Полімерні сорбенти для розподільної хроматографії
Обмежений робочий діапазон рН і сорбційна активність залишкових гідрофільних силанольних груп сорбентів на основі силікагелю стимулювали розробку полімерних сорбентів для розподільної хроматографії, в якій усунуті зазначені недоліки.
Перший сорбент цього типу, названий PRP -1 {Polymer Reversed Phase}, розроблений фірмою «Гамільтон». Він являє собою твердий стирол-дівінілбензольний гель з питомою поверхнею 415 м 2 / г, обсягом пір 0,79 см 3 / г і середнім діаметром пір 7,5 нм, який витримує тиск до 28 МПа. Понад 98% його сферичних частинок мають діаметр 10 мкм, що забезпечує високу ефективність (40 000т. Т. / м) і низький опір колонок. Фірма випускає також готові колонки з PRP -1 довжиною 150 і 250 мм з внутрішнім діаметром 4,1 мм.
Ще більшу ефективність має сорбент PRP -1 з розміром зерен близько 5 мкм, який випускають з 1984 р. набитим в колонки розміром 150Х4, 1 мм. За селективністю даний матеріал подібний звернення-фазним сорбентам C 18 але працездатний в діапазоні рН = 1-13 при концентрації буферних солей до 0,5-1 М. Крім того, його можна використовувати в ексклюзіонной хроматографії для поділу молекул з молекулярною масою від 2х10 3 до 10 5, а також в іон-парної хроматографії.
Сорбенти RS-пак серії D фірми «Шова Денк», виготовлені на основі різних пористих полімерів, перекривають широкий діапазон полярності. Ці матеріали мають розмір зерен 6 мкм і випускаються набитими в колонки розміром 150Х8 мм з гарантованою ефективністю 5000 т. т. (для DM -614-4000 т. т.) на колонку.
Сорбент DS -613 являє собою гідрофобний полістирольний гель, схожий на PRP -1. Матеріали DE -613, DM -614 і ДС-613 виготовляють на базі поліметакрилат, гідрофільного складного поліефіру і полістиролу з гідрофільними дестітелямя відповідно. Сорбент ДМ-614 по полярності еанімает проміжне положення між щепленими сорбентами C 8 і NH 2 і може застосовуватися як в обіг-фазному, так і в нормально-фазному варіанті ВЕРХ.
Всі сорбенти RS-пак серії D стійкі в діапазоні pH = 2-12, характеризуються практично повною адсорбційної інертністю і високої розділяє здатністю.
Поряд з перерахованими вище матеріалами випускаються також деякі полімерні сорбенти спеціального призначення. Прикладом може служити колонка «μ-сферогель - 7,5% карбогідрати», призначена для аналізу нижчих оліго-сахаридов і поліолів. Сферичний сорбент, яким заповнена ця колонка, є кальцієву сіль сульфірованHOГO стирол-дівінілбензольного гелю з щільністю зшивання 7,5% і діаметром зерна 8 мкм. Розміри колонки 300Х7, 5 мм, робоча температура 80-90 ° С, межа тиску 7 МПа, максимальна швидкість рухомої фази (вода, можлива добавка до 30% ацетонітрилу) 0,6 мл / хв, гарантована ефективність 27000 т. т. / м . На рис. 3 показана хроматограмма суміші сахаридов на цій колонці.
Останні досягнення по використанню полімерних сорбентів в ВЕРХ розглянуті роботі, де описано їх застосування для розділення амінокислот та органічних кислот, пептидів, білків, вуглеводів, неорганічних іонів і різних полімерів.
Сорбенти для ексклюзіонной хроматографії
У ексклюзіонной хроматографії поділ відбувається на колонках, заповнених пористими сорбентами (гелями), які повинні мати великий об'єм пор, витримувати досить високі тиску і не взаємодіяти з аналізованими речовинами. Ці сорбенти поділяються на дві групи, кожна з яких має свої переваги і недоліки-напівтверді (органічні) і жорсткі (неорганічні) гелі. Останній не є гелями у власному розумінні цього слова, так як їх пориста структура сформована заздалегідь і не пов'язана з набуханням в розчиннику. Такі матеріали прийнято називати аерогелю.
