Гематологічна характеристика лина з УЗВ і окуня оз Віштинецьке

Окунь (Perca fluviatilis .). Тело окуня довольно высокое. L.). Тіло окуня досить висока. Голова коротка, рило округле. Спинні плавці відокремлені, хоча і з'єднані в підстави перетинкою. Щоки суцільно вкриті лускою. Кришкових кістку з одним плоским шипом, предкришечная - ззаду зазубрені, знизу з гачкуватими шипиками. Щетинковидні зуби розташовані в кілька рядів на щелепах, сошнике, піднебінних, внешнекриловідних, на глоткових кістках; іклів немає. Черевні плавці тісно зближені, відстань між ними становить менше двох третин ширини основи. Бічна лінія 57 . Хребців 40-43. ₁ XII - XVI , D ₂ I - IV 12-17; A II - III 7-11; I . I . Формула плавців: D ₁ XII - XVI, D ₂ I - IV 12-17; A II - III 7-11; I. I. 53-74. На зябрової кришці кілька гострих шипів. Луска дрібна ктеноидная [6, 51, 52, 68].

Окунь красиво і яскраво забарвлена. Спина в нього темно-зелена, боки зеленувато-жовті з п'ятьма-дев'ятьма поперечними смугами. Хвостовий, анальний, черевні плавці яскраво-червоного кольору, грудні плавці жовті. У кінці першого спинного плавця добре помітне темна пляма. Очі оранжеві [67, 68].

Окунь населяє майже всю Європу, в тому числі басейни Балтійського, Чорного, Каспійського, Азовського морів. У водоймах Калінінградській області живе повсюдно [68].

Окунь є типовою озерно-річковою рибою. Він часто зустрічається в низов'ях озер і ставках, а також в річках з повільною течією. Живе він і в солонуватих затоках Балтійського моря. Добре переносить високу кислотність води, водиться в торф'яних та лісових озерах, де іноді є єдиною рибою у водоймі. Для окуня потрібно, однак, порівняно високий вміст кисню у воді. Окунь веде денний спосіб життя. Молодь окуня зазвичай збирається в невеликі зграйки серед підводних коренів дерев, поблизу мостів, пристаней, заростей водоростей. Смугаста забарвлення дозволяє їм ховатися на такому тлі. Іноді, не в нерестовий сезон, можна побачити великі зграї окуня на чистій воді в озерах. Великі риби тримаються на великій глибині. Окунь не робить тривалих міграцій і навіть помітних кочівель. У період нересту він утворює зграї, які потім розпадаються на дрібні групи і тримаються на постійних місцях. Самці ростуть повільніше самок. У Куршській затоці окунь живе до 15-ти і більше років. Дозріває він у віці двох-п'яти років. Досягає довжини 40 см і маси більш 1,5-2,0 кг [6, 52, 68].

Статевої зрілості окуні досягають рано: самці - в 1-2 роки, самиці - на 3 роки і пізніше [51].

Нерест окуня відбувається у квітні-травні на мілководдях при температурі 6-7 ° C і вище. У цей період спостерігаються скупчення окуня, наприклад, в Куршській затоці в районі кам'янистих гряд і біля мису Вентес рагас. Ікра велика, відкладається у вигляді довгих стрічок, головним чином на торішню рослинність, корені дерев та інші предмети, на залитій заплаві річок або в прибережжі озер. В озерах, де немає або мало рослинності, окунь відкладає ікру на камені. У цих стрічках ікринки з'єднані зразок мережі або мережива Розмір ікринок 2-2,5 мм, у процесі розвитку вони збільшуються до 3,5 мм; жовток містить велику жирову краплю. Плодючість до 200 тис. і більше ікринок. Вимк предличинок при температурі 13 ° C відбувається через вісім днів. Виклюнувшиеся предлічінкі бувають завдовжки до 5,3 мм [6, 68].

Після розсмоктування жовткового мішка (через 2-4 доби після виклева) личинки живляться дрібним планктоном. У міру зростання молоді вона переходить на кормові організми все більшого розміру. Після досягнення 15 см окунь починає більш інтенсивно харчуватися рибою: дрібним окунем, пліткою та іншими короповими. Особливо сильно Хижачить окунь в кінці літа, коли численні підросли мальки риб є багатою, легкодоступною їжею. Окунь більш ненажерливий, ніж щука: на 1 кг м'яса окуня витрачається 4,9 кг іншої риби, а на 1 кг щуки - 3,5 кг. В озерах, бідних кормовими організмами, окунь росте виключно повільно; в таких озерах живуть зазвичай популяції з пригніченим зростанням, що відрізняються дрібними розмірами [6, 38, 51, 68].

Завдяки широкому розповсюдженню і високої чисельності у водоймах окунь є доступною здобиччю для багатьох риб. Сом, щука, судак, минь охоче харчуються ім. Чайки, крячки та скопа так само нападають на нього [51].

Окунь має важливе промислове значення. У Куршській затоці його загальний вилов в останні роки становить 90-115 т. Крім того, окунь є одним з основних об'єктів любительського рибальства. Однак, в озерах, водосховищах і ставках, багатих цінними промисловими видами (сиги, форель, лящ, короп, судак), окунь є смітної рибою: він харчується тим же кормом і поїдає відкладену цими рибами ікру. У таких водоймах необхідно прагнути зменшити чисельність окуня - посилити його вилов, а головне, обмежити розмноження. Для цієї мети у водойму виставляють штучні нерестовища, які потім видаляють разом з відкладеним на них ікрою окуня [51, 68].

1.2 Характеристика оз. Віштинецьке

Сувалкська височина - озерний край, розташований на південно-східному кордоні з Польщею і Литвою. | Справжньою перлиною краю, безсумнівно, є саме велике і гарне озеро - Віштинецьке. Надзвичайно велика глибина (54 м) і значна площа дзеркала (16,6 км ^2), а також піднесеність над рівнем моря (+172 м) визначають своєрідність та унікальність цього басейну не лише для Калінінградського регіону, а й для прилеглих територій Польщі та Литви . Це свого роду "Байкал" Центральної Європи, рекреаційне значення | якого буде, безсумнівно, зростати [15].

Озеро Віштинецьке - найбільший прісноводний водоймище Калінінградській області, об'єм води якого становить близько 258 млн. км ^3. Озеро витягнуте з північного заходу на південний південний схід, його довжина становить 9,1 км, найбільша ширина - 4,2 км; довжина берегової лінії - 25 км. У озеро впадає 12 річок і струмків; зокрема, в південну частину озера впадають дві невеликі річки - Черниця і Безіменна, поточні з території Польщі, на півночі з водойми випливає одна річка - Пісса, яка через р.. Анграпа з'єднує озеро з р. Преголе [15, 68].

Віштинецьке озеро - озеро льодовикового типу. Воно утворилося під дією флювіогляціальних потоків льодовикової екзараціі і термокарстових явищ під час південно-литовської фази померанському стадії Валдайського заледеніння. Вік його майже на 10 тис. років старше віку Балтійського моря і становить близько 22-25 тис. років. Озеро розташоване в зоні кінцевих крайових моренних гряд. При цьому дзеркало поверхні озера розташовано на позначці +172 м вище рівня моря. У плані чаша озера має клиноподібну форму і тягнеться з північно-заходу на південний схід, маючи ширину в північній частині 2,6 км, і в південній частині 0,8 км, найбільш широка частина озера (на широті бухти Тиха) становить 4, 2 км [15].

Рельєф дна має складну форму. Через усю центральну частину озера простягається ланцюжок вузьких глибоких троговими долин з максимальними оцінками глибин від 54 до 31 м. Слід зазначити, що максимальна глибина Віштинецьке озера раніше визначалася в 47 м. На широті гори Лисій (203,2 м) знайдена глибина 54 м, що на 7 метрів глибше. На сьогоднішній день ця позначка визначає найбільшу глибину Віштинецьке озера. Крутизна схилів підводних порогів у верхній частині більш полога, ніж у нижній, і змінюється від 2-4 до 10-12 градусів і більше. У південній частині бухти Тиха в районі мису Піонерський виявлена ​​в межах мілководдя не відома раніше западина ізометричної форми глибиною понад 10 м [15].

