Цитологічні дослідження при захворюваннях різних органів і систем

[ виправити ] текст може містити помилки, будь ласка перевіряйте перш ніж використовувати.

скачати

Цитологічні дослідження при захворюваннях різних органів і систем


Цитологія - наука про клітину
Наука про клітці називається цитологією (грец. «цітос» - клітина, «логос» - наука). Предмет цитології - клітини багатоклітинних тварин і рослин, а також одноклітинних організмів, до яких відносяться бактерії, найпростіші і одноклітинні водорості. Цитологія вивчає будову і хімічний склад клітин, функції внутрішньоклітинних структур, функції клітин в організмі тварин і рослин, розмноження та розвиток клітин, пристосування клітин до умов навколишнього середовища. Сучасна цитологія - наука комплексна. Вона має найтісніші зв'язки з іншими біологічними науками, наприклад з ботанікою, зоологією, фізіологією, вченням про еволюцію органічного світу, а також з молекулярною біологією, хімією, фізикою, математикою. Цитологія - одне з відносно молодих біологічних наук, її вік близько 100 років. Вік же терміна "клітина" налічує понад 300 років. Вперше цю назву в середині XVII ст. застосував Р. Гук. Розглядаючи тонкий зріз пробки за допомогою мікроскопа, Гук побачив, що пробка складається з осередків - клітин.
У середині XIX століття на основі вже численних знання клітині Т. Шванн сформулював клітинну теорію (1838). Він узагальнив були знання про клітині і показав, що клітина представляє основну одиницю будови всіх живих організмів, що клітини тварин і рослин подібні за своєю будовою. Ці положення стали найважливішими доказами єдності походження всіх живих організмів, єдність всього органічного світу. Т. Шван вніс у науку правильне розуміння клітини як самостійної одиниці життя, найменшої одиниці живого: поза клітини немає життя.
Вивчення хімічної організації клітини дійшли висновку, що саме хімічні процеси лежать в основі її життя, що клітини всіх організмів подібні за хімічним складом, вони однотипно протікають основні процеси обміну речовин. Дані про подібність хімічного складу клітин ще раз підтвердили єдність всього органічного
Сучасна клітинна теорія включає такі положення: клітина основна одиниця будови і розвитку всіх живих організмів, найменша одиниця живого; клітини всіх одноклітинних і багатоклітинних організмів подібні (гомологічні) за своєю будовою, хімічним складом, основним проявам життєдіяльності і обміну речовин; розмноження клітин відбувається шляхом їх ділення, і кожна нова клітина утворюється в результаті розподілу вихідної (материнської) клітини; у складних багатоклітинних організмах клітини спеціалізовані за виконуваної ними функції і утворюють тканини, з тканин складаються органи, які тісно пов'язані між собою і підпорядковані нервовим і гуморальним систем регуляції.
Дослідження клітини мають велике значення для розгадки захворювань. Саме в клітинах починають розвиватися патологічні зміни, що призводять до виникнення захворювань. Щоб зрозуміти роль клітин у розвитку захворювань, наведемо кілька прикладів. Одне з серйозних захворювань людини - цукровий діабет. Причина цього захворювання - недостатня діяльність групи клітин підшлункової залози, що виробляють гормон інсулін, який бере участь в регуляції цукрового обміну організму. Злоякісні зміни, що призводять до розвитку ракових пухлин, виникають на рівні клітин. Збудники кокцидіозу - небезпечного захворювання кроликів, курей, гусей і качок - паразитичні найпростіші - кокцидии проникають в клітини кишкового епітелію і печінки, ростуть і розмножуються в них, повністю порушують обмін речовин, а потім руйнують ці клітини. У хворих кокцидіозом тварин сильно порушується діяльність травної системи, і при відсутності лікування тварини гинуть. Ось чому вивчення будови, хімічного складу, обміну речовин і всіх проявів життєдіяльності клітин необхідно не тільки в біології, але й у медицині та ветеринарії.
Вивчення клітин різноманітних одноклітинних і багатоклітинних організмів за допомогою светооптического і електронного мікроскопів показало, що за своєю будовою вони поділяються на дві групи. Одну групу становлять бактерії та синьо-зелені водорості. Ці організми мають найбільш просту будову клітин. Їх називають доеденнимі (прокаріоти), так як у них немає оформленого ядра (грец. «картон» - ядро) і немає багатьох структур, які називають органоидами. Іншу групу становлять усі інші організми: від одноклітинних зелених водоростей і найпростіших до вищих квіткових рослин, ссавців, у тому числі і людини. Вони мають складно влаштовані клітини, які називають ядерними (еукаріотичних). Ці клітини мають ядро ​​і органели, що виконують специфічні функції.
Особливу, неклеточную форму життя становлять віруси, вивченням яких займається вірусологія.
Будова і функції оболонки клітки
Клітка будь-якого організму, являє собою цілісну живу систему. Вона складається з трьох нерозривно пов'язаних між собою частин: оболонки, цитоплазми і ядра. Оболонка клітка здійснює безпосередню взаємодію із зовнішнім середовищем і взаємодію із сусідніми клітинами (у багатоклітинних організмах).
Оболонка клітин. Оболонка кліток має складну будову. Вона складається із зовнішнього шару і розташованої під ним плазматичної мембрани. Клітини тварин і рослин розрізняються по будові їх зовнішнього шару. У рослин, а також у бактерій, синьо-зелених водоростей і грибів на поверхні клітин розташована щільна оболонка, чи клітинна стінка. У більшості рослин вона складається з клітковини. Клітинна стінка грає винятково важливу роль: вона являє собою зовнішній каркас, захисну оболонку, забезпечує тургор рослинних клітин: через клітинну стінку проходить вода, солі, молекули багатьох органічних речовин.
Зовнішній шар поверхні кліток тварин на відміну від клітинних стінок рослин дуже тонкий, еластичний. Він не видний у світловий мікроскоп і складається з різноманітних полісахаридів і білків. Поверхневий шар клітин тварин отримав назву глікокалікс.
Гликокаликс виконує насамперед функцію безпосереднього зв'язку кліток тварин із зовнішнім середовищем, із усіма навколишніми її речовинами. Маючи незначну товщину (менше 1 мкм), зовнішній шар клітки тварин не виконує опорної ролі, яка властива клітинним стінкам рослин. Освіта глікокаліксу, так само як і клітинних стінок рослин, відбувається завдяки життєдіяльності самих кліток.
