Функціональна активність лейкоцитів в умовах впливу на організм високої і низької температур

[ виправити ] текст може містити помилки, будь ласка перевіряйте перш ніж використовувати.

скачати

А. Д. Тяпкіна, В. Д. Горічева

На живі організми впливають різні фактори зовнішнього середовища. При екстремальних впливах, до яких відносяться перегрівання та переохолодження організму, відбуваються зміни гомеостатичних констант, і перш за все відносяться до системи крові [1]. Лейкоцити, які мають високу реактивність, швидко включаються в реакції адаптації.

Метою проведеного дослідження було комплексне вивчення функціональних властивостей лейкоцитів при перегріванні й переохолодження організму.

Матеріал і методи дослідження

Досліди проведені на лабораторних білих щурах (90 тварин) з вихідною масою тіла 330-400 м. В експерименті було виділено 7 груп тварин: дві інтактні, служили контролем, і 5 експериментальних: 1 група - легкий ступінь теплової поразки, 2 - середня ступінь теплового поразки, 3 група - важкий ступінь теплової поразки, 4 група - переохолодження організму, 5 група - переохолодження організму в умовах алкогольної інтоксикації. Три перших групи тварин витримували в термокамері при t +400 С без доступу до води. Тварин 4-й і 5-ї груп піддавали охолодженню у воді температурою +15 ° С. Тваринам 5-ї групи додатково вводили в стравохід через еластичний зонд етиловий спирт (30%) у кількості 1 мл на 100 г маси тіла.

Змішану кров для дослідження брали шляхом декапітації у попередньо наркотизованих тварин. Для запобігання згортання використовували гепарин у кількості 10 од / мл. Отриману кров центрифугували 10 хв. при 1500 об / хв. Збирали лейкоцити. Домішка еритроцитів руйнували 0,83% розчином хлориду амонію. Клітини двічі відмивали ізотонічним буфером (розчин Дюльбекко). Відмиті клітини ресуспендували і підраховували їх концентрацію в камері Горяєва.

Фагоцитоз

Для дослідження поглинальної здатності нейтрофілів використовували частки латексу розміром 0,8 мкм. Суміш лейкоцитів з латексом в співвідношенні 1: 50 инкубировали в термостаті при 37 ° С протягом 30 хв., Струшуючи пробірку з лейкоконцентратом через кожні 5 хв. Потім у фіксованих метанолом і забарвлених АЗУР-еозином мазках підраховували відсоток фагоцитуючих клітин (фагоцитарна активність, ФА) і середнє число поглинених часток (фагоцитарний індекс, ФІ) [2].

Міграційна активність

Для постановки міграції під агарози використовували класичний варіант, описаний у численних монографіях та статтях. Агарози з додаванням культуральної клітинної середовища 199 нашаровувалися на предметні скла. Для оцінки спонтанної міграції в агаровому гелі за допомогою пробійника вирізали одну лунку, в яку поміщали суспензію лейкоцитів (7-10x105клеток). На другому склі ставили реакцію індукованої міграції. Для цього вирізали групу з двох розташованих на відстані, рівному діаметру пробійника (2,5 мм), лунок: одну - для клітинної суспензії, другу - для хемоаттрактантов. Як хемоаттрактантов використовувалася свіжа плазма крові. Скло поміщали у вологу камеру при 37 ° С в атмосфері повітря з 5% вмістом СО2 на 2 години, потім занурювали в 2% розчин глутарового альдегіду на 60 хв. Після фіксації та вилучення агарози клітини фарбували АЗУР-еозином за Романовським. В обох випадках для оцінки локомоціонной активності вимірювали площу поширення клітин і розраховували хемотоксичний диференціал - відношення змін площі індукованої міграції в порівнянні зі спонтанною до площі клітинного ареалу при мимовільної міграції (%) [3].

Адгезійна здатність

За основу проведених маніпуляцій була взята методика, описана Megе J.-L. з співавт. 40 мкл суспензії лейкоцитів поміщали в капіляр з внутрішнім діаметром 0,56 мм, попередньо оброблений аутоплазмой. Клітини інкубували у вологій камері при 370С протягом 60 хв. Подальші процедури були наступними. Клітинну суспензію обережно видаляли з капіляра при напрузі зсуву близько 0,1 Н/м2. Капіляр повторно заповнювали розчином Дюльбекко і звільняли від вмісту при напрузі зсуву 30 Н/м2. Вважали число клітин у вихідній суспензії, а також першому (неадгезіровавшіе і з малою силою зчеплення) і другому (з середньою силою зчеплення) змиві. З отриманих даних розраховували кількість клітин, що залишилися в капілярі (з великою силою зчеплення) [4].

Результати досліджень та їх обговорення

У ході досліджень були отримані наступні результати.

Зміни поглинальної здатності нейтрофілів в умовах гіпертермії виявили поетапне збільшення фагоцитарної активності і числа поглинених частинок (табл. 1). Приріст вивчених показників у порівнянні з контролем становив: 20 хвилин перегрівання - ФА - 8%, ФІ - 7%; 75 хвилин - ФА - 16%, ФІ - 37%; 120 хвилин - ФА - 24%, ФІ - 52%. При охолодженні тварин до стану холодної наркозу фагоцитарна активність змінювалася незначно (1%), а число поглинених частинок зростала (збільшення ФМ - 19%). Охолодження в умовах алкогольної інтоксикації негативно позначалося на функціональній активності нейтрофілів: достовірно знижувалися обидва показники ФА - 10%, ФІ - 37% (табл. 2).

Таблиця 1

Показники фагоцитарної активності у тварин, що піддавалися перегрівання

Група Фагоцитарна активність (%) Фагоцитарний індекс (отн. од.)
Контроль 75 ± 1,7 7,5 ± 0,4
I група тварин 81 ± 0,8 * 8,0 ± 0,2 *
II група тварин 87 ± 1,1 * 10,3 ± 0,3 *
III група тварин 93 ± 0,7 * 11,4 ± 0,4 *

Примітка: * - вірогідність відмінностей порівняно з контролем (p

Додати в блог або на сайт

Цей текст може містити помилки.

Медицина | Реферат
10.7кб. | скачати


Схожі роботи:
Температурний чинник Адаптація до високої і низької температур
Міграційна активність лейкоцитів в умовах норми і при дифузних захворюваннях сполучної тканини
Про особливості пострадіаційного окислення захоплених радикалів у поліетилені високої і низької
Вплив низьких температур на організм людини Маніакально депресивний психоз
Дослідження впливу перепадів температур великих діапазонів на руйнування малолегованого молібдену
Шляхи збереження високої працездатності маркетологів в умовах
Деякі закономірності впливу будови лікарської речовини на біологічну активність
Шляхи збереження високої працездатності маркетологів в умовах напруженої розумової праці
Вивчення впливу пива на організм підлітка
© Усі права захищені
написати до нас