Посилення контролю за туберкульозом в Україні Методи лабораторної діагностики туберкульозу

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
v
•
Своєчасна діагностика туберкульозу органів
дихання є важливою спільною задачею фтизіатрів і
лікарів багатьох інших спеціальностей, від
успішного виконання якої багато в чому залежать
здоров'я і благополуччя нашого суспільства. У той
же час грамотне використання сучасних
діагностичних можливостей в умовах загальної
цілком виправданої фтизіатричної настороженості
буде сприяти скороченню випадків гіпердіагностики
туберкульозу і можливих ятрогенних наслідків
невиправданої протитуберкульозної терапії.

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Виявлення та діагностика туберкульозу
Виявлення – це відбір людей, у яких
можлива наявність туберкульозу
Діагностика туберкульозу – це
встановлення або скасування
діагнозу туберкульозу у відібраних
Виявлення – організаційний
і протиепідемічний захід
Діагностика – клінічний
.

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Основа «активного методу»
Виявлення туберкульозу - це масова
перевірка всього або певної кількості
здорового населення рентгено –
флюорографічною установкою,
туберкуліновими тестами, іншими
методами,тобто, відбір можливих
випадків ТБ шляхом перевірки всіх
здорових

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Основа методу «за зверненнями»
• відбір людей, у яких можливий
туберкульоз (люди повинні звертатися
за медичною допомогою самостійно –
приходять самі)
• перевірка цих людей на туберкульоз (в
першу чергу методом бактеріоскопії, не
виключаючи інші для діагнозу методи)

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Нормативний документ, що
регламентує методи виявлення
випадків туберкульозу
Наказ МОЗ №620 від 04.09.2014
«УНІФІКОВАНИЙ КЛІНІЧНИЙ ПРОТОКОЛ
ПЕРВИННОЇ, ВТОРИННОЇ
(СПЕЦІАЛІЗОВАНОЇ) ТА ТРЕТИННОЇ
(ВИСОКОСПЕЦІАЛІЗОВАНОЇ) МЕДИЧНОЇ
ДОПОМОГИ ХВОРИМ НА ТУБЕРКУЛЬОЗ

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Задачі медичних працівників при обстеженні
хворих, які кашляють
• Зібрати якісний матеріал – мокротиння
або інший біологічний матеріал
• Вчасно доставити його в лабораторію
• Правильно заповнити направлення
• Враховувати обгрунтованість
досліджень

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Вимоги до контейнеру
• Діаметр отвору не менше 35 мм.
• Прозорий, чистий з кришкою, що закручується
• Об'єм не менше 50 мл.
• Бажано одноразовий, з матеріалу, що легко утилізується
• Можливе використання прозорого багаторазового скляного контейнера з кришкою, що закручується

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
• Тільки 40% результативності залежить від роботи лабораторії
• 60% результативності залежить від того
ЩО,
ЯК і
КОЛИ було доставлено в лабораторію

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
• ПОГАНО ЗІБРАНИЙ
ПАТОЛОГІЧНИЙ МАТЕРІАЛ НЕ
МОЖЕ БУТИ КОМПЕНСОВАНИЙ
КВАЛІФІКОВАНОЮ РОБОТОЮ
ЛАБОРАНТА

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Методи лабораторної діагностики
Прямі
виявляють етіологічний агент
-Бактеріоскопічний
-Бактеріологічний
-Молекулярно- генетичний
Непрямі
виявляють наслідки дії етіологічного агента
-Біологічний
-Імунологічний

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Бактеріоскопія мокротиння та
іншого біологічного матеріалу:
• висока вірогідність правильного діагнозу
• точно вказує на епідемічно небезпечні випадки
• дозволяє правильно встановити пріоритети лікування
• є об'єктивним критерієм при моніторингу лікування

Чутливість бактеріоскопії
Кількість КСБ, які виявляються при бактеріоскопії мазка
Кількість КСБ в 1мл мокротиння
Вірогідність отримання позитивного результату при бактеріоскопії
Більше 10 в полі зору Близько 500 000 99,95%
1-9 в полі зору
Близько 100 000 96,2%
1-9 в 10 полях зору
Близько 50 000 90%
1-9 в 100 полях зору
Близько 30 000 80%
1-2 в 300 полях зору
5 000-10 000 50%
0 в 300 полях зору
Менше 1 000
Менше 10%
WHO Office for TB Control in Ukraine