Плазматична мембрана. Під гликокаликсом і клітинною стінкою рослин розташована плазматична мембрана (лат. «мембрана» - шкірка, плівка), що межує безпосередньо з цитоплазмою. Товщина плазматичної мембрани близько 10 нм, вивчення її будівлі і функцій можливо тільки за допомогою електронного мікроскопа.
До складу плазматичної мембрани входять білки і ліпіди. Вони упорядковано розташовані і з'єднані один з одним хімічними взаємодіями. За сучасними уявленнями молекули ліпідів у плазматичній мембрані розташовані в два ряди й утворять суцільний шар. Молекули білків не утворять суцільного шару, вони розташовуються в шарі ліпідів, занурюючись у нього на різну глибину.
Молекули білка і ліпідів рухливі, що забезпечує динамічність плазматичної мембрани.
Плазматична мембрана виконує багато важливих функцій, від яких углядять життєдіяльність клітин. Одна з таких функцій полягає в тому, що вона утворює бар'єр, отграничивающий внутрішній вміст клітини від зовнішнього середовища. Але між клітинами і зовнішнім середовищем постійно відбувається обмін речовин. З зовнішнього середовища в клітку надходить вода, різноманітні солі у формі окремих іонів, неорганічні й органічні молекули. Вони проникають у клітину через дуже тонкі канали плазматичної мембрани. У зовнішнє середовище виводяться продукти, утворені в клітці. Транспорт речовин - одна з головних функцій плазматичної мембрани. Через плазматичну мембрану з кліті виводяться продукти обміну, а також речовини, синтезовані в клітці. До числа їх відносяться різноманітні білки, вуглеводи, гормони, які виробляються у клітинах різних залоз і виводяться в позаклітинне середовище у формі дрібних крапель.
Клітки, що утворять у багатоклітинних тварин різноманітні тканини (епітеліальну, м'язову і ін), з'єднуються один з одним плазматичною мембраною. У місцях з'єднання двох клітин мембрана кожної з них може утворювати складки або вирости, які дають сполукам особливу міцність.
З'єднання клітин рослин забезпечується шляхом утворення тонких каналів, які заповнені цитоплазмою й обмежені плазматичною мембраною. За таким каналам, які пройшли через клітинні оболонки, з однієї клітини до іншої надходять поживні речовини, іони, вуглеводи та інші сполуки.
На поверхні багатьох кліток тварин, наприклад, різних епітеліїв, знаходяться дуже дрібні тонкі вирости цитоплазми, покриті плазматичною мембраною, мікроворсинки. Найбільша кількість мікроворсинок знаходиться на поверхні клітин кишечника, де відбувається інтенсивне переварювання і всмоктування перевареної їжі.
Великі молекули органічних речовин, наприклад білків і полісахаридів, частки їжі, бактерії надходять у клітку шляхом фагоцита (грец. "фагео" - пожирати). У фагоците участь приймає плазматична мембрана. У тому місці, де поверхня клітки стикається із часткою будь-якого щільного речовини, мембрана прогинається, утворить поглиблення й оточує частку, що у "мембранної упаковці" занурюється всередину клітини. Утворюється травна вакуоль і в ній переварюються надійшли в клітину органічні речовини.
Відмежована від зовнішнього середовища плазматичною мембраною, цитоплазма являє собою внутрішню напіврідку середу клітин. У цитоплазму еукаріотичних клітин розташовуються ядро ​​і різні органели. Ядро розташовується в центральній частині цитоплазми. У ній зосереджені і різноманітні включення - продукти клітинної діяльності, вакуолі, а також дрібні трубочки і нитки, що формують скелет клітини. У складі основної речовини цитоплазми переважають білки. У цитоплазмі протікають основні процеси обміну речовин, вона об'єднує в одне ціле ядро ​​і всі органоїди, забезпечує їх взаємодію, діяльність клітини як єдиної цілісної живої системи.
Уся внутрішня зона цитоплазми заповнена численними дрібними каналами і порожнинами, стінки яких являють собою мембрани, подібні по своїй структурі з плазматичною мембраною. Ці канали гілкуються, з'єднуються один з одним і утворюють мережу, яка дістала назву ендоплазматичної мережі.
Ендоплазматична мережа неоднорідна за своєю будовою. Відомі два її типи - гранулярная і гладка. На мембранах каналів і порожнин гранулярной мережі розташовується безліч дрібних округлих тілець - рибосом, які надають мембран шорсткий вигляд. Мембрани гладкої ендоплазматичної мережі не несуть рибосом на своїй поверхні.
Ендоплазматична мережа виконує багато різноманітних функцій. Основна функція гранулярной ендоплазматичної мережі - участь у синтезі білка, який здійснюється в рибосомах.
На мембранах гладкої ендоплазматичної мережі відбувається синтез ліпідів і вуглеводів. Всі ці продукти синтезу накопичуються в каналах і порожнинах, а потім транспортуються до різних органоидам клітини, де споживаються чи накопичуються в цитоплазмі як клітинних включень. Ендоплазматична мережа зв'язує між собою основні органели клітини.
Рибосоми виявлені в клітках всіх організмів. Це мікроскопічні тільця округлої форми діаметром 15 - 20 нм. Кожна рибосома складається з двох неоднакових по розмірах часток, малої і великої ендоплазматичної мережі, а потім транспортуються до органоидам і ділянкам клітини, де вони споживаються. Ендоплазматична мережа і рибосоми, розташовані на її мембранах, являють собою єдиний апарат біосинтезу і транспортування білків.
У цитоплазмі більшості кліток тварин і рослин містяться дрібні тільця (0, 2 - 7 мкм) - мітохондрії (грец. «митос» - нитка, «хондріон» - зерно, гранула).
Мітохондрії добре видні у світловий мікроскоп, за допомогою якого можна розглянути їхню форму, розташування, порахувати кількість. Внутрішня будова мітохондрій вивчено за допомогою електронного мікроскопа. Оболонка мітохондрії складається з двох мембран - зовнішньої і внутрішньої. Зовнішня мембрана гладка, вона утворює ніяких складок і виростів. Внутрішня мембрана, навпроти, утворить численні складки, які спрямовані в порожнину мітохондрії. Складки внутрішньої мембрани називають кристами (лат. «кріста» - гребінь, виріст) Число крист неоднаково в мітохондріях різних кліток. Їх може бути від декількох десятків до декількох сотень, причому особливо багато крист у мітохондріях активно функціонуючих кліток, наприклад м'язових.
Мітохондрії називають «силовими станціями» кліток, так як їх основна функція синтез аденозинтрифосфорної кислоти (АТФ). Ця кислота синтезується в мітохондріях кліток всіх організмів і являє собою універсальне джерело енергії, необхідний для здійснення процесів життєдіяльності клітки і цілого організму.