Ланцюжок глибоких западин, встановлена ​​в центральній частині озера, поділяється підводними порогами субширотного простягання висотою до 20 м відносно дна прилеглих улоговин. Ці пороги як би ізолюють западини. Мабуть, в освіті центральної групи западин поряд з розмивом брали участь термокарстові процеси. Тим не менш значна крутизна і пороговий характер здебільшого підводних долин свідчать про провідну роль флювіогляціальних потоків при формуванні рельєфу дна майбутнього Віштинецьке озера [15].

У межах дна озера Віштинецьке виділяються наступні западини: Північна (54 м), Центральна (46 м), Піонерська (45 м), Вузька (31 м) і Південна (44 м) [15].

Донні відкладення Віштинецьке озера представлені широким спектром гранулометричних типів: від пісків з домішкою гальки, гравію, раковиною детриту до глинистих мулів. На окремих ділянках крутих схилів глибоких западин пухкі опади практично відсутні. Зокрема, південно-східний схил найглибоководнішою западини Північної (район гори Лиса), а також східний, південний і західний схили западини Південної зайняті відкладеннями гравію, гальки, валунами, що утворилися за рахунок руйнування морени [15, 16].

Дно глибоководних западин покрито темними (головним чином чорними) напіврідкими илами (вологість - до 90%) зі значною домішкою органогенного матеріалу (в основному - залишки наземної і водної рослинності). Нерідко ці мули містять незначну домішку піщаних частинок, у зв'язку з чим їх відрізняє погана сортування. У міру просування від центру западин до берегів глинисті мули змінюються мелкоалеврітовимі і крупноалеврітовимі илами; останні на глибинах близько 10 м змінюються пісками. Розміщення опадів на дні нерідко відрізняється строкатістю через великі нерівностей дна і значну крутизну схилів. Найчастіше серед мелкоалеврітових мулів зустрічаються плями крупноалеврітового мулу та пісків. Сортування

дрібно-і крупноалеврітових мулів і пісків (серед них переважають дрібнозернисті), як правило, хороша і середня [15]. Грунти озера містять від 43 до 87% кремнезему, в основному теригенно походження, хоча в опадах зустрічаються і залишки діатомових водоростей. При цьому

кількість SiО ₂ зростає від 43% в глинистих мулах до 87% в пісках. У меншій кількості в донних відкладах виявлені карбонати (від 7 до 20%), що мають теригенні і органогенні походження. Зокрема, джерелом кальциту в опадах можуть служити раковини молюсків (у Віштинецьке озері живе 41 вид молюсків). Так, велика кількість цих представників фауни зустрінуте в опадах західній частині озера (бухта Тиха) на глибинах до 10 м. Джерелом кальциту теригенно походження можуть служити карбонатні породи, що входять до складу моренних відкладень [15].

Великий інтерес викликає високий вміст в опадах органічного вуглецю. Його концентрації коливаються від 0,5% у пісках до 26% в мелкоалеврітових мулах. Джерелом органіки в опадах озера є головним чином рослинний детрит. Як показують багаторічні спостереження, на Віштинецьке озері відбувається поступове заростання водоростями західної, мілководній частині водойми. Можна припустити, що причиною цього процесу є інтенсивна евтрофікація водойми за рахунок надходження сполук фосфору і азоту з бухти Тихої. У північному затоці бухти в 60-ті - на початку 70-х рр.. розміщувалася качина ферма ("утятнік"). Органічні залишки, накопичені у великих кількостях в затоці, є, мабуть, джерелом азотовмісних і фосфоровмісних сполук, які не тільки надходять в бухту Тиха, але і збагачують води озера, перш за все його західній частині. На зростанні маси водної рослинності позначився також факт різкого скорочення біомаси риб у водоймі, зокрема рослиноїдних. Зменшення чисельності даних представників іхтіофауни обумовлено неконтрольованим промислом риби в озері жителями як Калінінградській області, так і Литви, широким поширенням браконьєрства протягом останніх років [15].

Основним джерелом донних опадів Віштинецьке озера є несортоване грубий моренний матеріал з прошарками піску, укладений у льодовикових і водно-льодовикових відкладах, широко поширених в басейні озера. У улоговині озера видна чітка залежність розподілу донних відкладень різної крупності від рельєфу дна: глибокі западини зайняті тонкодисперсними опадами, біля берегів поширені піски. Найбільша площа дна зайнята мелкоалеврітовимі илами [15].

Тільки п'ять з дванадцяти впадають в озеро струмків мають стік цілий рік. Сумарна витрата цих струмків - близько 4 м ³ / с. Решта струмки в сухі літні місяці пересихають або не мають стоку взимку. У південну частину озера дві невеликі річки, що беруть початок у Польщі. Їх сумарний витрата не більше 1 м ³ / с.

Сток озера здійснюється через р.Піссу, яка з'єднує оз. Віштенецкое з р. Преголя. Таким чином, оз. Віштинецьке відноситься до поздовжньо-осьовому типу проточності. Це означає, що майже вся його площа, за винятком Західного затоки, є активною зоною, в якій здійснюється перенесення вод в генеральному напрямі з півдня на північ. Однак швидкість постійного течії у всьому водоймі, крім пригирлових ділянок р. Пісса, мала - нижче порога чутливості морської вертушки (1-2 см / с). Тим не менш численні спостереження за температурою води і основними гідрохімічними характеристиками показують, що це вдольосевое переміщення вод існує, але охоплює в основному верхній шар до 10-15 м. тобто до глибини порога, що розділяє північну і південну частини улоговини [15].

Швидкість вітру 2-5 м / с має найбільшу повторюваність над озером Віштинецьке (від 52 до 64%) протягом всіх місяців. Повторюваність вітру зі швидкістю 0-1 м / с складає 21 - 40%; 6-10 м / с - 5-17%; сильні вітри (швидкість більше 11 м / с) мають повторюваність від 0 до 2%. За направленням в середньому за рік у районі оз. Віштинецьке переважає південно-західний вітер (повторюваність 25-40%). Крім того, вітри цього напрямку найчастіше зустрічаються в липні - вересні (повторюваність 40-60%) і в грудні (повторюваність 25-40%). У лютому - березні та в жовтні - листопаді вітер спрямований переважно з півдня (від 20 до 60% випадків), у січні та квітні - в основному з південного сходу (від 25 до 50% випадків), у червні - із заходу (40 - 50%), у травні - зі сходу (40-50%) [5, 15].

Вода в центрі озера відрізняється досить високою для малих водойм величиною умовної (відносної) прозорості - до 6-8 м. Ця величина піддається значним коливанням як за площею озера, так і в часі. Найбільш низька прозорість - менше 1 м (у вегетаційний період) у Західному затоці. У відкритому озері максимальна прозорість зазвичай спостерігається в північній улоговині, в південній вона, як правило, менше. Колір води переважно зеленуватих-зеленувато-бурих тонів [15].

Термічні процеси в озері розвиваються за класичною схемою, характерною для прісноводних глибоких водойм. Взимку температура води з глибиною зменшується від значень близьких до температури замерзання води біля поверхні до приблизно 4 ° C в придонних горизонтах, тобто складається зворотна стратифікація (розшарування). На початку весни, у міру прогрівання води, температура води в озері в результаті вітрового і конвективного перемішування стає у всій товщі однаковою (близькою до 4 ° C), тобто встановлюється весняна гомотермія. Влітку формується шар води з великим, до 2,5 град / м, вертикальним градієнтом температури. Шар стрибка ділить водну товщу на три шари: епілімніон (верхній, розташований над шаром стрибка), середній (металімніон) - сам шар стрибка і гіполімніон (нижній, під шаром стрибка). Під шаром стрибка температура води влітку не буває вище 8-9 ° C, опускаючись в придонних горизонтах до 6 ° C і менш [15,68].

Близько чотирьох місяців у році озеро покрите льодом. Товщина льоду в лютому може доходити до 40-45 см, в березні - до 30-35 см. Однак тривалість льодоставу і товщина льоду залежать від суворості зими і погодних умов кожного конкретного року [15].

Води озера - маломінералізовані гідрокарбонатно-кальцієві, другого типу (тобто зміст гідрокарбонат-іонів менше суми змісту іонів кальцію і магнію), оліготрофні з деякими рисами мезотрофні. На розподіл всіх основних гідрологічних показників великий вплив мають циркуляція вод, стратифікація, згінно-нагінні процеси [15].