Головною характеристикою сорбентів для ексклюзіонной хроматографії є розмір пір, визначає діапазон молекулярних мас, які можна розділити на даному гелі. Цей діапазон визначають за відповідною калібрувальної кривої, побудованої в координатах VR - lg M. Сорбенти з дуже вузьким розподілом пор за розмірами характеризуються високою роздільною здатністю в невеликому діапазоні молекулярних мас. Навпаки, більш широкий розподіл пір призводить до збільшення діапазону поділу за рахунок зниження роздільної здатності. Найкращими характеристиками володіють сорбенти з помірно вузьким розподілом пор, які мають максимальну довжину лінійної ділянки калібрування.
У зв'язку з практичною важливістю даних по діапазонах проникності у цьому розділі наведені калібрувальні криві для багатьох найбільш відомих матеріалів. Останні суттєво полегшують порівняння і правильний вибір сорбентів для вирішення конкретних аналітичних завдань.
Напівтверді гелі
Ці органічні гелі є зшиті сополімери з великою щільністю зшивання, здатні обмежено набухати у використовуваних розчинниках.
Гідрофільні гелі призначені для роботи у водних розчинах, а гідрофобні - в органічних середовищах. Найбільш типовими представниками напівжорстких гелів є зшиті сополімери стиролу з дивинилбензола з розміром частинок 10 мкм і менше, призначені для роботи в органічних розчинниках. Вони випускаються з широким набором пір, охоплює весь можливий діапазон поділу за молекулярною масою (від 10 2 до 10 8) і витримують тиск до 10-20 МПа. Ці матеріали надходять у продаж тільки у вигляді готових колонок з ефективністю до 20-50 тис. т.т. / м, які широко застосовують для дослідження синтетичних полімерів і олігомерів. Розмір пор стирол-дівінілбензольних гелів не можна виміряти абсолютними методами, до того ж для одного і того ж сорбенту в різних розчинниках він неоднаковий, так як набухаемость гелю в них різна. Тому для цих матеріалів розмір пор оцінюють в умовних одиницях, що представляють собою максимальну довжину витягнутої ланцюга молекули трансполістірола в ангстремах, яка вже не здатна проникати в пори гелю, при використанні тетрагідрофурану як рухомої фази.
Більшість стовпчиків із стирол-дівінілбензольнимі гелями можна використовувати при температурах до 140-150 ° С, що дозволяє проводити розділення найбільш важко розчинних димерів, наприклад поліпропілену. Асортимент рухливих раз, сумісних з цими матеріалами, обмежений головним чином тетрагідрофурані, ароматичними і хлоровані вуглеводнями. Для ряду полярних полімерів часто застосовують діметілформамяд. Не можна використовувати воду, спирти, складні ефіри, ацетон та інші полярні розчинники.
Гелі з найбільш дрібними порами, що мають межу ексклюзії до 5000, часто використовують для розділення малих молекул. Діаметр пор самих дрібнопористі сорбентів (типу ц-стірогеля 100 А) в набряклому стані становить близько 3 нм, ступінь їх набрякання є найбільш високою, а коло придатних рухливих фаз більш вузький, ніж для гелів з великими порами.
Більшість сучасних напівжорстких гелів витримує тиск 10-15 МПа. Проте, фірма «Шова Денк» для ви-вускаемих нею колонок Шодекс встановлює значно менші граничні тиску (<2 МПа для сорбентів з розміром зерна близько 10 мкм). Авторам не вдалося з'ясувати причину такого жорсткого обмеження; до того ж у літературі є приклади поділу на наборах колонок Шодекс, де тиск як мінімум удвічі перевищувало рекомендовані фірмою межі.