Нові мітохондрії утворяться розподілом вже існуючих у клітці мітохондрій.
У цитоплазмі клітин усіх рослин знаходяться пластиди. У клітинах тварин пластиди відсутні. Розрізняють три основних типи пластид: зелені - хлоропласти, червоні, помаранчеві та жовті - хромопласти; безбарвні - лейкопласти.
Ці органели містяться в клітках листів і інших зелених органів рослин, а також у різноманітних водоростей. Розміри хлоропластів 4 - 6 мкм, найбільш часто вони мають овальну форму. У вищих рослин в одній клітці звичайно буває кілька десятків хлоропластів. Зелений колір хлоропластів залежить від змісту в них пігменту хлорофілу. Xлоропласт - основний органоїд клітин рослин, в якому відбувається фотосинтез, тобто утворення органічних речовин (вуглеводів) з неорганічних (СО2 і Н2О) при використанні енергії сонячного світла.
За будовою хлоропласти подібні з мітохондріями. Від цитоплазми хлоропласт відмежований двома мембранами - зовнішньої і внутрішньої. Зовнішня мембрана гладка, без складок і виростів, а внутрішня утворить багато складчастих виростів, спрямованих всередину хлоропласта. Тому всередині хлоропласта зосереджена велика кількість мембран, що особливі структури - грани. Вони складені на зразок стопки монет.
У мембранах гран розташовуються молекули хлорофілу, тому саме тут відбувається фотосинтез. У хлоропластах синтезується й АТФ. Між внутрішніми мембранами хлоропласта містяться ДНК, РНК і рибосоми. Отже, в хлоропластах, так само як і в мітохондріях, відбувається синтез білка, необхідного для діяльності цих органоїдів. Хлоропласти розмножуються поділом.
Хромопласти знаходяться в цитоплазмі клітин різних частин рослин: у квітках, плодах, стеблах, листі. Присутністю хромопластів пояснюється жовта, помаранчева і червоне забарвлення віночків квіток, плодів, осінніх листів.
Лейкопласти знаходяться в цитоплазмі клітин нефарбованих частин рослин, наприклад у стеблах, коренях, бульбах. Форма лейкопластов різноманітна.
Хлоропласти, хромопласти і лейкопласти здатні клітка взаємному переходу. Так при дозріванні плодів або зміну забарвлення листя восени хлоропласти перетворюються в хромопласти, а лейкопласти можуть перетворюватися в хлоропласти, наприклад, при позеленении бульб картоплі.
У багатьох клітинах тварин, наприклад, в нервових, він має форму складної мережі, розташованої навколо ядра. У клітинах рослин і найпростіших апарат Гольджі представлений окремими тільцями серповидной чи палочковидной форми. Будова цього органоида подібно в клітках рослинних і тваринних організмів, незважаючи на розмаїтість його форми.
До складу апарату Гольджі входять: порожнини, обмежені мембранами і розташовані групами (по 5 - 10); великі і дрібні пухирці, розташовані на кінцях порожнин. Всі ці елементи складають єдиний комплекс.
Апарат Гольджі виконує багато важливих функцій. По каналах ендоплазматичної мережі до нього транспортуються продукти синтетичної діяльності клітини - білки, вуглеводи і жири. Всі ці речовини спочатку накопичуються, а потім у вигляді великих і дрібних пухирців надходять у цитоплазму і або використовуються в самій клітці в процесі її життєдіяльності, або виводяться з неї і використовуються в організмі. Наприклад, в клітинах підшлункової залози ссавців синтезуються травні ферменти, які накопичуються в порожнинах органоида. Потім утворюються бульбашки, наповнені ферментами. Вони виводяться з кліток у протоку підшлункової залози, звідки перетікають у порожнину кишечника. Ще одна важлива функція цього органоида полягає в тому, що на його мембранах відбувається синтез жирів і вуглеводів (полісахаридів), які використовуються в клітці і які входять до складу мембран. Завдяки діяльності апарату Гольджі відбуваються оновлення і зростання плазматичної мембрани.
Лізосоми представляють собою невеликі округлі тільця. Від Цитоплазми кожна лізосома відмежована мембраною. Усередині лізосоми знаходяться ферменти, що розщеплюють білки, жири, вуглеводи, нуклеїнові кислоти.
До харчової частинки, що надійшла в цитоплазму, підходять лізосоми, зливаються з нею, і утворюється одна травна вакуоль, усередині якої знаходиться харчова частка, оточена ферментами лізосом. Речовини, що утворилися в результаті переварювання харчової частки, надходять у цитоплазму і використовуються кліткою.
Володіючи здатністю до активного переварювання харчових речовин, лізосоми беруть участь у видаленні відмираючих у процесі життєдіяльності частин клітин, цілих клітин і органів. Утворення нових лізосом відбувається в клітці постійно. Ферменти, що містяться в лізосомах, як і інші білки, синтезуються на рибосомах цитоплазми. Потім ці ферменти надходять по каналах ендоплазматичної мережі до апарата Гольджі, в порожнинах якого формуються лізосоми. У такому вигляді лізосоми надходять у цитоплазму.
У клітинах тварин поблизу ядра знаходиться органоїд, який називають клітинним центром. Основну частину клітинного центру складають два маленьких тільця - центріолі, розташовані в невеликій ділянці ущільненої цитоплазми. Кожна центриоль має форму циліндра довжиною до 1 мкм. Центріолі грають важливу роль при поділі клітини; вони беруть участь в утворенні веретена поділу.
До клітинних включень відносяться вуглеводи, жири і білки. Всі ці речовини накопичуються в цитоплазмі клітки у вигляді крапель і зерен різної величини і форми. Вони періодично синтезуються в клітці і використовуються в процесі обміну речовин.
Кожна клітина одноклітинних і багатоклітинних тварин, а також рослин містить ядро. Форма і розміри ядра залежать від форми і розміру кліток. У більшості клітин є одне ядро, і такі клітини називають одноядерними. Існують також клітини з двома, трьома, з декількома десятками і навіть сотнями ядер. Це багатоядерні клітини.
Ядерний сік - полужидкое речовина, яка знаходиться під ядерною оболонкою і представляє внутрішнє середовище ядра.
Хімічний склад клітини. Неорганічні речовини Атомний і молекулярний склад клітки. У мікроскопічної клітині міститься кілька тисяч речовин, які беруть участь у різноманітних хімічних реакціях. Хімічні процеси, що протікають в клітині, - одна з основних умов її життя, розвитку та функціонування.
Всі клітини тварин і рослинних організмів, а також мікроорганізмів подібні по хімічному складу, що свідчить про єдність органічного світу.

