Бактеріологічні методи дослідження: визначення титру кишкової палички, колі-титру молока

Ім'я файлу: Інструкційна картка з додатком л-п роботи № 27, лаборант 3р.docx
Розширення: docx
Розмір: 27кб.
Дата: 07.06.2022
скачати
Пов'язані файли:
2021Аналітична робота.docx
бланк педіатрія.docx
Короткий огляд історії методів навчання грамоти..pptx
лекція.pptx
Семінарське 6 Хуторянець Руслан.docx
урок 28.docx
индивидуальне.docx

Інструкційна картка-завдання

Лабораторно-практична робота № 27

Тема 5. Методи хіміко-бактеріологічного дослідження

Тема: Бактеріологічні методи дослідження: визначення титру кишкової палички, колі-титру молока.

Мета роботи: Закріплення на практиці теоретичних знань з теми № 5. Методи хіміко-бактеріологічного дослідження. Засвоїти бактеріологічні методи дослідження: визначення титру кишкової палички, колі-титру молока.

Матеріали та обладнання: середовищі Кеслера, фуксинсульфітний агар (середовище Ендо), середовище Гісса з лактозою, фарба за Грамом, стерильний посуд, мікроскоп, зразки пастеризованого молока.

Завдання. Проведіть визначення титру кишкової палички, колі-титру в зразках молока, до якої групи по бактеріологічним показникам відносять молоко пастеризоване (таблиця 7), заповнити таблиці (4, 5, 6), якщо при дослідженні отримали такі результати (таблиці 1, 2, 3):

1 зразок – Молоко пастеризоване, 2,5% жиру:

Таблиця 1

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках	1:10 по 1мл	1:100 по 1мл	1:1000 по 1мл	1:10 по 0,1мл	1:100 по 0,1мл	1:1000 по 0,1мл
Газоутворення у пробірках	немає	немає	немає	немає	немає	немає
Загальна кількість мікробів у 1мл молока	65000

2 зразок – Молоко пастеризоване, 3,2% жиру

Таблиця 2

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках	1:10 по 1мл	1:100 по 1мл	1:1000 по 1мл	1:10 по 0,1мл	1:100 по 0,1мл	1:1000 по 0,1мл
Газоутворення у пробірках	є	є	немає	є	немає	немає
Загальна кількість мікробів у 1мл молока	105000

3 зразок – Молоко пастеризоване, 1,5% жиру

Таблиця 3

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках	1:10 по 1мл	1:100 по 1мл	1:1000 по 1мл	1:10 по 0,1мл	1:100 по 0,1мл	1:1000 по 0,1мл
Газоутворення у пробірках	є	немає	немає	немає	немає	немає
Загальна кількість мікробів у 1мл молока	120000

Отримані результати порівняти з вимогами. Зробити висновок про групу молока по бактеріологічним показникам.

1 зразок – Молоко пастеризоване, 2,5% жиру.

Таблиця 4

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках
Газоутворення у пробірках
Колі-титр молока
Загальна кількість мікробів у 1мл молока
Група молока по бактеріологічним показникам

2 зразок – Молоко пастеризоване, 3,2% жиру

Таблиця 5

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках
Газоутворення у пробірках
Колі-титр молока
Загальна кількість мікробів у 1мл молока
Група молока по бактеріологічним показникам

3 зразок – Молоко пастеризоване, 1,5% жиру

Таблиця 6

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках
Газоутворення у пробірках
Колі-титр молока
Загальна кількість мікробів у 1мл молока
Група молока по бактеріологічним показникам

Теоретичні відомості

Визначення колі-титру молока.

Колі-титр молока визначають на середовищі Кеслера, до складу якого входять речовини (жовч, барвник генціановий фіолетовий), що пригнічують ріст молочнокислих і інших грампозитивних мікробів.

Молоко чи молочні продукти спочатку розводять 1:10, 1:100 та ін..

Потім беруть шість пробірок із середовищем: у три з них вносять по 1 мл, в інші – по 0,1 мл кожного розведення. Засіяні пробірки ставлять на дві доби у термостат при температурі 43°С.

Відсутність газоутворення у всіх шести пробірках указує на чистоту продукту, і його колі-титр вважають вище 3 мл;
при газоутворенні в одній пробірці, засіяної 1 мл досліджуваного продукту, колі-титр дорівнює 3 мл;
при утворенні газу більш ніж в одній пробірці з 0,1 мл колі-титр вважається рівним 0,3 мл;
при утворенні газу в шести чи п'яти пробірках колі-титр менше 0,3 мл. Таке молоко непридатне до вживання.

Ідентифікацію кишкової палички проводять на середовищі Ендо, для чого роблять висів на таке середовище з газоутворюючих пробірок і ставлять на добу в термостат при температурі 37°С. Утворення на середовищі Ендо характерних колоній червоного кольору з металевим відтінком вказує на наявність кишкової палички.

Надалі мазки з таких колоній фарбують за Грамом, мікроскопують.

За методом Грама грампозитивні бактерії Грам (+), фарбуються основною фарбою в темно-фіолетовий колір, грамнегативні бактерії Грам (-), сприймаючи додаткове забарвлення, набувають яскраво-малиновий колір.

Кишкова паличка(Escherichia coli, скорочується до E. Coli) Грам-негативні бактерії.

Висівають культуру на середовище Гісса з лактозою.

Середовище Гісса використовується для диференціації мікроорганізмів за здатністю ферментувати цукри та спирти.