Колонки зі стирол-дівінілбензольнимі сорбентами, що випускаються різними фірмами, помітно різняться за ефективністю та розміру лінійної дільниці калібрувальної кривої (рис. 4). Ці відмінності викликані особливостями мікроструктури пір, розміром і ретельністю сепарування і упаковки частинок сорбенту. Найбільш ефективними є колонки шодекс типу KF, ультрастірогель і TSK-гель серії XL. Гарантована ефективність цих колонок сягає 45 - 50 тис. т.т. / м. Лінійна ділянка калібрувальної кривої для стирол-дівінілбензольних гелів зазвичай відповідає зміні молекулярної маси в межах 1-2 порядків.
Деякі фірми випускають спеціальні колонки, заповнені сумішшю сорбентів різної пористості в таких співвідношеннях, які забезпечують найкращу лінійність калібрувальної кривої в діапазоні 4-5 порядків. Природно, що розділова ємність таких колонок відносно невелика, але вони дуже зручні для попереднього дослідження полімерних матеріалів з невідомим ММР, а також для швидкого порівняльного аналізу різних зразків, зокрема, в аналітичному контролі виробництва.
Великий інтерес для ексклюзіонной хроматографії представляють гелі сферон. Ці макропористі сорбенти з високою щільністю зшивання отримують сополимеризацией оксіетілметакрілата з етілендіметакрілатом. Вони набухають як у воді, так і в багатьох органічних розчинниках, зокрема, в тетрагідрофурані. Ступінь набухання гелів у різних розчинниках майже однакова і не змінюється в широкому інтервалі еаченій рН та іонної сили, що дозволяє розглядати їх як універсальні сорбенти для ексклюзіонной хроматографії в органічних розчинниках і водних системах. Іноді можна замінювати водний розчинник на органічний в провисання поділу, тобто працювати в режимі градієнтного елюювання.
Гелі сферон володіють високою питомою поверхнею (50-200 м 2 / г), механічною міцністю (допустимий тиск вище 10 МПа) і термостійкістю до 200 ° С. Випускається п'ять типів гелів різної пористості з межею ексклюзії по декстрану від 6-Ю 4 до 10 8. Нижня межа проникності гелів всіх типів однаковий і становить близько 10 3. Висока хімічна стійкість дозволяє використовувати сферони. в діапазоні рН = 1-12.
Для ВЕРХ використовують фракції сферона з розміром зерен менше 25 мкм, які дуже бажано додатково седіментіровать. З 1985 р. розпочато випуск сорбентів сферою мікро з розміром зерен 12, 16 і 20 мкм, які відрізняються більш вузьким розподілом за розміром частинок і підвищеною механічною міцністю. У літературі наведено багато прикладів використання сферонов для поділу гідрофільних полімерів, білків, нуклеїнових кислот та інших біологічних об'єктів. При цьому неодноразово спостерігали помітну адсорбцію деяких біополімерів на матриці гелю, що іноді підвищує ефективність розділення.
В останні роки розроблено ряд нових полімерних сорбентів для ексклюзіонной хроматографії у водних системах. На рис. 5 наведені калібрувальні криві для деяких матеріалів. Гелі шодекс ОН-пак виготовляють на основі полівінілового спирту (серія Q) і полігліціділметакрілата (серія В). Перші призначені для розділення в низькомолекулярної області (М <1500 по поліетиленгліколь або 5000 по декстрану), а другі - для високомолекулярного діапзона. Оптимальна робоча температура для колонок з цими матеріалами складає 50 ° С. Сорбенти типу іонпак 5 є сульфовані стирол-дівінілбензольние гелі і особливо придатні для поділу поліолів і дослідження молекулярно-масового розподілу полісахаридів (рис. 4.8) при робочих температурах 40-80 ° С. TSK-гелі типу PW дають дуже гарні результати при визначенні ММР водорозчинних синтетичних полімерів (поліакриламід, солі поліакрилової кислоти, полівінілпіролідон і т.д.), а також алеінових кислот, поліетиленоксиду і полісахаридів. Ці матеріали мають найкращі характеристиками для високоефективної ексклюзіонной хроматографії полікатіонов у водному середовищі. Як рухливих фаз при аналізі неіонних речовин на цих сорбентах використовують воду або 0,005 - 0,1 М водні розчини солей (наприклад, NaCI або КСl); для поділу поліелектролітів на TSK-гелі типу PW застосовують буферні системи. Найбільш дрібнопористі гідрофільні гелі дуже ефективні для поділу нізіомолекулярних сполук.