Біомаса зоопланктону та зообентосу відповідає ступеню трофності водойм. Так, в оліготрофному Віштинецьке озері цей показник має найменше значення. У мезотрофні озерах Маринове та Острівне біомаса зростає. Ще вища вона в евтрофних озерах очеретяних й Боровикове (за винятком біомаси зоопланктону в Боровикове, що пов'язано зі специфікою його гідрологічних умов) [15].

Зміна числа видів гідробіонтів в цілому теж відображає закономірності ходу сукцессіонного змін в озерах різного трофічного статусу. У оз. Віштинецьке спостерігається найбільша різноманітність видів, що включає релікти льодовикових водойм, представників бореальної-передгірного та бореальних-рівнинного комплексів. У Маринове та Острівному, в Камишовій та ін озерах число видів скорочується; виняток становить оз. Боровикове, де виявлена ​​найбільша кількість видів хірономід. У цих водоймах живуть типові представники бореальної-рівнинного комплексу [15].

1.4 Основні функції крові в організмі риб

Кров - це рідка рухома тканина, що циркулює в кровоносних судинах і найважливіша частина внутрішнього середовища організму, що виконує різноманітні фізіологічні функції:

- Живильну (трофічну) - при русі крові відбувається перенесення поживних речовин від органів травлення до тканин;

- Дихальну - з кров'ю переносяться гази - кисень до тканин і вуглекислота до органів дихання;

- Видільну - кров виносить з тканин і переносить до органів виділення кінцеві продукти обміну речовин при цьому хімічний склад крові значною мірою відображає обмін речовин;

- Регуляторну - з допомогою крові від залоз внутрішньої секреції до органів і, тканинам доставляються гормони та інші біологічно активні речовини, що здійснюють гуморальну взаємодія між органами і тканинами;

- Захисну - в дах містяться різні протимікробні і антитоксичні речовини (лізоцим, пропердин, комплемент, інтерферон). У відповідь на надходження в організм збудників різних захворювань у крові утворюються антитіла [50, 61].

1.5 Органи, що у процесі кровотворення

Дослідження органів, які беруть участь у гемопоез риб, дозволило встановити якісний склад та структурні особливості клітин крові на всіх етапах розвитку. Кровотворення як процес гістогенезу є відповідною реакцією ряду тканинних систем організму риби на зміну як зовнішніх, так і внутрішніх факторів [26, 39].

Кровотворення у риб специфічно не тільки по інтенсивності, але і по локалізації процесу. У риб відсутній червоний кістковий мозок - основний орган кровотворення вищих хребетних. У риб функцію гемопоезу виконують інші органи. До них відносяться: зябра, кишечник, серце. Але найбільш активно кровотворення відбувається в лімфоїдних органах, нирках і селезінці [26, 48].

Важливе місце в процесі утворення білої крові відводиться тимусу та лімфоїдних органів. Тимус має різне розташування та морфологію у різних видів риб. На відміну від ссавців тимус у риб функціонує все життя. Він має корковий і мозковий шар. Мозковий шар відповідає за утворення Т-лімфоцитів.

Лімфоїдний орган являє собою скупчення лімфоїдної тканини і знаходиться у осетрових риб під дахом черепа. На гістологічних зрізах лімфоїдного органу завжди присутні нейтрофіли, еозинофіли, базофіли, тромбоцити і навіть незрілі еритроцити, тобто лімфоїдний орган причетний до процесу формування всіх клітин крові [14, 39].

З літературних даних як радянських, так і зарубіжних гематологів випливає, що в кровотворенні риб особливе місце займають нирки. Нирки у риб виконують не тільки видільну, як у інших хребетних, але і кровотворну функцію. У більшості риб підвищена кровотворна активність зафіксована в каудальної і головний частинах нирки [26, 62].

У костистих, як, втім, і у хрящових, в результаті розвитку стінки подкішечной вени утворюється селезінка. На перших етапах розвитку відбувається активний розподіл клітин. Потім через низку поступових переходів у сформованому синцитії утворюються перші клітини крові [26].

За дослідженнями А.П. Скворцова селезінка пристосована не тільки до функції кровотворення, а й руйнування, і фагоцитозу. На думку автора, останнє, найбільш яскраво виражені [26].

І.І. Шмальгаузен, А.А. Заварзін, А.А. Заварзін і С.С. Щелкунов [цит. по 26] стверджують, що селезінка риб і амфібій служить органом гемопоезу, в ній виробляються еритроцити і вона скоріше нагадує кістковий мозок, ніж селезінку хребетних. А.А. Максимов, А.А. Заварзін і багато інших вважають селезінку основним органом ерітротромбопоеза, що не цілком узгоджується з думкою М.Т. Іванової, яка вважає, що в селезінці здійснюється і лімфогранулопоез [26].

Так, встановлено, що зябровий апарат у сучасних сетрових і костистих риб, будучи прикордонним органом, поряд з дихальною і іншими функціями бере участь і в кровотворенні. Гемопоез в цьому органі здійснюється за рахунок не тільки ендотелію судин, а й малодиференційованих, вільно лежачих клітин ретикулярного синцитію. Останній зосереджений в області зябрових дужок біля основи зябрових пелюсток [7, 26, 39].

Розглядаючи зябровий апарат як орган, який бере участь у кровотворенні, слід підкреслити, що з епітелію спинний частини зябрових мішків розвивається ще один орган ендокринної системи риб - вилочкова залоза (зобна). Вона складається з сполучнотканинної строми і лімфоцитів, укладених в епітеліальну капсулу. Зверху залоза покрита щільною сполучною тканиною. У різних представників класу костистих риб він функціонує все життя. Під час метаморфоза тимус сильно збільшується за рахунок розростання сполучнотканинної строми і лімфоцитів [26].

До останнього часу функція цього органу не була достатньо вивчена навіть у вищих хребетних і людини. Особи з сильно розвиненою зобної залозою завжди вважалися найбільш міцними, з досконалим зростанням [26].

Під час метаморфоза заліза сильно збільшується, в неї вростають сполучна тканина, кровоносні судини, і вона поділяється на дві лопати. До кінця метаморфоза в ній можна розрізняти корковий і мозковий шари. Лімфоцити зосереджені в основному в мозковому шарі. Пізніше заліза ділиться на частини і обростає жировою тканиною [26].

Вихідним матеріалом у формуванні інших відділів травної трубки так само, як і її глоткового апарату, в області якого знаходяться зябра, служить ентодермальний платівка. Складність гістологічної структури досліджуваних відділів травного тракту обумовлена ​​не тільки травної, але і гемопоетичних функцією [26].

Внутрішня прикордонна зона системи органів вистелена слизовою оболонкою. До складу цього шару входять елементи рихлою і ретикулярної тканин. У цьому шарі знаходяться підепітеліальному лімфоїдні скупчення як фолікулярних утворень. Лімфатичні фолікули представляють собою осередкові освіти кровотворної тканини, здатної до постійного продукування формених елементів крові. У слизовій кишечника риб підепітеліальному лімфатичні ділянки, безсумнівно, є свого роду резервуарами, за рахунок яких відбувається постійне поповнення формених елементів білої крові, переважно агранулоцитам, в тому числі лімфоцитів, які в основному витрачаються при виконанні як захисної, так і ферментативної функцій. Говорячи про захисної ролі аналізованих органів, слід особливо підкреслити, що у риб всякий прикордонний орган безвідносно до спеціальної функції, якщо судити по складу формених елементів крові, несе і функцію захисту [26].

Центральний орган кровообігу костистих риб - серце - розвивається з проміжної маси, що відокремилася від спинного соміт. З неї в першу чергу формуються серце і кровоносні судини, по яких спочатку тече безбарвна кров, позбавлена ​​клітин. Тільки через деякий час з'являються формені елементи крові. Джерела розвитку формених елементів крові і взаємовідношення клітин крові поки вивчені слабко. Лише спільність походження всіх формених елементів крові з єдиного джерела є загальновизнаною [8, 26].

