СЕМІНАРСЬКЕ ЗАНЯТТЯ 4 Реплікація та репарація ДНК. Задачі:1. Одноланцюговий фрагмент молекули ДНК має наступну послідовність нуклеотидів:ЦГТ ГАТ ТТТ ГГТ ТГТ АГГ.Яка буде структура молекул ДНК після реплікації?Відповідь:ГЦА ЦТА ААА ЦЦА АЦА ТЦЦ.2. Ділянка ДНК має наступний склад нуклеотидів:…АГТ АЦГ ГЦА ТГЦ АТТ АЦА ТГЦ ЦГГ АЦГ ТААТ… Запишіть нуклеотидний склад дочірніх ДНК, які утворились в результаті реплікації вихідного фрагменту молекули. Вкажіть, яка із полінуклеотид них ланцюгів є старою, яка – новою. Відповідь:…АГТ АЦГ ГЦА ТГЦ АТТ АЦА ТГЦ ЦГГ АЦГ ТААТ…(СТАРИЙ ЛАНЦЮГ) …ТЦА ТГЦ ЦГТ АЦГ ТАА ТГТ АЦГ ГЦЦ ТГЦ АТТА…(НОВИЙ ЛАНЦЮГ) 3. Скільки і яких видів вільних нуклеотидів необхідно для реплікації молекули ДНК, в якій кількість аденіна дорівнює 600000, а гуаніна — 2400000?Відповідь:А=Т, Г=Ц.А=Т=600000; Г=Ц=2400000.Потрібно тимінових нуклеотидів – 600000 і цитозинових – 2400000.4. Загальна маса всіх молекул ДНК в 46 хромосомах однієї соматичної клітини людини дорівнює 6⋅10−9мг. Чому буде дорівнювати маса молекул ДНК після реплікації?Розв'язання:
Відповідь:маса ДНК перед початком поділу 12 ⋅10−9мг, наприкінці телофази мейозу I - 6 ⋅10−9мг, наприкінці телофази мейозу II - 3 ⋅10−9мг. 5. Ферменти, які здійснюють реплікацію ДНК, рухаються зі швидкістю 0,6 мкм/хв. Скільки часу необхідно для подвоєння ДНК в хромосомі, яка має 500 репліконів (одиниць реплікації), якщо довжина кожного реплікону 60 мкм?Розв'язання:Довжина репліконів: 500 ⋅ 60= 30000мкм. Складаємо пропорцію. 0,6 - 1 (0,6 синтезує за 1 хв) 30000 - х (30000 за х хв) х = 50000 хв , тобто стільки часу знадобитися для подвоєння ДНК у хромосомі, або ж 833 год, або 34,7 доби. Відповідь:50000 хв, або ж 833 год, або 34,7 доби. 6. В молекулі ДНК із 960 пуринових основ 420 складає гуанін. Визначте, яка кількість аденіну, гуаніну, тиміну і цитозину необхідна для синтезу нуклеотидів для забезпечення реплікації даної молекули. Розв'язання:Пуринові основи це А (аденін) і Г (гуанін).Г=Ц, Г=420, то і Ц = 420.А=Т, А=960-420=540, то і Т=540.;Відповідь: А=540, Т=540, Г=420, Ц= 420. 7. Припустимо, що ДНК в клітинах кишечної палочки синтезується зі швидкістю 100 000 нуклеотидів за хвилину і для реплікації хромосоми необхідно 10 хв. Яка довжина хромосоми кишечної палички в парах нуклеотидів? Яка фізична довжина цієї двохспіральної молекули хромосоми?Розв'язання:L (п.н. кишечної палочки) = 100000 п.н./хв. ⋅ 10 хв. = 1000000 п.н.L (фізична кишечної палочки) = 1000000 п.н. ⋅ 0,34 нм= 340000нм = 0,34 мм.8. Молекула ДНК має відносну молекулярну масу 69 000, в тому числі 8625 є аденіловими нуклеотидами. Визначте кількість аденілових, тимідилових, гуанілових і цитидилових нуклеотидів, які містяться в молекулах ДНК після реплікації вихідної молекули. Відносна молекулярна маса одного нуклеотида в середньому складає 345.