Індикатор середовища, бромкрезоловий пурпуровий, при ферментації вуглеводу (спирту) та виділенні кислоти змінює забарвлення з фіолетового на жовте, що свідчить про здатність бактерій зброджувати даний вуглевод (спирт).

Середовище напіврідке, посів здійснюється методом "проколювання" мікробіологічною петлею. Пробірки інкубують при 37°С протягом 24 годин, після чого оцінюють зміню кольору.

ГОСТ 13277–67 Молоко коров’яче пастеризоване

По бактеріологічним показникам коров’яче молоко повинно відповідати вимогам вказаним в таблиці 7.
Таблиця 7.

Мікробіологічна характеристика коров'ячого пастеризованого молока

Молоко	Загальна кількість мікробів у 1мл молока, не більше	Титр кишкової палички, мл
Пастеризоване в пляшках і пакетах:
група А	75 000	3
група Б	150000	0,3
Пастеризоване у флягах і цистернах	300 000	0,3

Одночасно при підрахунку враховують фізіологічні групи мікроорганізмів на елективних середовищах і в такий спосіб визначають загальну кількість мікробів у 1 мл молока.
Порядок виконання роботи

Ознайомитись з методикою визначення колі-титру молока
Провести визначення титру кишкової палички, колі-титру в зразках молока.
Отримані результати порівняти з вимогами. Зробити висновок про групу молока по бактеріологічним показникам.

Контрольні питання.

Які поживні середовища використовують для визначення титру кишкової палички та ідентифікації кишкової палички?
Як E. Coli фарбується за Грамом?
Як оцінюють наявність кишкової палички на середовищі Гісса?

Додаткова література для написання роботи

Векірчик К.М. Мікробіологія з основами вірусології. К.: Либідь, 2001.
ГОСТ 13277–67 Молоко коров’яче пастеризоване.

Додаток

Лабораторно-практична робота № 27

з предмету: Спеціальна технологія

здобувача освіти групи № _______

Херсонського професійного ліцею

харчової промисловості

_____________________________

( Прізвище Ім’я )

Тема 5. Методи хіміко-бактеріологічного дослідження

Тема: Бактеріологічні методи дослідження: визначення титру кишкової палички, колі-титру молока.

Мета роботи: Закріплення на практиці теоретичних знань з теми № 5. Методи хіміко-бактеріологічного дослідження. Засвоїти бактеріологічні методи дослідження: визначення титру кишкової палички, колі-титру молока.

Матеріали та обладнання: середовищі Кеслера, фуксинсульфітний агар (середовище Ендо), середовище Гісса з лактозою, фарба за Грамом, стерильний посуд, мікроскоп, зразки пастеризованого молока.

Завдання. Проведіть визначення титру кишкової палички, колі-титру в зразках молока, до якої групи по бактеріологічним показникам відносять молоко пастеризоване (таблиця 7), заповнити таблиці (4, 5, 6), якщо при дослідженні отримали такі результати (таблиці 1, 2, 3):

1 зразок – Молоко пастеризоване, 2,5% жиру:

Таблиця 1

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках	1:10 по 1мл	1:100 по 1мл	1:1000 по 1мл	1:10 по 0,1мл	1:100 по 0,1мл	1:1000 по 0,1мл
Газоутворення у пробірках	немає	немає	немає	немає	немає	немає
Загальна кількість мікробів у 1мл молока	65000

2 зразок – Молоко пастеризоване, 3,2% жиру

Таблиця 2

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках	1:10 по 1мл	1:100 по 1мл	1:1000 по 1мл	1:10 по 0,1мл	1:100 по 0,1мл	1:1000 по 0,1мл
Газоутворення у пробірках	є	є	немає	є	немає	немає
Загальна кількість мікробів у 1мл молока	105000

3 зразок – Молоко пастеризоване, 1,5% жиру

Таблиця 3

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках	1:10 по 1мл	1:100 по 1мл	1:1000 по 1мл	1:10 по 0,1мл	1:100 по 0,1мл	1:1000 по 0,1мл
Газоутворення у пробірках	є	немає	немає	немає	немає	немає
Загальна кількість мікробів у 1мл молока	120000

Отримані результати порівняти з вимогами. Зробити висновок про групу молока по бактеріологічним показникам.

Хід роботи.

1 зразок – Молоко пастеризоване, 2,5% жиру.

Таблиця 4

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках
Газоутворення у пробірках
Колі-титр молока
Загальна кількість мікробів у 1мл молока
Група молока по бактеріологічним показникам

2 зразок – Молоко пастеризоване, 3,2% жиру

Таблиця 5

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках
Газоутворення у пробірках
Колі-титр молока
Загальна кількість мікробів у 1мл молока
Група молока по бактеріологічним показникам

3 зразок – Молоко пастеризоване, 1,5% жиру

Таблиця 6

Внесення кількості молока, з розведенням в стерильній воді, в пробірках
Газоутворення у пробірках
Колі-титр молока
Загальна кількість мікробів у 1мл молока
Група молока по бактеріологічним показникам

Висновок:

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Контрольні питання.

Які поживні середовища використовують для визначення титру кишкової палички та ідентифікації кишкової палички?

_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Як E. Coli фарбується за Грамом?

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Як оцінюють наявність кишкової палички на середовищі Гісса?

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Оцінка _____________________
скачати

© Усі права захищені
написати до нас