Основну масу серця становить міокардит. Цей м'язовий шар складається з поздовжніх і радіально розгалужених м'язових поперечносмугастих пучків. Внутрішні порожнини шлуночків і передсердь вистелені ендокардит, до складу якого входять найтонші еластичні волокна і клітини одношарового плоского епітелію, що становлять основну масу внутрішньої вистилки серця [26].

Епітеліальний шар серця і ендотелій судин служать джерелом утворення клітин крові в цій системі органів. Поверхневий шар - епікарді - складається із сполучнотканинних еластичних волокон і клітин плоского епітелію. У осетрових на вентральної стороні серця розташований перикардіальний орган, що представляє собою плоске лопатеві освіта, засіяне горбками - фолікулярними вузликами, що містять формені елементи крові. У момент дослідження ці лімфатичні вогнища гемопоезу щільно були заповнені лімфоцитами [26].

Клітинний склад мазків крові серця представлений переважно лімфоцитами, однак зустрічаються й інші категорії клітин. Судячи з якісного складу формених елементів крові, серце паралельно з основною роботою виконує і гемопоетичних функцію [26].

Найбільш активний гемопоез у канального сома, коропа, верховки, плотви, окуня, язя і лина відбувається в периферійній частині нирок. Інші автори вказують на актівност' гемопоезу в передньому відділі нирок. За даними Іванової М.Т. [26], у кровотворенні бере участь і каудальна частина нирки.

Розглядаючи гемопоез слід зазначити, що про нього немає єдиної думки. Так, одні дослідники вважають, що крім другорядних основними органами кровотворення у риб є нирки. Інші віддають перевагу селезінці. І.М. Остроумова (1957) склала досить наочну зведення про гемопоезу у риб за матеріалами різних авторів. З наведених даних випливає, що одні автори місцями освіти формених елементів крові вважають нирки, інші - селезінку, треті - нирки і селезінку. При цьому треба відзначити, що жоден з авторів крім нирок і селезінки, не відзначають у риб наявності інших органів гемопоезу або структур у вигляді оформлених скупчень кровотворної тканини типу лімфоїдного органу, тимуса, псевдобранхіі та ін [26].

При такому розподілі вогнищ гемопоезу у риб, мабуть, досягається необхідне для життя відповідність між рівнем діяльності осередків гемопоезу і задоволенням потреб організму, перш за все в кисні. У зв'язку з цим стає зрозумілою і гемопоетичних функція селезінки, кишечника, зябер і головного відділу в цілому [26].

Всі клітини крові мають єдине походження від гемоцітобласта. Дозрівання окремих форм лейкоцитів протікає в лімфоїдної тканини травної трубки, лимфоидном органі, тимусі. Дозрівання тромбоцитів, швидше за все, відбувається в селезінці [12].

Інтенсивність гемопоезу залежить від зовнішніх і внутрішніх факторів. Так, при дефіциті кисню спостерігається посилення еритропоезу; знижена температура води і її забрудненість органічними речовинами стимулюють лейкопоез за рахунок фагоцитуючих форм. Інфікування риби, крім фагоцитозу, підсилює і морфогенез лімфоцитів [25, 39].

Зміст формених елементів крові в органах, досліджених на гемопоез, в судинній крові і розподіл по класах свідчать про те, що поряд з основними функціями в них здійснюється нормальний процес гемопоезу за рахунок кровотворної тканини, що входить до складу гістоструктури цих органів. Основна маса клітин припадає на частку зрілих елементів, пристосованих до виконання специфічних функцій. У риб переважною формою клітинних елементів завжди є лімфоцити, нерідко становлять 90% і більше. У період активного харчування різко зростає кількість гранулоцитів [25, 39].

1.6. Склад, загальні властивості крові та причини зміни її складу

Кров - непрозора маслянистої консистенції на дотик рідина яскраво-червоного кольору, що складається з двох частин: плазми та формених елементів. Як і в інших тварин, кров риб ділиться на циркулюючу і депонуючу. Роль депо крові у них виконують нирки, печінка, селезінка, зябра і м'язи. Розподіл крові по окремим органам неоднаково. Частка крові у відсотках від усього обсягу крові в організмі риб висока в нирках і судинах (до 60%), білих м'язах (16%), зябрах (8%), червоних м'язах (6%). Депонована кров майже не змішується з циркулюючої [3, 10, 39].

При необхідності збільшення кількості циркулюючої крові відбувається за рахунок, що викидається крові з депо. Значення депонування крові полягає в тому, що при зменшенні кількості циркулюючої крові завдяки її застою в депо падає навантаження на серце під час спокою організму. А при крововтратах, задуха, вдиханні вуглекислого газу, стресі - у випадках необхідності в екстреному збільшенні кількості циркулюючої крові, рефлекторно відбувається її викидання з депо в кров'яне русло [13].

Необхідно врахувати, що депонована кров, в силу механічних причин і всмоктування води з плазми в тканини, містить більше формених елементів, ніж циркулює кров. Тому надходження депонованої крові в загальне кров'яне русло викликає не тільки абсолютне, а й відносне зростання в крові кількості еритроцитів і гемоглобіну [13].

Морфологічний і хімічний склад крові змінюється при подразненні хеморецепторів кровоносних судин продуктами обміну речовин. Рефлекторні зміни складу крові відбуваються і при подразненні интерорецепторов травного каналу (травний лейкоцитоз) [11, 13].

При подовженні світлового дня збільшується загальна кількість білків у плазмі, при цьому одночасно збільшується кількість альбумінів і знижується кількість глобулінів. Склад крові змінюється також нервово-гумморальним шляхом, наприклад, при вступі гомону адреналіну та ін [13].

Навіть всередині одного виду можливі багаторазові зміни кількісного складу крові, які можуть бути викликані факторами зовнішнього середовища і фізіологічним станом риби [3].

Істотний вплив на характеристику червоної крові надає зимівля риб. Загальна кількість гемоглобіну за зиму може знизитися на 20%. Однак, у весняний період еритропоез настільки активізується, що показники червоної крові відновлюються до осіннього рівня за 10-15 днів нагулу. У цей час у крові риб можна спостерігати підвищений вміст незрілих форм усіх клітин [3].

Збільшення кількості незрілих форм еритроцитів пов'язано з сезонним посиленням обміну речовин, крововтратами, а також з віковими та статевими особливостями риб. Так у виробників спостерігається 2-3-кратне збільшення незрілих еритроцитів у міру дозрівання гонад, що досягає 15% у самців перед нерестом [3].

Протягом життєвого циклу лейкоцитарна формула змінюється під впливом фактів зовнішнього середовища. Під час нересту знижується кількість лімфоцитів на користь моноцитів і поліморфноядерних клітин [3].

Погіршення умов утримання риби (гіпоксія, бактеріальна та хімічна забрудненість водоймища, голодування) проводить до збільшення фагоцитуючих форм. Таким чином, за фізіологічну норму слід приймати показники риб, вирощених у хороших умовах [3].

1.7 Формені елементи крові та їх значення

Кров - це рідка тканина, тому її клітини не з'єднані один з одним. Серед клітин крові риб розрізняють три основних типи - еритроцити, лейкоцити і тромбоцити [39].

Еритроцити. Еритроцити дорослих риб мають еліптичну форму, а у молоді вона округла. У центрі еритроцита є ядро, що має овальну форму. Завдяки наявності ядер еритроцити риб мають більш високим рівнем власного обміну, час їх життя в нормі дуже довго - може перевищувати рік. Розміри еритроцитів риб в основному більше, ніж у вищих хребетних. У хрящових риб еритроцити більше, ніж у костистих. При нормальних умовах еритроцити знаходяться в кровообігу близько 120 днів. Оболонка еритроцитів за структурою не відрізняється від оболонок інших клітин і є тришаровою. Зовнішній шар складається з білка глікофорину, який пропускає речовини з плазми крові всередину клітини. На внутрішній стороні оболонки перебуває спектрин - інший значущий білок. Його основна роль полягає у збереженні форми еритроцита і здатності змінювати її на 3-4 мкм при проходженні через капіляри, з подальшим відновленням вихідного обриси. Структура спектрина близька до структур актоміозіна, що обумовлює скорочення м'язів, і тромбостеніліна, відповідального за ретракція створюваного тромбоцитів згустку. До спектрин приєднується і молекула АТФ, яка витрачається у великій кількості при роботі натрієвого насоса, що споживає більше 50% вироблюваної в еритроциті енергії. Всередині цієї тонкої, у дві молекули, тришарової оболонки перебувають гранули гемоглобіну [21, 26].