Розв'язання:Молекулярна маса одного нуклеотиду дорівнює 345, знайдемо число нуклеотидів ДНК: 69 000 : 345 = 200.На частку аденілових нуклеотидів припадає 8625, то їхнє число дорівнює: 8625 : 345 = 25. Стільки ж і тимідилових нуклеотидів у молекулі ДНК.Сума А + Т = 25 + 25 = 50 нуклеотидів.Кількість гуанілових та цитидилових нуклеотидів дорівнює: Г + Ц = 200 – 50 = 150.Кількість кожного з них: 150 : 2 = 75.Відповідь: А = Т = 25, Г = Ц = 75.9. Довжина фрагменту молекули ДНК складає 720 нм; частина цитидилових нуклеотидів в даному фрагменті складає 15%. Визначте відносну молекулярну масу відповідного фрагменту обох молекул ДНК після реплікації вихідної молекули, а також відсотковий вміст та сумарну кількість всіх нуклеотидів, які входять до складу фрагментів цих молекул ДНК.Розв'язання:Mr нуклеотида = 3451 нм = 2 нуклеотида. В 1 ланцюгу ДНК: 720 ⋅ 2=1440 В 2-х ланцюгах ДНК: 1440 ⋅ 2 = 2880 нуклеотидів. Mr двох молекул ДНК: Mr = 2880 ⋅ 345 = 993600 Ц=Г, Т=А. Ц=Г=15% Ц+Г= 30% 100%-30%=70% А=Т= 35% Сума всіх нуклеотидов: Г+Ц+А+Т = 30%+70% = 100% Відповідь: Mr =993600; Ц=Г= 15%, А=Т= 35%; 2880 нуклеотидів. 10. Визначте час реплікації прокаріотичного гена, з якого транскрибується молекула мРНК, що містить 350 нуклеотидів. Швидкість реплікації - 9·104 пар основ за хвилину. Розв'язання:t = 350/(9·104) = 0,0039 хв11. Середня довжина ДНК однієї хромосоми людини – 4 см. Визначте загальну кількість ориджінів у клітині людини, якщо тривалість S-фази – 6 годин, а кількість хромосом у диплоїдному наборі – 46. Швидкість реплікації - 9·104 пар основ за хвилину.Розв'язання:Спочатку розрахуємо скількі оріджинів має одна хромосома людини. Кількість нуклеотидних пар в одній хромосомі дорівнює 4 ·107нм/0,34нм = 11,8 ·107 п.о. За умов наявності одного оріджину час реплікації хромосоми – 11,8 ·107/(9·104)=1311 хв. S-фаза триває 360 хвилин, тому одна хромосома повинна мати декілька оріджинів реплікації. Щоб відбулась повна реплікація хромосоми під час S-фази кількість орідженів повинна бути на меншою за 1311/360 = 3,64 = 4. Загальна кількість орідженів реплікації у диплоїдній клітині буде 4 · 46 = 184.Відповідь: загальна кількість орідженів реплікації у диплоїдній клітині становить 184.12. Клітини E. coli, які вирощувались довгий час на середовищі, що містить ізотоп 15N, переносять у середовище з 14N, чекають три покоління (8-кратне зростання кількості клітин) і виділяють ДНК. Яким буде молярне співвідношення «гібридної» ДНК 15N-14N до «легкої» 14N-14N?Розв'язання:Враховуючи те, що реплікація ДНК іде за напівконсервативним способом, маємо таку схему:Вих. ДНК, 0 покоління: 15N-15NРепл. ДНК у 1 поколінні: 14N-15N 14N-15N Репл. ДНК у 1 поколінні: 14N-15N 15N-15N 14N-15N 15N-15N 14N-15N 15N-15N 14N-15N 15N-15N Молярне співвідношення “гібридної“ ДНК 15N-14N до “легкої“ 14N-14N буде 1:1. |