До недоліків напівжорстких гелів слід віднести обмеження по розчинників, значний час врівноваження колонок і можливе зниження їх ефективності при заміні рухомої фази, а також відносно невисоку граничне робочий тиск. Крім того, ефективність колонок з напівжорсткими гелями може різко знизитися при попаданні в них пухирців повітря. Повітря блокує пори гелю і дуже важко видаляється. Тому при роботі з напівжорсткими гелями потрібно особливо ретельна дегазація розчинника і уважна збірка хроматографічної системи.
Жорсткі гелі
З жорстких неорганічних сорбентів в ексклюзіонной хроматографії використовують, головним чином, силікагелі і в значно меншому ступені пористі скла. Основними перевагами цих матеріалів є можливість використання з будь-яким розчинником, простота їх заміни, висока стійкість до тиску і температурі і відносна легкість упаковки, колонок. Головний недолік жорстких гелів - адсорбційна активність, яка найбільшою мірою виражена у пористих стекол. Для її усунення поверхню модифікують сіланізаціей або щепленням різних груп, зокрема складноефірні (μ-бондагель Е), залишків гліцерину (глікофаза G / CPG) та ін На жаль, модифікацією поверхні повністю придушити адсорбцію зазвичай не вдається. Тому доводиться усувати її шляхом різних добавок до рухомої фазі, які взаємодіють з сорбентом сильніше, ніж аналізовані речовини. При роботі в органічних середовищах в качйстве модіфлкаторов часто застосовують тетрагідро-фуран і додігліколі (якщо, звичайно, не можна з якихось причин, вести поділ в чистому полярному розчиннику). При роботі у водних розчинах і аналізі поліелектролітів до елюент додають, різні солі (іноді кислоти і підстави), що пригнічують: адсорбційні і поліелектролітних ефекти. Друда недолік жорстких гелів-обмежений дозвіл в області низьких молекулярних мас: для даного діапазону краще використовувати напівтверді сорбенти.
Спочатку для поділу полімерів застосовували різні промислові силікагелі. Вивчено ряд сілікателей, що випускаються в СРСР, і запропонований набір з чотирьох марок (КСК-2; КСК-1; сілохром СХ-1 і МСА-2500), який перекриває діапазон молекулярних мас від 10 3 до 10 6. Головний недолік промислових силікагелів полягає в поганій відтворюваності їх характеристик за рахунок досить широких допусків, які цілком припустимі при їх використанні в техніці. Крім того, суттєвим ускладненням є необхідність розуміли і виділення вузьких фракцій з необхідним розміром частинок, як описано в розд. 5.1. Тому були розроблені силікагелі, спеціально призначені для ексклюзіонной хроматографії. Першим з таких сорбентів був ліхросфер. Сферичні частки сорбенту мають великий питомий об'єм пор, хороші механічні властивості і дозволяють отримати колонки досить високої ефективності.
Значно кращі результати досягаються при використанні зорбакса PSM, одержуваного за особливою технологією. Цей сорбент випускають з трьома розмірами пор, що перекривають діапазон молекулярних мас від 10 2 до 2-10 6. Для зниження адсорбції при роботі в органічних розчинниках його поверхню сіланізіруют, а у водних системах використовують не оброблений сорбент. Зорбакс PSM характеризується винятковою однорідністю часу, що в поєднанні з малим діаметром частинок і їх помірно вузьким розподілом за розміром забезпечує високу ефективність колонок.