Цитологічні дослідження при захворюваннях різних органів і систем

Цитологічні дослідження в гінекології займають особливе місце. Розроблена ціла система цитологічного аналізу, що дозволяє встановити ряд дуже цінних показників: гормональний статус, ступінь чистоти і характер флори, наявність інфікування трихомонадами, гарднерелами, хламідіями і, що дуже важливо, можливість діагностування передпухлинних і пухлинних поразок. Правильна оцінка цитологічних даних у цих випадках залежить від правильної техніки приготування вагінальних мазків, в оцінці яких необхідно дотримуватися певних структуpних найменувань та класифікації згідно з сучасними даними.
У направленні на дослідження повинні бути відображені такі дані:
1. П.І.Б., вік, професія.
2. Вік початку місячних, кількість абортів і пологів.
3. Скарги хворої.
4. Характер менструального циклу і дата останнього.
5. Застосовувані протизаплідні засоби.
6. Дата дослідження.

Техніка приготування вагінальних мазків

1. Матеріал для дослідження треба брати з верхньобічного зводу піхви.
2. Матеріал наноситься на скло і розмазується.
3. Перед фарбуванням мазок повинен бути підсушений або зафіксований в рідині Никифорова.
4. Підрахунок клітинних елементів повинен обчислюватися в кількох полях зору мазка.
Однією з найбільш інформативних є забарвлення препаратів за Папаніколау.

Особливості будови слизової оболонки жіночого статевого тракту:

1. Слизова оболонка піхвової частини матки вистелена багатошаровим плоским епітелієм, що складається з базального, парабазального, проміжного та функціонального (поверхневого) шарів.
2. Слизова оболонка цервікального каналу покрита високим призматичним епітелієм з базальним поширенням ядер, цитоплазма клітин містить слиз. Під призматичним епітелієм нерідко виявляються резервні (камбіальні) клітинні елементи. Два види епітелію: багатошаровий, плоский і призматичний мають стик в області зовнішнього маточного зіва.
3. Багатошаровий плоский епітелій вагінальної частини змінюється від фаз оваріально-менструального циклу; в клімактеричному періоді в менопаузі спостерігається його атрофія.
Всі ці зміни епітелію в залежності від фаз оваріально-менструального циклу відбиваються і на цитограмах.
У мазках клітини функціонального шару мають полігональну, рідше округлу або овальну форму з чіткими кордонами. Діаметр їх від 40 до 50 мкм. Ядра маленькі, пікнотичне, інтенсивно забарвлені, діаметром до 6 мкм. Структура хроматину не визначається. Ядерно-цитоплазматичне співвідношення дорівнює 1:10. Цитоплазма широка, світла, містить зерна глікогену. Клітини функціонального шару в мазках розташовуються у вигляді шарів і полів. Наявність їх у великій кількості в мазках є відображенням естрогенної активності.
Клітини проміжного шару багатошарового плоского епітелію менше за розмірами клітин функціонального шару. Діаметр їх 25-30 мкм. Ядра пузирьковідние, округлі або овальні з добре вираженим тонко петельна хроматином. Цитоплазма базофильна, містить глікоген.
Поява значної кількості проміжних клітин у мазках відзначається на початку фолликулиновой і під час лютеїнової фаз, в післяпологовому періоді, менопаузі, будучи відображенням недостатності естрогенних гормонів.
Парабазальні клітини в мазках мають округлу, овальну, іноді полігональну форму з чіткими кордонами. Розміри їх різні і коливаються в межах 12-30 мкм. Ядра як і в клітинах проміжного шару з ніжним тонкопетлістим або дрібнозернистим хроматином, іноді видно ядерце. Цитоплазма різко базофильна, глікоген виявляється не завжди. Парабазальні клітини можуть виявлятися в мазках з піхви під час менструації в період менопаузи.
Базальні клітини багатошарового плоского епітелію дрібні, ядерно-цитоплазматичне, співвідношення дорівнює 1:3. Ядра округлі, хроматин дрібнозернистий, містить 1-2 ядерця. Цитоплазма у вигляді вузького обідка, різко базофильная, глікоген в клітинах не міститься. У мазках здорових жінок базальні клітини з'являються тільки в період менопаузи.
Поява в мазках у значному числі парабазальних і базальних клітин говорить про будь-які патологічному процесі з боку шийки матки.
У мазках з піхви поряд з епітеліальними клітинами можуть бути й інші елементи, зокрема, еритроцити, лейкоцити. Особливо багато лейкоцитів виявляється після менструації. Вони можуть з'являтися у жінок в період менопаузи. У мазках на стадії менструації нерідко виявляються гістіоцити. Епітеліальні клітини слизової оболонки цервікального каналу різної величини розташовані ізольовано або у вигляді груп, железістоподобних структур, форма призматична, ядра овальної або округлої форми, хроматин ніжний дрібнодисперсний, цитоплазма слабо-базофильная, в апікальній частині містяться зерна слиз. Поряд з секреторним призматичним епітелієм зустрічаються вії добре виражені на апікальній поверхні. У ряді випадків епітеліальні клітини в мазках розташовуються не вздовж поздовжньої осі тіла клітини, а поперечний, клітини при цьому виглядають округлими або полігональними з центральним розташуванням ядра. У мазках можуть виявлятися і резервні клітини призматичного епітелію. Резервні клітини округлої форми, убогої блідо-окрашивающиеся цитоплазмою і круглим, займає майже всю цитоплазму ядром. Хроматин ядра погано помітний.
При дослідженні мазків, узятих у жінок при секреторній фазі циклу, під час вагітності і при дисгормональних зміни можливе виявлення метаплазованого багатошарового плоского епітелію. Клітинні елементи схожі на клітини багатошарового плоского епітелію, але цитоплазма містить або слиз, або і глікоген і слиз.
При вагітності в мазках поряд з подібного роду епітеліальними елементами відзначаються нерідко і децидуальної клітини.

Цитологічні індекси в гормональної оцінці вагінальних мазків

Підрахунок клітинних елементів мазка і подання морфологічного складу його у вигляді відповідних індексів дозволяють дати більш достовірну оцінку спостерігається картини для цілей гормональної цітодіагностікі.
Індекс дозрівання (ІС)
Індекс дозрівання (ІС) являє собою чисельне співвідношення всіх парабазальних, проміжних і поверхневих клітин у вагінальному мазку, виражене у відсотках.
ІС визначається при підрахунку 100-200 клітин в мазку не менше ніж в 5-8 полях зору, тому що 1-2 поля зору можуть дати неправильну інформацію.
ІС позначається у вигляді формули, де зліва записується кількість парабазальних клітин, посередині - проміжних, праворуч - поверхневих.
У разі відсутності будь-якого виду клітин на їх місці ставиться нуль.
Приклади ІС
1. Виражена атрофія - в мазках тільки парабазальние клітини ІС 100/0/0;
2. Помірна атрофія - є тільки парабазальние і проміжні клітини ІС 70/30/0 або 50/50/0;
3. Помірна проліферація - парабазальние відсутні, переважають проміжні ІС 0/80/20, посилення проліферативної активності може бути позначено стрілкою ІС = 0/50/50. 4. Виражена проліферація - парабазальние клітки відсутні, в мазку переважають поверхневі клітини ІС = 0/20/80 або ІС = 0/0/100, якщо є зменшення проліферативної активності, може бути зазначено так ІС = 0/20/80. Отже, ІС у відповідь окрім цифр може бути охарактеризований як зрушення праворуч або ліворуч. ІС дуже часто характеризує стан епітелію при гормональному лікуванні. Однак за допомогою одного лише ІС не можна розкрити специфіку дії кожного з гормонів, оскільки визначення ІС грунтується тільки на морфологічних особливостях клітинного складу вагінального мазка.
Каріопікнотіческій індекс - КПІ
Каріопікнотіческій індекс являє собою відсоткове відношення всіх відшарувались зрілих поверхневих клітин з пікнотичне ядрами до клітин, що містить везикулярні ядра з діаметром більше 6 мкм. У процесі дозрівання клітин з ядром відбувається його зморщування, тобто каріопікноз.
При нормальній реакції вагіни КПІ змінюється в строгій залежності від сили гормонального впливу. Для підбору відповідної дози необхідний підрахунок КПІ.
У жінок репродуктивного віку за допомогою підрахунку КПІ можна визначити характер менструального циклу. Високі ступеня КПІ в дитячому віці і в менопаузі говорять про патологічну проліферації.
Еозинофільний індекс ЕІ
Являє собою відсоткове відношення всіх зрілих відокремилися поверхневих клітин з еозинофільної забарвленням цитоплазми до зрілим поверхневим кліткам з базофільною забарвленням цитоплазми. Для диференціальної забарвлення мазків вагінального епітелію застосовуються різні методи.
Чим сильніше естрогенна стимуляція, тим більше з'являється в мазках поверхневих еозинофільної-офарблюються клітин.
Під час нормального менструального циклу найбільше число еозинофільних поверхневих клітин у мазках спостерігається в середню фоллікуліновую фазу.
Естрогени впливають на синтез РHК, тому він дуже коливається протягом життя у жінок.
Числовий індекс дозрівання
Являє собою суму числових значень кожного виду клітин, що є в мазку. Для цього кожен вид клітин епітелію умовно позначається цифровий величиною. Поверхневі клітини еозинофільні - 1,0. Базофільні - 0,8.
Великі проміжні клітини - 0,6.
Малі проміжні клітини - 0,5.
Парабазальні - 0,0.
При підрахунку числового ІС мазок повинен включати тільки вільно відокремилися клітини з нормальною морфологією. Підраховують в середньому 200 клітин і число кожного виду клітин множать на відповідне числове значення. Отримана сума характеризує мазок. Таким чином, мазок, який містить лише парабазальние клітини, буде мати показник дозрівання, рівний нулю. Чим вище ступінь дозрівання епітелію, тим більше-в мазках клітин з високим числовим індексом і тим вищою буде загальна сума, отримана при підрахунку клітинного складу мазка.
Індекс складчастості
Представляє відношення всіх складчастих зрілих поверхневих клітин до числа плоских зрілих поверхневих клітин. Скручування або згортання клітин проявляється головним чином при прогестероновою стимуляції. Клітини виглядають у вигляді скрученого або складеного у вигляді конверта листа. Він може бути виражений у відсотках. Відношення загального числа складчастих поверхневих клітин до числа плоских не згорнуті клітин.
Індекс скупченості або угрупування клітин
Індекс скупченості - це скупчення зрілих клітин від 4-х і більше у відношенні до зрілим кліткам, розташованим окремо. Він також відображає прогестеронові дію на піхвовий епітелій. Його описують по 3-х бальною системою; виражена скупченість - III (+++), помірна - II (++), слабка - (I) (+).
Індекс поверхневих клітин
Являє собою відношення всіх зрілих поверхневих клітин до загальної кількості всіх інших відокремилися клітин. Цей індекс мало показовий. Всі ці індекси можуть бути ефективні тільки в світлі клінічних даних і при врахуванні інших тестів функціональної діагностики і лише в цьому випадку може бути зроблена правильна оцінка мазка.
Жоден з перерахованих вище індексів не може дати вичерпну інформацію і ні один не може мати перевагу перед іншими. Кожен індекс призначений для певної мети. Так, ІС відображає ступінь проліферації або атрофії, за допомогою ЕІ і КПІ позначаються ступінь проліферації. Якщо мова йде про гормональний лікуванні або про порушення менструального циклу в репродуктивному періоді, ЕІ і КПІ доповнюють індекс дозрівання.
Індекс згортання і складчастості інформує то наявність прогестеронового впливу, але вони дають уявлення про нього на тлі динаміки індексу дозрівання і динаміки змін ЕІ і КПІ. Якщо мова йде про ізольованому дії естрогенів, можна обмежитися трьома індексами - дозрівання, еозинофільні і каріопікнотіческій.
Однак іноді таке становище з гормонами, що слід віддавати перевагу лише одному індексу.
Так при вагітності ЕІ є більш надійним ніж КПІ, так як підвищення одного КПІ при низьких рівнях ЕІ ще не свідчить про поганий прогноз вагітності.

