідних даних | Абсолютні значення |
| Через 5 хв | 2,1 ± 11,2 | 400,5 ± 45,0 |
| 10 хв | 2,6 ± 11,0 | 402,3 ± 44,1 |
| 15 хв | 1,3 ± 10,6 | 397,5 ± 42,1 |
| 20 хв | 5,7 ± 10,3 | 414,7 ± 42,8 |
| 25 хв | 4,6 ± 9,8 | 410,5 ± 40,4 |
| 30 хв | 6,1 ± 11,1 | 416,2 ± 46,0 |
| 35 хв | 5,1 ± 10,9 | 412,3 ± 44,9 |
| 40 хв | 3,3 ± 10,4 | 405,2 ± 42,2 |
| 45 хв | 4,3 ± 9,9 | 409,0 ± 40,4 |
| 50 хв | 4,0 ± 10,2 | 408,2 ± 41,7 |
| 55 хв | 5,0 ± 9,2 | 411,8 ± 37,8 |
| 60 хв | 2,8 ± 10,6 | 403,3 ± 42,7 |
Таблиця 12 - Динаміка зміни ЧСС у білих стережуть щурів при введенні селеніту цинку в дозі 100 мкг / кг, (M ± m, n = 6, D%)
| Вихідні дані уд / хв | 363,0 ± 52,3 | |
| Час після введення речовини | % Від вихідних даних | Абсолютні значення |
| Через 5 хв | 4,5 ± 11,9 | 379,5 ± 45,1 |
| 10 хв | 6,9 ± 12,6 | 388,0 ± 49,1 |
| 15 хв | 8,2 ± 10,1 | 392,8 ± 39,7 |
| 20 хв | 5,7 ± 6,6 | 383,8 ± 25,3 |
| 25 хв | 11,0 ± 12,6 | 402,8 ± 50,8 |
| 30 хв | 5,6 ± 15,9 | 383,3 ± 60,9 |
| 35 хв | 0,4 ± 18,7 | 364,5 ± 68,2 |
| 40 хв | 2,2 ± 15,2 | 370,8 ± 56,2 |
| 45 хв | 5,9 ± 13,4 | 384,3 ± 51,3 |
| 50 хв | 4,0 ± 11,8 | 377,7 ± 44,4 |
| 55 хв | 3,9 ± 5,7 | 377,2 ± 21,5 |
| 60 хв | 6,1 ± 7,4 | 385,0 ± 28,7 |
Висновки
Результати вивчення гострої токсичності показали, що селеніт натрію при введенні в черевну порожнину по К.К. Сидорову відноситься до другого класу токсичності.Селеніт цинку за класифікацією токсичності речовин при введенні в черевну порожнину по К.К. Сидорову відноситься до другого класу токсичності.
Селеніт натрію і селеніт цинку в дозах 30 мкг / кг, 50 мкг / кг і 100 мкг / кг достовірно знижують рівень МК у наркотизованих інтактних щурів. Зі збільшенням дози досліджуваних сполук ступінь зниження МК зменшується.
Селеніт натрію і селеніт цинку не роблять істотного впливу на артеріальний тиск та частоту серцевих скорочень стережуть білих щурів в дозі 100 мкг / кг.
Зміст
1. Скворцова, В.І. Лікування і профілактика ішемічного інсульту / шпакових В.І., Стаховська Л.В. / / Діагностика і терапія в клініці внутрішніх хвороб: лекції для практикуючих лікарів, 10 Ріс. нац. конгр. - М., 2004. - С.142-160.2. Кузнєцов, Г.П. Клінічне значення селенодефіціта у хворих з серцево-судинними захворюваннями самарського регіону та його корекції препаратом "Cелена" / Г.П. Кузнєцов, П.Л. Лебедєв / / т фіз. і клинич. фармакологія. - 2005. - Т.58, № 5. - С.26-28.
3. Демченко, І.Т. Кровопостачання бодрствующего мозку / І.Т. Демченко. - Л.: Наука, 2007. - 174 с.
4. Фізіологія ЦНС: Учеб. посібник. - Ростов н / Д: Фенікс, 2007. - 450 с.
5. Балуєва, Т.В. До питання про центральну норадренергической регуляції мозкового кровообігу / Т.В. Балуєва / / фізіолого. журн. СРСР ім. Сєченова. - 2006. - № 7. - С.913-917.
6. Анатомія людини: У 2 т. / За ред. М.Р. Сапін. - М.: Медицина, 2007. - Т.2. - 479 с.