Комбінація колонок з зорбаксамі PSM -60 і PSM -1000 дає лінійну калибровочную залежність в діапазоні від 2 до 2-10 2-10 6. Фірмою «Дюпон» випущені «трімодальние» колонки, що містять суміш зорбаксов PSM -60, PSM -300 і PSM -3000, з лінійною калібрувальної залежністю в межах 10 2 -10 7 Для забезпечення необхідної селективності розділення 'рекомендується використовувати набори з двох і більше колонок . Зорбакс PSM, мабуть, є кращим з жорстких сорбентів, не дназначенних для дослідження біополімерів. Калібрувальні криві для жорстких сорбентів по полістиролу в тетрагідрофурані наведені на рис. 8.
Пористі скла в немодифікованої вигляді останнім часом застосовують рідко, тому що вони мають значно більшу адсорбційної активністю, ніж силікагель. Відмінною особливістю пористих стекол є надзвичайно узкoe розподіл пор за розміром, тому вони характеризуються дуже високою селективністю розділення, але в малому діапазоні молекулярних мас.
До сорбентам для високоефективної ексклюзіонной хроматографії білків, ферментів та інших біологічних об'єктів пред'являються значно жорсткіші вимоги щодо інертності поверхні, ніж до сорбентам для поділу синтетичних полімерів. Кислі гідрофільних силанольних пруппи силікагелю володіють високою адсорбційною активністю, проявляють слабкі іонообмінні властивості і здатні денатурувати білкові молекули. Тому поверхня жорстких сорбентів дуже ретельно модифікують щепленням моношарів нейтральних гідрофільних органічних гpyпn. До таких відносяться сорбентам ц-бондагель Е та матеріали, що містять гліцерільние групи. Поверхня ц-бондагеля Е модифікована аліфатичних-ми ефірними групами. Колонки з цим сорбентом можна використовувати з будь-якими розчинниками від пентану до буферних розчинів в області рН від 2 до 8. Вони характеризуються високою роздільною здатністю, але через малу робочого об'єму (приблизно 1,2 мл на колонку) потрібно особливо точна подача рухомої фази.
Якість одержуваних сорбентів багато в чому визначається повнотою реакції. Теоретично в зазначену реакцію може вступити приблизно половина всіх сіланол-них груп. Однак залишилися групи не можуть взаємодіяти з сорбентами, так як екрануються гліцерільнимі групами. При недостатньому ступені покриття повного екранування не пооісходіт і починає проявлятися «гідрофільних силанольних активність» незаміщених груп. Зміст таких активних груп, що характеризує рівень дезактивації сорбентів, часто оцінюють за ступенем збереження ферментативної активності лабільних ферментів після їх пропускання через хроматографічну колонку.
Найбільш відомими представниками матеріалів вказаного типу є глікофаза CPG, що отримується з пористих стекол марки CPG (Controlled Porous Glass), ліхросфер діол і сінхропак GPC. Ці гелі характеризуються дуже високою інертністю: так, втрата ферментів при хроматографирования на ліхросфере діол зазвичай не перевищує 2-7%. Сорбенти сінхропак GPC, за даними фірми, забезпечують повне збереження ферментативної активності.
Найкращими властивостями для ексклюзіонной хроматографії біополімерів мають TSK-гелі типу SW. Поверхня цих матеріалів покрита гідрофільними ОН-грутопамі за особливою технологією, що забезпечує виняткову інертність сорбенту, практично не поступається сефадексе. Тому ексклюзіонное поділ, як правило, не ускладнюється побічними сорбційними процесами. TSK-гелі SW випускають з трьома розмірами пор; і вони перекривають діапазон молекулярних мас від 5 * 10 2 до 4 * 10 5 (по декстрану) або до 10 6 (по глобулярних білків). За рахунок великого обсягу пір колонки, з цими гелями характеризуються високою розділовою здатністю, а їх гарантована ефективність становить 16 тис. т.т. / м.