Типи клітинної реакції з урахуванням цитологічних індексів

I. Ступінь проліферації (II-I). У мазках переважають проміжні клітини (до 90%) і (10%) поверхневі клітини з великими ядрами базофільних тонів, трохи лейкоцитів, це характерно для перших днів циклу.
II. Ступінь проліферації (II-II). У мазках однакову кількість поверхневих і проміжних клітин КПІ коливається від 1 до 30%, ЕІ - від 1 до 20% Такі мазки зустрічаються в ранню фоллікуліновую фазу при нормі.
III. Ступінь проліферації (II-III). У мазках переважають поверхневі клітини ЕІ від 20 до 50%. КПІ від 30 до 50% зустрічаються в середню фоллікуліновую фазу.
IV. Ступінь проліферації (II-IV). Переважають поверхневі роздільно розташовані клітини чіткі в цитоплазмі зернистість ЕІ - від 50 до 70%; КПІ від 50 до 80, немає лейкоцитів, багато паличок Дедерлейна. Найчастіше такі мазки в період овуляції можуть бути і в період 11 -15, дня.
V. Ступінь проліферації (II-V). У мазках тільки поверхневі клітини великих розмірів з чіткими контурами, розрізнено ЕІ від 70% до 100%, КПІ від 80 до 100% Мазки тип II-V в нормі не зустрічаються. Вони говорять про надмірну естрогенної стимуляції. Вони частіше у жінок з дисфункціональними матковими кровотечами і при гормонопродуцірующіх пухлинах яєчників.

Цитологічна картина прогестероновою стимуляції

Одним з ознакою прогестероновою стимуляції є закрученості країв клітин, як поверхневого, так і проміжного шару.
I ст. лютеїнової або прогестероновою стимуляції (Л-I). У мазках поверхневі і проміжні клітини в рівних кількостях розташовані групами. Поверхневі клітини іноді мають загорнуті краю. Ці мазки зустрічаються від 16 до 20 дня при цьому ЕІ і КПІ досить високі 50-60%
II ст. прогестероновою стимуляції (Л-II). В основному проміжні клітини чіткі, зустрічаються поверхневі клітини з закрученими краями, лейкоцити і цитологія в № спостерігаються в період від 20 до 25 для циклів.
III ст. прогестероновою стимуляції. (Л-III). Дрібні проміжні клітини без чітких контурів, зустрічаються лейкоцити. Такі препарати свідчать про масивну десквамації клітин піхвового епітелію і спостерігаються в період від 25 до 28 дня нормального менструального циклу.

Цитологічний характер атрофії вагінального епітелію.

Ступінь атрофії залежить від наявності клітин з глибоких шарів.
I ст. атрофії (А-I). В основному, проміжні клітини окремі поверхневі до 10% парабазальних і базальних. У перші роки менопаузи вони частіше зустрічаються і при вторинній аменореї (мазки змішаного типу).
II ст. атрофії (А-II) Переважають парабазальние клітини, поверхневих клітин немає. Проміжні клітини від 0 до 50%; лейкоцити.
III ст. атрофії (A-III) Парабазальні клітини і лейкоцити.
Ці мазки спостерігаються при первинній аменореї в глибокій менопаузі.

