Тести для ідентифікації культури.
Морфологія збудника.
Грам -. «Зграя риб». Рухливі. Монотріхі.
Зростання на поживних середовищах.
1% пептона вода - блакитна плівка.
Лужний агар - середні колонії блакитного кольору.
Середа TBRS - колонії жовтого кольору.
Вивчення антигенних властивостей.
Сахаролитические властивості.
Лактоза, арабіноза, дульцит -
Глюкоза, сахароза, манить, маноза, мальтоза → до
Протеолітичні властивості.
Розкладання желатину, пептонізація молока +
Розкладання сечовини (V. cholerae +, V. eltor -)
Проба на оксидазу.
Оксидаза +
Чутливість до фагів.
Прискорені методи
Реакція іммобілізації. На предметне скло наносять 2 краплі випорожнень або матеріалу з поверхні пептонов води. До 1-ої краплі додають одну краплю О-сироватки (1:100), до 2-ий - краплю фіз розчину. Кожну краплю емульгують пастерівською петлею або піпеткою, накривають покривним склом і переглядають під мікроскопом. При позитивному результаті в першій краплі припиняється рух вібріонів, у другій спостерігається рух.
Люминисцентной-серологічний метод.
Тести для ідентифікації культури.
Морфологія збудника.
Грам -. Капсула. Поліморфні. Біполярність (забарвлення метиленовим синім).
Зростання на поживних середовищах.
МПА - через 48 годин «мереживний платочек».
МПБ - «сталактитові зростання»
Скошений агар - в'язкий сірий наліт
Вивчення антигенних властивостей.
Сахаролитические властивості.
Мальтоза, арабіноза, глюкоза (не завжди), маніт → до
Сахароза, Рамноза -
Протеолітичні властивості.
Розкладання желатину, згортання молока -. H 2 S +
Біологічна проба.
Чутливість до фагів.
Диференціація збудників чуми
від збудника псевдотуберкульозу.
Ознаки
Збудник чуми
Збудник псевдотуберкульозу
Рухливість
Зростання на голодній середовищі
Чумний бактеріофаг
Розщеплення рамнози
Освіта сечовини
Згортання молока
Лакмусовим молоко
Фібринолітичні св-ва
Патогенність для тварин
Нерухомий
Не росте
Лізується
-
-
-
Повільне ощелачивание
Володіє
Вбиває морських свинок і щурів
Рухливий
Зростає
Чи не лізується
+
+
+
Швидке
ощелачивание
Не володіє
Морських свинок вбиває,
щурів не вбиває
Тести для ідентифікації культури.
Морфологія збудника.
Грам -. Не рухливі. Забарвлення за Романовським - ніжно-фіолетові
Алергічна проба.
Пробу ставлять на 3 - 5день захворювання.
а) нашкірний метод: тулярін (1 мл - 10 млрд. убитих мікробних кліток). Пробу ставлять на зовнішній поверхні плеча. Позитивна реакція - гіперемія і набряклість навколо насічки діаметром 1-2 см через 48-72 години.
б) внутрішньошкірний метод: суспензія вбитих бактерій (1 мл - 500 млн. мікробних клітин). Пробу ставлять на долонній поверхні передпліччя. Позитивна реакція - набряклість і гіпермія через 24 - 48 годин.
Серологічна діагностика.
Лінійна реакція аглютинації: 2 - 3 мл крові з ліктьової вени беруть у пробірку. Отриману сироватку розводять 1:50 до 1:1600. Діагностичним титром є позитивний результат реакції в розведенні сироватки від 1:100 і вище. Антигеном служить туляремійний діагностикум - убита формаліном суспензію бактерій (1 мл - 25 млрд. мікробних тіл).
РНГА: сироватку розводять від 1:100 до 1:10000. Антиген - туляремійний еритроцитарний діагностикум. Діагностичним титром вважають титр 1:100 і вище.
Біологічна проба.
Люминисцентной-мікроскопічний метод.
Тести для ідентифікації культури.
Морфологія збудника.
Грам -. Не рухливі. Капсула. У мазку розташовуються безладно.
Бактеріологічний метод.
Проводять посів крові у флакони, в які наливають по 30 - 50 мл агару. У кожний флакон заливають по 25 - 30 мл простерилізованого бульйону. Це середовище витримують у термостаті 2 - 3 дні, після чого додають по 5 мл у кожний флакон. При позитивному результаті на поверхні з'являються колонії - дрібні, безбарвні, опуклі з зернистістю.
Серологічна діагностика.
Реакція Райта. Беруть 1 - 2 мл крові з пальця. Отримують сироватку. Розводять 1:25 до 1:1600. Діагностичним титром є позитивний результат реакції в розведенні сироватки від 1:100 і вище (при титрі 1:400 - реакція різко позитивна). Антигеном служить туляремійний діагностикум - убита культура бруцел.
Алергічна проба.
Внутрішньошкірно в долонну поверхню передпліччя вводять 0,1 мл бруцеліну. Результат реакції враховують через 24 - 48 годин. Позитивна РАКЦ характеризується набряком і гіперемією розміром 4 6 см.
Біологічна проба.
Метод імунофлюоресценції.
Тести для ідентифікації культури.
Морфологія збудника.
Грам +. Не рухливі. Капсула. Спору.
Зростання на поживних середовищах.
МПА - «голова медузи» або «левова грива»
МПБ - придонний ріст у вигляді «грудки вати»
Желатин - «перевернута ялинка»
Вивчення антигенних властивостей.
Сахаролитические властивості.
Глюкоза, лактоза, мальтоза, левулеза → до
Протеолітичні властивості.
Розкладання желатину, пептонізація молока +
Повільне згортання молока. H 2 S +. NH 3 +.
Гемолітичні властивості.
Не викликає гемоліз, на відміну від антракоїду.
Чутливість до фагів.
Біологічна проба.
«Перлове намисто»:
До бульйону Хоттингера додають 30% інактивованої сироватки та пеніцилін з розрахунку 0,5 ОД на 1 мл бульйону. 3 години в термостаті. Роблять мазок. Фіксують рідиною Карнуа (етиловий спирт, хлороформ і крижана оцтова кислота). Фарбують метиленовим синім і мікроскопіруют. Результат дії пеніциліну - ланцюга куль, на поминають «перлове намисто».
10. Алергічна проба.
Внутрішньошкірно на внутрішній поверхні передпліччя вводять антраксином. Реакцію враховують через 24 - 48 годин. Позитивна реакція проявляється з перших дні захворювання.
Реакція Асколі.
Приготування антигену: досліджуваний матеріал подрібнюють, заливають 25 - 50 кратним об'ємом фіз розчину і кип'ятять. Отриманий екстракт фільтрують. Для реакції використовують преципитирующие сибіркових сироватку і для контролю сибірковий антиген.
Постановка реакції:
Перший пробірка - преципитирующие сироватка + досліджуваний термоекстракт;
Другий пробрка - преципитирующие сироватка + стандартний сибірковому антиген (контроль);
Третій пробірка - преципитирующие сироватка + термоекстракт з вовни здорового жівтного (контроль).
При положітелной реакції перших 2 пробірках утворюється преціпітаціонное кільце, а в 3 - кільце відсутня.