Хоча переважна більшість розділень на жорстких гелях з прищепленими гідрофільними групами проводять у водних системах, ці матеріали можуть бути використані і в поєднанні з полярними органічними елюента (тетрагідрофуран, диметилформамід, етанол), що розширює можливості їх застосування.
Успіхи, досягнуті за останні кілька років при розробці сорбентів для високоефективної ексклюзіонной хроматографії, дозволяють припускати, що незабаром будуть створені нові матеріали з ще більш високими характеристиками.
Сорбенти для іонообмінної хроматографії
У іонообмінної хроматографії застосовують різноманітні сорбенти, які використовуються як для поділу білків, так і для розділення неорганічних іонів і невеликих молекул. Ці сорбенти можна розділити на при основних види: іонообмінні смоли, пеллікулярние матеріали та силікагель з хімічно прищепленої фазою, що володіє іонообмінними властивостями. Пеллікулярние сорбенти в даний час практично не застосовують, їх використовують лише для заповнення предколонок і при відтворенні старих методів.
Застосовувані в ВЕРХ іонообмінні смоли, як правило, є сополимерами стиролу і дивинилбензола, до яких щеплені іонні функціональні групи.
Синтетичні смоли є гелями, каркас яких або матриця складаються з мережі просторово закріплених між собою вуглецевих ланцюгів. З матрицею жорстко з'єднані фіксовані іони, що несуть заряд і надають смолі властивості іонообмінника. Сама матриця гидрофобна, а гідрофільні фіксовані іони надають їй здатність до набухання, перетворюючи смолу в полуелектроліт. Набухаемость смоли залежить від числа поперечних зв'язків в молекулі або зшивання.
Твердість і механічна міцність сополимера стиролу і дивинилбензола також залежить від ступеня зшивання, тобто від процентного вмісту дивинилбензола. Іонообмінна смола з високим ступенем зшивання, яка містить 8-12% дивинилбензола, здатна не змінювати обсяг у різних розчинниках і витримувати великі тиску без стиснення (усадки).
Зазвичай іонообмінні смоли представляють собою мікропористі сферичні частинки діаметром менше 10 мкм. Сульфо-групи надають їм здатність до катіонного обміну, а тріалкіламмоніевие - до аніоном. Вони мають прийнятною ефективністю і високою іонообмінної ємністю. Ємність різних смол коливається від 3 до 10 ммоль / м.
Ці матеріали знаходять обмежене застосування через порівняно низьку ефективність, що пов'язано з дуже повільною дифузією молекул зразка в мікропори полімеру. До переваг цих смол слід віднести стабільність і селективність.
Основні іонообмінні смоли, що застосовуються в ВЕРХ, і їх характеристики наведені в додатку 2.
Цікаві іонообмінні смоли хелатні, які можуть зв'язувати іони деяких металів, утворюючи з ними комплекси міцніші, ніж з іонами інших металів. Селективність смоли можна поліпшити, змінюючи кислотність середовища. Смола ХАД-4 має велике число пір діаметром 50 нм і питому поверхню 780 м 2 / г. Іонообмінна хелатних смола хелекс 100 містить функціональну групу імінодіуксусной кислоти - CH 2 N (CH 2 COO) 2
Іншим типом сорбенту, раніше застосовувався в іонообмінної хроматографії, є ті ж іонообмінні смоли, нанесені на пеллікулярние частки або щеплені до них. Поверхнево-пористі або пеллікулярние матеріали мають тонку плівку іонообмінної смоли, звичайно 1-3 мкм товщини, нанесену на частинки діаметром 40 мкм. У всіх випадках дифузія в тонкому шарі збільшується і ефективність колонки возлегает, проте іонообмінна ємність різко падає. Максимальна місткість колонки розміром 2 мм Х 25 см, заповненої пеллікулярной іонообмінної смолою, становить близько 1 мкг. дя роботи з пеллікулярнимі матеріалами придатні лише фотометри і спектрофотометри. Ці матеріали застосовують в основному в якості сорбенту для заповнення предколонок, так як набивання ними можна проводити «сухим» способом.