Визначення ступеня чистоти піхвового вмісту

Для визначення грампозитивної палички Дедерлейна вагінальні мазки забарвлюються за Грамом.
Паличка Дедерлейна добре розвивається в різко кислому середовищі (pH 4,0 - 4,7). Піхвова середовище в основному залежить від концентрації глікогену в клітинах піхви, а зміст його залежить від функціонального стану яєчників. Продуктом розщеплення глікогену є молочна кислота, яка являє собою гарну живильне середовище для піхвової палички. З іншого боку кокковая флора відповідає низькому вмісту глікогену і зрушення pH піхвового вмісту в лужний бік.
Розрізняють чотири ступені чистоти піхви.
Перша ступінь. Реакція піхвового вмісту кисла (pH 4,0-4,5). У мазках клітини епітелію і паличка Дедерлейна.
Друга ступінь. Реакція вмісту піхви кисла (pH 5,0-5,5). Мазок містить невелику кількість лейкоцитів і палички Дедерлейна, зустрічаються грампозитивні диплококи.
Третя ступінь. Велика кількість лейкоцитів, клітин епітелію. Різноманітна кокковая флора. Палички Дедерлейна - незначна кількість. Реакція вмісту піхви слабо кисла або лужна (pH 6,7-7,2).
Четверта ступінь. Клітини епітелію, багато лейкоцитів, різноманітна гноеродная флора. Паличка Дедерлейна відсутня. Реакція лужна (pH вище 7,2).
При оцінці даного показника необхідно пам'ятати, що картина відповідна I і II ступеня - ознака здорового стану піхви. Наявність картини III і IV ступеня свідчать про запальний процес в піхві.
При неспецифічному запаленні в мазку частіше переважають нейрофільние лейкоцити; підгострі і хронічні запальні процеси супроводжуються появою лімфоцитів, гістіоцитів макрофагів, включаючи багатоядерні. Виявляються також реактивні зміни епітеліальних клітин, наприклад, збільшення ядер.
При туберкульозі виявляють епітеліоїдні клітини, клітини Пирогова-Лангханса, некротичні маси.
Трихомонадний кольпіт. Клітинний склад запального інфільтрату, але виявляють трихомонади при імерсійної мікроскопії пофарбованих препаратів. Якщо запальний фон відсутній, то констатують наявність трихомонад.
Грибкові ураження. Клітини округлої, овальної форми і трубчасті елементи - суперечки, міцелій.
Бактеріальна флора. Відзначають рясну кокову флору, диплококи внутрішньоклітинного і т. д. При вірусної інфекції можуть виявлятися багатоядерні епітеліальні клітини з ядрами у вигляді «годинникового скла».
В даний час значно почастішали запальні захворювання генітального тракту, викликані хламідіями та гарднерелами. Специфічні ураження з достатньою часткою ймовірності можуть бути виявлені за допомогою цитологічних методів дослідження.
Хламідіоз. При цьому захворюванні в мазках цервікального каналу спостерігається плоскоклітинна метаплазія, ектопія, ознаки дисплазії, запальний фон зі значною кількістю мононуклеарів (не менше 10%). Відзначається включення епітелієм нейтрофільних лейкоцитів, вакуолізація цитоплазми. Запідозрити хламідіоз дозволяє наявність елементарних або ретикулярних тілець. Елементарні тільця - дрібні світло-рожеві точки, розташовані всередині вакуоль. Ретикулярні тільця - більші, форма округла, овальна, ці утворення відтісняють ядро, утворюючи вдавлення в метаплазованого або циліндричному епітелії. Остаточний висновок може бути дано після ідентифікації і хламідій серологічними та культуральними методами.
Гарднерельоз. До основних діагностичних критеріїв відноситься наявність «ключових клітин» - клітин піхвового епітелію, суцільно покритих невеликими грамваріабельние коккобактеріямі. Для постановки діагнозу необхідна наявність не менше двох критеріїв з обов'язковим виявленням «ключових клітин».
При профілактичних оглядах, де необхідно аналізувати стан ектоцервікса і ендоцервікса забір матеріалу для дослідження проводиться різними способами, але найбільш зручний і ефективний, на наш погляд є забір матеріалу за допомогою поролонових кубиків одноразового користування.

Інтерпретація цитологічних висновків

Дії лікаря-гінеколога залежать від результатів гінекологічного огляду жінок та цитологічного ув'язнення.

Цитологічне висновок може бути представлено за такими типами:

I. Без патології (I клас з Папаніколау).

Мазки представлені клітинами багатошарового плоского та призматичної епітеліїв без ознак атипії. Такі пацієнтки підлягають огляду в наступному році.

II. Відповідає II класу за Папаніколау

а) Запальний тип мазка.
б) Трихомонади, грибкові ураження;
в) Проліферація призматичного епітелію;
г) Лейкоплакія.
При запаленні в мазках міститься значна кількість лейкоцитів, можуть бути призматичні клітини, лімфоцити, гістіоцити і_макрофагі, некротичний детрит. При трихомонадном кольпіті серед елементів запального інфільтрату є трихомонади. При запаленні в мазках можуть з'являтися в основному клітини поверхневих шарів багатошарового плоского епітелію незмінені або з незначним збільшенням ядер, нерівністю їх контурів, гіперхромією, що може бути оцінений як реактивні зміни або слабко виражена дисплазія.
При наявності у хворих залізистих ерозій (ендоцервікоз) в мазках з'являється значна кількість призматичного епітелію з явищами помірної або вираженої проліферації. При лейкоплакії в мазках видно клітини поверхневих шарів багатошарового плоского епітелію, в стані зроговіння, без ядер, в окремих клітинах присутні зерна кератогіаліна.
Хворі із запаленням підлягають протизапальній лікування з наступним контрольним взяттям мазків. При негативній відповіді хвора переводиться в групу пацієнток, що підлягають огляду в наступному році.
У ряді випадків при запальному процесі з боку клітин багатошарового плоского епітелію можуть виявлятися явища атипії, відповідні помірної або вираженої дисплазії. Таким пацієнткам проводять протизапальне лікування, після якого знову беруться мазки для цитологічного дослідження. При двічі негативній відповіді жінки включаються в звичайний ритм профілактичних оглядів. У випадках повторних цитологічних висновків про атипії епітелію жінки підлягають поглибленому обстеженню.