Перша основна функція еритроцитів полягає в поглинанні кисню в зябрах і перенесення його в капіляри тканин і в поглинанні вуглекислоти в капілярах тканин і доставка її в зябра. Ця функція виконується гемоглобіном. Проникнення газів з еритроцитів у тканини і з тканин в еритроцити забезпечується тим, що еритроцити у слідстві малого діаметра капілярів проштовхують через них поодинці і тим, що в капілярах струм крові різко уповільнений. На першій фазі вони несуть неповну навантаження гемоглобіну; дозрівання завершується за один-три дні, протягом яких клітини безвідмовно виконують функцію переносу кисню. У другій фазі зрілий еритроцит переносить кисень в одному напрямку, а вуглекислий газ - в зворотному, повністю виконуючи свою функцію. На третій фазі, при зниженні ефективності їх функції, вони підбираються макрофагами, відкриваючи шлях молодим клітинам, які укладають функціональний цикл [13, 21].

Друга дуже важлива функція еритроцитів полягає в тому, що вони грають найголовнішу роль у збереженні активної реакції крові. Ця функція також виконується гемоглобіном

Третя функція еритроцитів - підтримка іонного складу крові.

Четверта функція еритроцитів - їх участь у водному і сольовому обміні.

Крім того, еритроцити здатні адсорбувати токсини, гормони й продукти розщеплювання білків і, внаслідок вмісту в них ферментів брати участь у ферментативних процесах розщеплення білків, жирів і вуглеводів [13].

Лейкоцити. Лейкоцити - це білі кров'яні тільця. Кількість лейкоцитів у риб коливається від десятків до сотень тисяч в 1 мкл. Кількість їх коливається у великих межах і залежно від віку, статі, стадії статевої зрілості, вгодованості, захворювань, сезону року, температури середовища. Кількість лейкоцитів може різко змінюватися в межах одного виду, навіть у однієї риби в різні періоди життя [3].

Лейкоцити діляться на гранулоцити, що містять в цитоплазмі особливу специфічну зернистість - нейтрофіли, еозинофіли, базофил, і агранулоцитам, цитоплазма яких не містить зернистості, гомогенна - моноцити, лімфоцити [39].

Переважаючими клітинами білої крові риб є лімфоцити, які складають до 95% всіх лейкоцитів. Більша кількість лейкоцитів у крові судинної риб, а також досить швидкі зміни складу їх свідчать про більшу захищеності водних організмів, у порівнянні з наземними хребетними тваринами, від різних патогенних мікроорганізмів, яких на одиницю об'єму води доводиться значно більше, ніж на ту ж одиницю об'єму повітря [3, 21].

Лейкоцити живуть від 2-4 до 12-15 днів. Їх головна функція - захист (фагоцитарна) організму від заразних мікробів і отруєнь [13].

Нейтрофіл. Діаметр цих клітин у риб від 5,5 до 7,5; у вищих хребетних 9,5-14,3 мкм. Цитоплазма слабо базофильная, містить дрібні гранули, які фарбуються (за Папергейму) у сіро-блакитний колір, досить часто утворює виступи [21].

Ядро у вигляді витягнутого в більшій чи меншій мірі валика залежить від віку клітини. - образно изогнут или разделен на три и более сегмента, соединенные тонкими перемычками. Валик іноді S - образно перекручений або розділений на три і більше сегмента, з'єднані тонкими перемичками. Дозрівання нейтрофіла супроводжується поступовим ущільненням ядра, при цьому хроматин укрупнюється і концентрується в оболонки. Нарешті, утворюються сегменти, добре проявляється специфічна нейтрофільна зернистість [21].

Нейтрофіли можуть містити у своїй цитоплазмі різні включення у вигляді зерняток глікогену, найдрібніших крапельок жирових та ін Це показує, що нейтрофіли мають певне відношення до внутрішнього обміну (те ж можна сказати і про інші види зернистих лейкоцитів) [21].

Функціональна активність циркулюючих нейтрофілів постійно змінюється. Володіючи максимально вираженою руховою активністю, вони періодично виходять за межі кровотоку, куди більше не повертаються і переходять у тканину. Тут вони фагоцитують мікробів, перетравлюють їх, а також продукти розпаду клітин. Основною функцією нейтрофілів є, таким чином, захист організму від інфекції і одночасно - від токсичних впливів. Нейтрофіли виробляють ферменти бактерицидної дії. У той же час вони не здатні виробляти антитіла, але, адсорбуючи їх на своїй оболонці, доставляють до вогнищ інфекції. Функція цих гранулоцитів не обмежується фагоцитозом і перенесенням антитіл. У процесі життєдіяльності нейтрофіли виділяють ряд речовин, що володіють широким спектром дії. Одні речовини підвищують бактерицидну активність клітин, покращують регенерацію тканин, підсилюють рухову активність. Зрілі сегментоядерние нейтрофіли є спеціалізованими клітинами. Вони служать каталізаторами багатьох ензиматичних реакцій. Характерно, що нейтрофіл всі функції починає виконувати щодо зрілим, на стадії паличкоядерних форм. А завершується формування всіх внутрішньоклітинних структур, що забезпечують життєдіяльність клітини, лише на етапі зрілого сегментоядерние нейтрофіла. На його оболонці збільшується кількість активних груп, що несуть негативний заряд. На поверхні клітини формується рецепторна система, що забезпечує хемотаксис [21].

Сегментоядерние нейтрофіли - клітини, форма ядер яких різноманітна через те, що число сегментів неоднаково в різних клітинах. Окремі сегменти з'єднуються тонкої перемичкою або лежать особливо.

Юні нейтрофіли майже не відповідають на хемотаксичні стимули, вони насилу змінюють свою форму, але володіють здатністю до проліферації. Як встановлено, у кровотворних органах численні депоновані зрілі нейтрофіли, незважаючи на майже повну морфологічну завершеність, свого функціонального якості не досягають. Мабуть, їх «дозрівання» відбувається при виході в циркулюючий струм крові, де концентруються найбільш зрілі форми. Все це вказує на те, що в крові триває диференціювання нейтрофілів і що вони поступово старіють. Найстарішими є клітини з найбільш часточковими ядрами [21].

Нейтрофіли, як і інші гранулоцити, - це спеціалізовані клітини, які втратили здатність до поділу.

При патологічних станах організму нейтрофіли виділяють у кров речовини, що володіють бактерицидними і антитоксичні властивості, можуть надавати стимулюючу дію на процеси регенерації у різних органах і тканинах, здійснюють фагоцитоз імунних комплексів антиген-антитіло [21].

Нейтрофіли, будучи найбільш реактивними клітинами крові, високочутливі до різноманітних змін внутрішнього середовища, які супроводжують порушень гомеостазу в багатьох системах організму.

Всі перелічені форми гранулоцитів розвиваються у риб ще в ембріональний період. На стадії появи у зародка пігментації в очах йде активний процес проліферації цих клітин, що підтверджується частим присутністю на мазках різних ядерних фігур мітозу. До виклева їх кількість значно зростає. Вони відрізняються не тільки морфологічно, але і функціонально.

Еозінофіла. Еозинофіли - спеціалізовані форми, в основному, правильно округлі клітини різного розміру. У осетрових діаметр найбільш великих клітин коливається від 10 до 13, дрібніших - від 7,5 до 9 мкм [21].

У багатьох видів костистих риб діаметр еозінофіла від 8 до 10 мкм, хоча у коропа він менше - від 5,5 до 6,5 мкм. У вищих хребетних розмір еозинофілів значно більше - від 9,0 до 22,0 мкм [21].

Цитоплазма їх слабо базофильная, з блакитним відтінком. Компактне ядро розташоване ексцентрично. У риб воно іноді двохсегментній або багатолопатеве, нагадує лист клена. Ядра еозинофілів відрізняються різноманітністю, що відображає віковий стан клітин. Ускладнення форми ядра вказує на «дорослішання» клітини, далі - старість або хвороба [21].