Домогтися високої ефективності розділення вдалося при використанні мікрочастинок повністю пористого силікагелю, якому рівномірно щеплена фаза, що має іонообмінні групи. Сілікагелевая основа робить матеріал більш міцним. Проблеми набухання або усадки колонки рідко виникають. Матеріал стійкий до будь-яких буферним розчинам, розчинників і високих температур (до 80 ° С). Однак сильнокислотного або слабоосновним розчини (2> рН> 7,5) можуть привести руйнування сілікагелевой основи. Як правило, ефективність, отримана на щеплених іонообмінника, порівнянна з ефективністю звернення-фазних матеріалів однакового зернения.
Комерційні іонообмінні силікагелі розрізняються за структурою пір і по типу приєднаної функціональної групи, за загальною поверхні пір і формі частинок. Активні групи вводять сульфування, хлорметілірованіем і наступним мінуванням. Навіть якщо поверхня силікагелю повністю покрита кремнеорганічною сполуками, залишається велика кількість непрореагировавших поверхневих ОН-груп, які ведуть себе як слабкі кислоти в іонообмінному процесі. Внаслідок цього основні іонообмінники, щеплені на силікагель, є біфункціональних. До силікагель прищеплюють такі групи: кислотні-карбокси-, сульфодіол-; основні - аміно, алкіл-аміно; амфотерні амінооксі-або амінокарбоксі-Зазвичай силікагель обробляють фенілтріхлорсіланом, потім сульфірующій олеумом або хлорсульфоновой кислотою. Тріфенілсілільная група більш стійка до сульфування, ніж феніл або нафтілсілільная.
У силікагелю-матеріалах, доступних як зразком, так і протівоіони, швидко встановлюється массопередачи, що призводить до високої ефективності колонки. Силікагелі з прищепленими групами діляться на мікро-і макропористі в залежності від діаметра внутрішніх пір. Мікропористі матеріали, що мають невеликі за діаметром пори, дозволяють молекулам розчинника, наприклад води, а також невеликих іонів проникати в полімерну матрицю і затримують великі молекули. Більшість полімерних іонообмінних силікагелів мають мікроструктуру. Полімерні смоли макропористого типу найчастіше використовують в рідинної хроматографії низького тиску. Макропористі силікагелі з прищепленими іонообмінними групами стали застосовувати при поділі великих молекул, наnpімеp білків. Однак стійкість сорбента невелика через розчинення його у водному рухомий фазі.
Література
Ohmacht R., Halasz /. / Chromatographia, 1981, v. 14, p. 155-161, p. 216 - 226.
Engelhardt H., Muller Я. / J. Chromatogr, 1981, v. 218, p. 395-407.
Bredeveg RA, Rothman LD, Pfeiffer CD / Anal Chem, 1979, v. 51, No. 12, p. 2061-2063.
Nice E. С., О 'Нага MJ / J. Chromatogr, 1978, v. 166, p. 263-267.
Atwood JG, Goldstain J. / J. Chromatogr. Sci, 1980, v. 18, p. 650-654.) 6. Pearson JD, Lin N. Т., Regnier FE / Anal Biochemistry, 1982, v. 124, p. 217-230.
Rimer J., McKlintock R., Galyean R. ea / J. Chromatogr, 1984, v. 288, p. 303-328.
Rimer L, McKlintock R. / J. Chromatogr, 1983, v. 268, p. 112-119.
Wise SA, Bonnett WJ ea / J. Chromatogr. Sci, 1981, v. 19, p. 457 - 465.