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Бактеріоскопія мазка
• переваги: надійно, просто, швидко, доступно, легко піддається стандартизації
• недоліки: неестетично, негігієнічно, небезпечно для персоналу
• чутливість: помірна, залежить від кваліфікації персоналу і якості збору мокротиння
• вартість: низька
• специфічність: висока
• ефективність: висока, можливе широке застосування.

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Культуральне дослідження мокротиння
• Культуральне дослідження дозволяє
виділити збудник і провести повну
ідентифікацію бактерій туберкульозу
• Вірогідність виявлення збудників
туберкульозу за допомогою
культурального дослідження
мокротиння набагато вища, ніж при
бактеріоскопії мазків

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Культуральне дослідження
• Щільні поживні середовища
Середовище Левенштейна-Йенсена,
Середовище Фінна
• Щільні або напіврідкі поживні
середовища на агаровій основі
• Рідкі синтетичні або напівсинтетичні
поживні середовища

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Культуральне дослідження мокротиння
Одним з найістотніших недоліків
культурального дослідження на
щільних середовищах є тривалий час
між посівом мокротиння і
отриманням результатів
Зазвичай для цього потрібно 4–6
тижнів

BACTEC
™
MGIT
™
960
• Автоматизована система для виявлення мікобактерій
• Автоматизована система для визначення лікарської чутливості
• Флюоресценція BBL® MGIT™
• Aвтоматизована і комп'ютеризована система
• Велике робоче навантаження
Інші методи для діагностики ТБ
(прискорена діагностика)

22
Тривалість визначення чутливості до лікарських
препаратів за допомогою автоматизованої системи
BACTEC MGIT 960
Зразок
6-8 тижнів
3 тижні
Середовище
Л-Й
BACTEC 960
Завись
культури
Рифампіцин
Ізоніазид
Контроль
Етамбутол
Стрептоміцин
Культу-
ральне
виявлення
MБT
Визначення
МЧ
14 днів
Середовище
Л-Й

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Безперечну практичну значимість
мають молекулярно-генетичні
методи для доказу наявності МБТ
в біологічних рідинах і тканинах
при позалегеневих і
олігобацилярних формах
туберкульозу

Посилення контролю за туберкульозом в Україні
Застосування молекулярно-генетичних технологій
• Виявлення ДНК мікобактерій туберкульозу у зразках (культурах)
• Видова ідентифікація
• Виявлення ДНК з мутаціями, що викликають стійкість до протитуберкульозних препаратів

GenoType® MTBDR
Просто
Швидко
Безпечно
GenoType®MTBDR (Hain Lifescience,
Nehren, Germany) дозволяє
ідентифікувати МБТ-комплекс і
визначати їх резистентність до
рифампіцину (rpoB gene) і /або
ізоніазиду (katG gene) у культурі або
безпосередньо у первинному
матеріалі (КСБ+ мокроті)

Тест Xpert MTB/RIF, призначений для використання з системою GeneXpert®, є напівкількісною гніздовою полімеразною ланцюговою реакцією
(ПЛР) у реальному часі in vitro, що проводиться з метою виявлення:
Xpert MTB/RIF
1) ДНК Mycobacterium tuberculosis в зразках мокротиння або концентрованих осадах мокротиння
2) Мутацій резистентності до рифампіцину гену rpoB в зразках, отриманих від пацієнтів з ризиком резистентності до даного препарату

Діагностичний ланцюг
Зразок
Люмінес-
центна
мікроскопія
Середовища
Левенштейна-Йенсена
або Фінна-2
BACTEC MGIT 960
ідентифікація
NALC /NaOH (MycoPrep)
центрифугування
Визначення чутливості
мікобактерій до лікарських
препаратів
Молекулярно-
генет. дослідж.
ПЛР аналіз Rmp -
резистентності