Велика зернистість еозинофілів має яскраво вираженої ацидофіли. Серед риб гранули цих клітин мають найбільшу величину у осетрових і пофарбовані у них в яскраво-оранжевий або жовтий колір. У костистих риб гранули забарвлюються АЗУР-еозином в червонувато-рожевий колір. У процесі поезії, завдяки появі в цитоплазмі специфічної зернистості, першою морфологічно помітною клітиною є проміелоціт. Однак еозінофілопоез має попередниць, які, мабуть, проходять стадії більш ранніх бластних форм-міелобпастов. До цих пір немає повної ясності, на якому рівні клітина набуває здатність диференціюватися в еозинофільному напрямку [21].

За основними функціями гранули еозинофілів можуть розглядатися як лізосоми. Активність ферментів у міру дозрівання еозинофілів зростає: збільшується кількість ензимів, пероксидази, глікогену, ліпідів і інших внутрішньоклітинних речовин. Сама клітина набуває здатності до амебоидному переміщенню і фагоцитозу (еозинофільні проміелоціти НЕ фагоцитують), об'єктом якого є не тільки бактерії, але і імунні комплекси і продукти розпаду тканин. Фагоцитоз не є основною функцією еозінофіла. Припускають, що ці гранулоцити можуть адсорбувати багато токсичні продукти білкової природи і руйнувати їх. Вони не володіють здатністю синтезувати антитіла, але адсорбують антигени і переносять їх у кровотворні органи. У якійсь мірі еозинофіли мають відношення і до процесу згортання крові, синтезуючи профібринолізином [21].

У риб, у міру дозрівання особин, кількість еозинофілів у крові збільшується. Але основні функціональні властивості цих клітин реалізуються, як і для більшості лейкоцитів, не тільки в струмі крові, але і поза ним - у периферичних тканинах. При цьому хемотаксис гранулоцитів викликається сполуками, які виділяються лімфоцитами [21].

Кількість еозинофілів - клітин екстремального реагування - протягом доби змінюється і різко реагує на зміну абіотичних факторів середовища. Так, відхилення температурного і сольового режимів води від оптимальних умов призводять у риб до збільшення кількості цих клітин. Нарощується їх зміст і при ураженні риби вибуховою хвилею.

Частка еозинофілів серед клітин білої крові зростає під впливом важких металів. У процесі прояву алергії - базової захисної реакції - на перших її стадіях відбувається нарощування цих гранулоцитів. У той же час, при хронічних стресах і важких випадках токсикозів у риб спостерігається еозінофілопенія [21, 27].

Базофіли. Також є спеціалізованими, не здатними до розмноження формами. Цей вид клітин - найрідше зустрічається популяція гранулоцитів у периферичній крові та кровотворних органах, що надзвичайно ускладнює їхнє дослідження. Належність до базофілам виявляється по наявності специфічних для них гранул, що мають властивість метахроматіческой забарвлення. Зернистість характеризується нерівномірністю за величиною і розподілу в цитоплазмі [21, 27].

Клітка базофил округла. Ядро у риб округле, розташоване ексцентрично, але у різних тварин форма ядра інша. Через численності гранул, які заповнюють цитоплазму, ядро погано проглядається. Гранули мають вигляд великих базофільних зерен, АЗУР-еозином фарбуються в темно-синій з червоним відтінком колір. За рахунок їх деякого виходу з клітки її контури здаються трохи «розпатланим» [21].

Базофіли, як і еозинофіли, мають деякий добовий ритм: найбільша їх концентрація в крові відзначається вночі, найменша - вранці. Напівперіод знаходження цих клітин у крові становить менше п'яти годин. Взагалі ж, тривалість життя базофілів в периферичному руслі не визначена, як, втім, і подальша їх доля [21].

Базофіли відрізняються вкрай повільної рухливістю і здатністю до фагоцитозу (ця властивість не є для них провідним). Вони захоплюють частинки зруйнованих еритроцитів, утворюючи при цьому фагосом. Сенсибілізовані базофіли в фагосом виділяють вміст гранул. Базофіли можуть впливати на процес згортання крові, активізують його за рахунок містяться в них, або викликають гипокоагуляцию крові. При дегрануляції базофілів звільняються фактори аглютинації тромбоцитів.

За рахунок гепарину, що міститься в цих гранулоцитах, базофіли можуть надавати протилежний ефект на систему згортання. Ці клітини досліджуються при вивченні жирового обміну [21].

У риб ті чи інші зміни хімічного складу води приводять до грануляції зерен у базофілах. Так, у коропа при недостатньому надходженні кальцію із зовнішнього середовища і тривалому впливі несприятливого чинника виявлено клітини з дисфункцією базофільних гранул, що свідчить про участь базофілів у фагоцитозі [21].

Моноцити. Це клітини білої крові, яким присвячена велика і досить суперечлива література. Погляди на їх походження, життєвий цикл, взаємозв'язок і взаємовідносини з іншими клітинами багаторазово змінювалися. Назва була запропонована Паппергеймом і Феррадо [21].

Моноцити - незерністие лейкоцити - виявлено в усіх досліджених риб. Цей один із самих великих елементів периферичної крові (15-20 мкм) морфологічно добре відділяється від інших клітинних структур. Цитоплазма, позбавлена ​​гранул, слабобазофільная. За Папергейму вона забарвлюється в сіро-блакитний, серосіне-ліловий колір світлих відтінків. Ядро велике, бобовидной форми або овальне, розташоване ексцентрично. У незрілих форм клітина округла, ядро стійкою ніжною структурою хроматиновой «мережі». Зрілі моноцити можуть мати неправильну форму. Чим клітина старше, тим грубіше структура ядра. Цитоплазма старих клітин має вакуолі, які надають їй вид лени (піниста). Моноцити - активні фагоцити крові - поглинають не стільки бактерії, скільки продукти розпаду клітин і тканин. Збільшення кількості цих клітин у крові свідчить про підвищення захисних сил організму. В позаклітинне середовище вони постійно секретують лізоцим, що накопичується в них у міру дозрівання моноціта. Лізосом приписується вирішальна роль у здійсненні внутрішньоклітинної загибелі інфекційних агентів та їх переварюванні [21].

Виробляючи антитіла, моноцити беруть участь не тільки в регуляції імуногенезу, але і в регуляції гранулопоеза.

Існує також думка про здатність моноцитів інактивувати токсини. Вони містять спеціальні ферменти для дезінтоксикації деяких речовин.

Моноцити, мігруючі в тканини, дають початок макрофагам сполучної тканини (гістіоцитам), ряду органоспецифічних макрофагів - клітин Купфера печінки, альвеолярним макрофагам легкого, макрофагам кісткового мозку, селезінки, тимуса, лімфатичних вузлів, порожнин тіла, центральної нервової системи (мікроглії), остеокластів. За певних умов (у вогнищах запалення) моноцити також можуть трансформуватися в макрофаги [21].

Для риб цитохімічним шляхом встановлено, що макрофаги є похідними моноцитів. Потрапляючи з кровотворного органу в кров, частина моноцитів зберігає здатність до проліферації. У результаті відбувається диференціювання моноцитів у бік макрофага [21].

Проте припускають, що і спеціалізованих макрофагів в тканинах, здатних до поділу, недостатньо для підтримки їх популяції. Здійснюється це шляхом постійного припливу моноцитів з крові та їх перетворення на макрофаги.

Низький відсоток моноцитів у лейкограмме не завжди є ознакою благополуччя. Вони можуть концентруватися в осередках запалення, трансформуючись тут у макрофаги, що часто спостерігається при тривалому впливі несприятливих факторів середовища [21].

Лімфоцити. Це порівняно невеликі клітини округлої і кілька неправильної форми - у риб від 5 до 12 мкм більшу частину яких займає ядро.

У молодих форм тонка хроматиновой структура його забарвлена ​​в блідий фіолетово-рожевий колір; цитоплазма синя, перинуклеарних зона добре виражена. У зрілих клітин ядро округле, іноді спостерігається невелика інвагінація, хроматин ущільнений, але не однорідний, має на грудочки структуру. У цитоплазмі часто відзначаються виступи і впячивания. Нерідко вона утворює вузький обідок навколо ядра, який іноді взагалі як би відсутній. У нижчих хребетних така клітина отримала назву голоядерних. Це стан характерний для малих лімфоцитів. Крім них, зустрічаються ще великі і середні лімфоцити, а також бластні клітини, які формуються в результаті трансформації малих. (Згідно унітарної теорії, створеної великим російським ученим А. А. Максимовим, малому лімфоцити взагалі надається значення родоначальної клітини, яка є єдиною для всіх паростків крові). Виключено зворотне перетворення бластної клітини в малий лімфоцит [21].