Зміни епітелію трактуються як слабка або помірна дисплазія, відповідає III класу Папаніколау.

За таких висновках показана кольпоскопія і повторне цитологічне дослідження не рідше двох разів (якщо немає візуально патології в шийці матки). При повторних дворазових негативних дослідженнях пацієнтки включається у звичайний ритм профоглядів. При наявності патологічного вогнища на шийці - взяття біопсії з наступним гістологічним дослідженням матеріалу. Якщо при дворазових повторних дослідженнях дисплазія зберігається, хворі направляються для поглибленого обстеження.

Виражена дисплазія або підозра на рак (IV клас по Папаніколау)

У ряді випадків цитологічно важко ствердно висловитися є це дійсно дисплазією, або вже це рак in situ, або початкова форма інвазивного раку, хворі повинні відразу ж направлятися у відповідні установи для поглибленої обстеження.

Наявність раку (V клас по Папаніколау)

Хворі обстежуються в онкологічному закладі.

Тіло матки

Матеріалом для дослідження можуть служити відбитки діагностичного зіскрібка, аспірат з порожнини матки, отриманий шприцом Брауна, а також відбитки з поверхні розрізу пухлини під час операції.
При отриманні відбитків з тканинних шматочків попередньо необхідно видалити кров, так як велика кількість еритроцитів ускладнює мікроскопію.
При отриманні аспірату, вміст шприца переноситься на відповідну кількість сухих знежирених предметних стекол і ребром іншого шліфувального предметного скла роблять тонкий рівномірний мазок, який після висушування піддається звичайній фіксації і забарвленням. Якщо приготовлені препарати - мазки, фарбують гематоксилін-еозином, то їх попередньо занурюють у суміш Нікіфорова (рівні обсяги спирту і ефіру) на 15 хвилин. Інші панхромние забарвлення (Лейшман, Паппенгейм та ін) фіксації не вимагають.
Застосовувані способи забарвлення:

Забарвлення гематоксилін-еозином

Забарвлення за Лейшманії

Забарвлення за Папергейму

Методика отримання матеріалу з шийки матки за допомогою поролонових кубиків

Використовують кубики одноразового користування розмірами 0,4 x0, 4 см з поролону-пінополіуретану (ГОСТ-ППУ-ЕС-100 ТУ-6055 127-82). Ще до вирізки кубиків відносно великий шматок поролону миють гарячою водою з милом, ретельно промивають 5 - 6 разів, просушують на повітрі. Потім ножицями вирізують необхідну кількість кубиків зазначеного розміру, розміщують їх у чисту скляну банку з притертою пробкою (обсягом 0,5 - 1,0 л ) Або в чашки Петрі; стерилізують в сухожарові шафі при 180 ° С протягом 1 години. Цим досягається стерильність поролону, коли посів проводиться в аеробних і анаеробних умовах. У такому вигляді можливо тривале зберігання готових для використання кубиків.
Під час профілактичного огляду для отримання матеріалу у кожної жінки необхідно 2 кубики. Перший кубик захоплюють коpнцангом, спочатку беруть матеріал з ектоцервікса: виробляють енергійне круговий рух кулькою по піхвової частини шийки матки (матеріал отримують на самому початку гінекологічного огляду до будь-яких інших маніпуляцій).
Потім матеріал переносять на чисте знежирене предметне скло за допомогою енергійного поздовжнього руху. При цьому більша частина матеріалу переноситься з кубика на предметне скло, що пов'язано з низькою дегидратационной здатністю поролону. Останнє забезпечується структурою поролону, край якого під малим збільшенням мікроскопа представлений декількома сферообразнимі поверхнями, діаметром 0,4-1,0 мм, з гострими краями; стінки сфер склоподібних, абсолютно гладкі, що не дозволяють відторгнутого з шийки матеріалу всмоктуватися всередину кубика.
Другий кубик захоплюють тим же коpнцангом і отримують матеріал з ендоцервіксу, занурюючи його на максимально можливу без травми глибину. Матеріал з кубика переносять аналогічно на той же або інший предметне скло круговим рухом. Кубики після використання викидають.
Найбільш раціональним є розміщення матеріалу на екто-і ендоцервікальних порції шийки матки на одному предметному склі.
При детальному дотриманні методики в переважній більшості спостережень за допомогою поролонових кубиків вдається отримати з шийки матки інформативний матеріал для цитологічного дослідження.

Література
1. Грін М., Стаут У., Тейлор Д. Біологія, т. 1. М ., 1996
Додати в блог або на сайт

Цей текст може містити помилки.

Медицина | Контрольна робота
94.1кб. | скачати


Схожі роботи:
Синдром блювоти при різних захворюваннях
Тривожний стан хворих при різних гінекологічних захворюваннях
Кома при захворюваннях внутрішніх органів
Анестезія при захворюваннях органів черевної порожнини
Анестезія при супутніх захворюваннях органів дихання
Лікувальне харчування при захворюваннях органів дихання і туберкульозі
Особливості занять фізичними вправами при захворюваннях органів зору
Огляд пальпація перкусія та аускультація при захворюваннях органів дихання
Порушення будови і функцій органів і систем при хронічному алкоголізмі
© Усі права захищені
написати до нас