У середніх і великих лімфоцитів ободок цитоплазми трохи ширше, ніж у малих, а в ядрі хроматин менш щільний, з більш вираженими ядерцями, добре помітна перинуклеарних зона. Лімфобластів характеризується чіткою базофілів. Цитоплазма рясніша, структура ядерного хроматину рихла.

У риб малі лімфоцити - єдиний тип білих клітин, регулярно й у великій кількості зустрічаються в крові. Саме вони надають крові лімфоїдний характер. Ця численна група неоднорідна морфологічно і функціонально. Бувають випадки, коли у вузькому обідку їх цитоплазми, позбавленої, як правило, зернистості, проглядаються азурофільних гранули, які приймаються за ліполітичні ферменти [21].

При патологічних випадках зустрічаються лімфоцити двох-і трьох ядерні. Відзначається їх сферуляція - процес, що носить оборотний характер

Особлива увага приділяється вивченню функціональної активності лімфоцитів. Це пов'язано стій істотною роллю, яка належить цим клітинам в реалізації імунологічних реакцій організму. Спеціалізовані лімфоцити (Т-і В-лімфоцити, що розрізняються за місцем свого «народження»), що виконують цю функцію, морфологічно невиразні. У крові циркулюють лімфоцити, що знаходяться у всіх стадіях диференціювання і походять від різних лімфоцітопроізводящіх органів. Проте діяльність їх усіх без винятку спрямована на «патрулювання» організму за допомогою імунологічного нагляду.

Цікаво, що нащадки лімфоцитів мають властивість імунної пам'яті. Хоча в реакціях клітинного імунітету участвуюв основному лімфоцити, таку ж роль відіграють макрофаги (моноцити) і не виключена участь гранулоцитів [21].

Постійно мігрують між кров'ю і лімфою малі лімфоцити-імунологічно зрілі, довгостроково живуть клітини. Неоднорідність малих лімфоцитів проявляється в тому, що деякі з них є початковими клітинами з активними потенціями, в той час як інші, морфологічно подібні з першими, навпаки, не здатні еволюціонувати і реагувати на різні стимули, що виходять з «мікрооточення» [21].

У крові значна частина лімфоцитів відноситься до довготривалим клітинам - тривалість їхнього життя від кількох місяців до п'яти років. До короткоживущим відносяться клітини з тривалістю життя від кількох годин до п'яти днів [21].

Тромбоцити. У риб ці клітини відрізняються великим непостійністю форм, розмірів та кількості. Вони можуть розташовуватися поодинці і скупченнями. Форма цих клітин може бути як мінімум чотирьох видів - шилоподібний, веретеноподібна, овальна і округла [3, 13].

Ядра у них темно-фіолетові, іноді майже чорні, круглі, злегка подовжені, оточені помітним шаром брудно-рожевою або сіро-фіолетовою цитоплазми. У тромбоцитів ядра дуже ущільнені, і в зрілих клітинах майже не проглядається їх структура. Іноді вони бувають дводольними або взагалі безформними. Останні, як правило, є дегенеративними формами; нерідкі випадки випинання ядра [21].

Розмір тромбоцитів найчастіше близький до розміру ядра еритроцитів того ж виду риби, але не виключено, що вони бувають і більшими. Середня величина тромбоцитів 0,5-0,75 мкм визначається, як правило, способом життя риб (у малоактивних видів вони трохи крупніше) [21].

У риб значна частина тромбоцитів депонується в селезінці [21].

Серед дослідників крові існує єдина точка зору щодо функціональної значимості тромбоцитів. Ці клітини беруть участь у процесі згортання крові риби.

У риб час згортання - досить не стабільний показник, який залежить не тільки від способу взяття крові, але і факторів зовнішнього середовища, фізіологічного стану риби.

Стрес-фактори підвищують швидкість згортання крові у риб, що свідчить про значний вплив центральної нервової системи на цей процес.

У літературі описані та міжвидові відмінності згортання крові у риб. Проте до цих даних варто ставитися з певним скептицизмом, пам'ятаючи про те, що виловила риба - це риба, піддана різкого стресу. Тому міжвидові відмінності, описані в спеціальній літературі, цілком можуть виявитися результатом різної стійкості риб до стресів.

Таким чином, організм риб надійно захищений від великих крововтрат. Залежність часу згортання крові риб від стану нервової системи є додатковим захисним фактором, оскільки великі крововтрати можливі, швидше за все, в стресових ситуаціях (напад хижака, бійки) [3, 13].

2 Матеріал і методика

.), а также их кровь, взятая у живых рыб. Об'єктами дослідження були лин (Tinca tinca L.) і окунь (Perca fluviatilis L.), А також їх кров, взята у живих риб. Збір матеріалу для визначення гематологічних показників риб проводився у 2007 - 2008 рр.. в акваріальной кафедри «Аквакультура» ФГТУ ВПО «КДТУ» і на оз. Віштинецьке. Виробники лина були виловлені в р. Неманін ставними мережами і 06.06.07 перевезені до акваріальную кафедри «Аквакультура» ФГТУ ВПО «КДТУ», де здійснювалося їх вирощування в експериментальній УЗВ. Акваріальная призначена для вирощування риб і ведення наукової діяльності. Вона включає в себе два приміщення: вентиляторна і основне приміщення. У вентиляторної знаходиться лабораторне обладнання: ваги, ФЕК, різна лабораторний посуд, набір піпеток, реактивів, бінокуляр, стійка з апаратами Вейса. Тут здійснюється також зберігання кормів. В основному приміщенні розташовуються два стаціонарних басейну, один з яких відстійник, два басейни шведського типу, три пластикові басейну (об'ємом 300 л), спарені акваріуми, акваріум для розведення живих кормів. Для подачі повітря в вирощувальні ємності використовується компресор. Також є набір переносних компресорів. Для очищення води використовуються біофільтри. Схема УЗВ представлена ​​на малюнку 1.

1 - рибоводні ємності; 2-біореактор; 3-U-образні рівневі трубки; 4-ерліфт; 5-біофільтр

Малюнок 1 - Схема УЗВ в акваріальной кафедри «Аквакультура» ФГТУ ВПО «КДТУ»

Зміст виробників здійснювалося роздільно за статтю в басейнах. Біофільтр містив чотири модулі біологічної очистки, вода в які подавалася за допомогою помп. В якості механічних фільтрів використовувалися забезпечені губками помпи. Ємності для утримання риби були частково закриті кришками, щоб забезпечити необхідну для риби затененность і запобігти вистрибування риби.

Регулярно проводилося очищення біофільтрів і губок механічних фільтрів, чищення і часткова заміна води в вирощувальних ємностях.

Годували виробників кормом Aller два-три раза в день. Aqua два-три рази на день. Щодня вимірювали температуру повітря в робочому приміщенні, а також температуру води в вирощувальних ємностях.

Ліни протягом більшої частини експерименту містилися при температурі 24-26 º С, що відповідає оптимальній температурі для росту, дозрівання і нересту цього виду. У період з 10.10.07 по 13.03.08 з метою імітації зимівлі зміст виробників і ремонту лина здійснювалося при знижених температурах (мінімальна температура за цей період - 9,5 º С у ремонтного і 10 º С у маточного поголів'я лина). На малюнку 2 зображено суміщений графік коливань температури води і концентрації кисню в УЗВ в період вирощування і утримання виробників лина.

Рисунок 2 - Динаміка температури води і концентрації кисню в басейнах з виробниками

Концентрація кисню в експериментальній УЗВ з виробниками лина не опускалася нижче 5,56 мг / л, що відповідає сприятливим для лина значень.

У УЗВ з дворічний особинами лина, концентрація кисню за період проведення експерименту не опускалася нижче 6,27 мг / л, що відповідає сприятливим для риб умов.

В озері Віштинецьке збір матеріалу проводилося 19-20 травня 2008 Окунь для досліджень був виловлений ставними мережами на двох станціях, відповідно в 38 і 11 квадратах (рисунок 3), координати яких вказані в таблиці 2.

Таблиця 2 - Координати станцій розташування ставних мереж в оз. Віштинецьке

Рис. 3 Розташування станцій в оз. Віштинецьке

Під час вилову окунів температура води в озері була 12 ° C, а вміст кисню на ст. 1 - 11,32, на ст. 2 - 10,33 мг / л.

Всього було проаналізовано кров 5 екз. дворічних линів і 9 екз. виробників лина у віці 4 роки, 7 екз. окуня з першої станції в Віштинецьке озері і 8 екз. - З другої станції.

Для збору крові рибу загортали в чисту марлю і за допомогою скальпеля прибирали слиз і луску в місці взяття крові. Потім це місце протирали ватним тампоном, змоченим 96% спиртом, і ретельно просушували ватою. Голкою шприца робили прокол шкіри по медіальній лінії позаду анального плавця і під кутом 45 ° вводили голку до хребта, де проходить стовбур хвостовій артерії, голкою прорізали артерію і в шприц починала надходити кров

В якості антикоагулянту застосовували гепарин, яким попередньо ополіскували шприци, потім їх висушували [55].

Кров для досліджень брали в наступній послідовності:

1) перенесли кров на годинне скло;

2) приготували мазок;

3) перенесли кров у пробірки з консервирующим розчином;

4) перенесли кров у трансформуючий розчин;

5) підраховували еритроцити в камері Горяєва;

6) визначали гемоглобін на спектрофотометрі;

7) фіксували і фарбували мазки крові;

8) визначали гемоглобін на спектрофотометрі;

9) підраховували непрямим методом кількість лейкоцитів;

10) визначали лейкоцитарну формулу [57].

Мазки готували наступним чином: тримаючи предметне скло за вузькі краю переносили на нього краплю крові. Іншою рукою приставляли шліфувальне скло вузьким краєм до скла з кров'ю праворуч від краплі під кутом 45 ° і просували його вліво до зіткнення з кров'ю. Вичікували поки кров розпливеться по всьому ребру шліфувального скла і потім легким швидким рухом вели його зліва направо до тих пір, поки не буде вичерпаний увесь крапля. Після приготувань мазки сушили на повітрі до зникнення вологого блиску [57].

Фіксували і фарбували мазки способом фарбування по Папергейму. Предметні скла ставили в київський апарат для масової фарбування мазків і заливали барвником-фіксатором Мая-Грюнвальда. Через 3 хв його замінювали робочим барвником Романовського. Продовжували фарбування протягом 15 хв, після чого барвник зливали, а мазки промивали водопровідною водою. Потім скла ставили під кутом для висушування [57].

Визначали наступні показники крові: концентрацію гемоглобіну, еритроцитів, лейкоцитів, загального білка в сироватці крові, лейкоцитарну формулу, цитометричних характеристики еритроцитів.

Підрахунок еритроцитів і лейкоцитів проводився за допомогою камери Горяєва. Еритроцити вважали в 5 великих квадратах камери, а лейкоцити будуть підраховані непрямим методом. Визначаємо величину отримували за формулою (1).

Х = , (1)

– степень разведения крови; n – количество малых квадратов. де Х-число клітин в 1 мкл крові, а - кількість підрахованих клітин; y - ступінь розведення крові; n - кількість малих квадратів.

для еритроцитів:

Х _е = = А * 12500;

для лейкоцитів:

Х _л = = А * 2500 [53].

Для визначення гемоглобіну використовували геміглобінціанідний метод на ФЕК з використанням ацетонциангидріна. Розрахунок вмісту гемоглобіну буде проводитися за формулою (2):

, г/л = Hb, г / л = , (2)

де Е _оп - екстінція дослідної проби; Е _ст - екстінція стандартного розчину; С - концентрація геміглобінціаніда в стандартному розчині (59,75 мг%); К - коефіцієнт розведення крові; 0,01 - коефіцієнт для пресчета концентрації гемоглобіну з мг у м * л ^-1 [53].

Концентрацію білка крові риб визначають за допомогою коефіцієнта заломлення сироватки на рефрактометрі. Коефіцієнт заломлення досить точно свідчить про кількісний вміст у сироватці білка, що визначається за таблицею [53].

Концентрацію загального білка в сироватці крові (в м * л ^-1) визначають за графіком, використовуючи знайдений коефіцієнт заломлення [53].

Підрахунок лейкоцитарної формули крові на забарвлених препаратах проводили з використанням світлового мікроскопа з застосуванням імерсії (збільшення 90х15, 100х15). На мазках підраховували 200 лейкоцитів за загальноприйнятою методикою. При ідентифікації лейкоцитів використовували класифікацію клітин крові риб М.Т. Іванової (1983). Підрахунок лейкоцитарної формули проводився за такими групами лейкоцитів: нейтрофіли, серед яких виділяли: міелоціти нейтрофільні, метамієлоцити нейтрофільні, паличкоядерних нейтрофілів, сегментоядерние нейтрофіли; псевдоеозінофіли, еозинофіли, псевдобазофіли, моноцити; малі і великі лімфоцити.

Пофарбований мазки вивчали за допомогою системи аналізу зображень «ВідеоТест - Морфо», яка представляє собою автоматизоване робоче місце, призначене для проведення морфологічного, стереологічний і морфометричного аналізу зображень зі статистичною обробкою отриманих результатів. -камерой. Мазок встановлюється під мікроскоп, з'єднаний з TV-камерою. -камеры передавался на плато ввода изображений и для визуализации на монитор видеоконтрольного устройства или видеоокно монитора компьютера. Телевізійний сигнал з TV-камери передавався на плато введення зображень і для візуалізації на монітор відеоконтрольного пристрою або відеоокно монітора комп'ютера. -сигнал оцифровывался, и изображение в цифровой форме передалось в ОЗУ компьютера для обработки и анализа. У платі введення TV-сигнал оцифровується, і зображення в цифровій формі передався у пам'яті комп'ютера для обробки і аналізу. Програма дозволила отримати вимірювання різних параметрів еритроцитів, провести статистичну обробку результатів, отримати графіки залежності параметрів [53].

Статистичну обробку отриманих результатів виконували за загальноприйнятими методиками [1, 40, 47] у програмі «Microsoft 2003». Для расчета ряда показателей использовались стандартные статистические показатели, такие как: среднее значение - М, ошибка средней - m , среднеквадратическое отклонение - σ и коэффициент вариации - CV . Exel 2003 ». Для розрахунку низки показників використовувалися стандартні статистичні показники, такі як: середнє значення - М, помилка середньої - m, середньоквадратичне відхилення - σ і коефіцієнт варіації - CV. . Для підтвердження достовірності відмінностей використовували критерій Стьюдента - St.

3 Характеристика крові лина, вирощеного у штучних умовах УЗВ

3.1 Характеристика крові дворічного лина.

Для оцінки фізіологічного стану вирощеної риби використовували концентраційні показники крові, а також лейкоцитарну формулу, які характеризують білковий обмін, дихальну і захисну функції організму.

Середня маса досліджених дворічних линів становила 13 м, середня довжина - 75,4 мм. Результати дослідження морфофізіологічних характеристик лина представлена ​​в таблиці 3.

Таблиця 3 - Морфофізіологічні характеристика двухлетки лина

Маса і довжина двухлетки лина, вирощених в умовах УЗВ, не відрізнялися від таких показників у линів такого ж віку з природних умов [6].

Лейкоцитарна формула лина представлена ​​в таблиці 4 і на малюнку 4

Таблиця 4 - Лейкоцитарна формула лина,%

Малюнок 4 - Лейкоцитарна формула дворічних линів, вирощених у УЗВ

Загальна кількість нейтрофілів у крові лина склало 3,38%. Серед них переважали юні нейтрофіли - міелоціти, що свідчить про активацію нейтрофілопоеза. Звертає на себе увагу високий відсоток псевдоеозінофілов (12,0 ± 6,82). Що, ймовірно, пов'язано зі специфічними умовами в УЗВ.

3.2 Характеристика крові виробників лина, вирощених в умовах УЗВ

Морфофізіологічні показники, досліджених виробників линів представлені в таблиці 5 і на малюнку 5.

Таблиця 5 - Морфофізіологічні показники виробників лина