Питання
1.Історія розвитку мікро
2.Основні св-ва прокаріотних мікроорган
3.Типи клітинних стінок прокаріотних мікроорган
4.Спори і спорогенез у прокаріотних мікроорган
5.Внутрішні будова прокаріотних мікроорган
6. Джгутики, ворсинки, пили. Способи пересування прокаріотів. Методи визначення рухливості у бактерій
7.Простие і складні методи фарбування мікроорган. Практичне значення
8. Культивування аеробних мікроорган в умовах лабораторії. Методи виділення чистої культури аеробних мікроорган.
9.Хіміческій склад бактеріальної кл
10. Вплив фізичних факторів на мікроорган, практичне значення. Стерилізація.
11. Вплив химич факторів. Дезінфекція
12. Вплив биологич факторів на мікроорган. Антибіотики. Визначення чутливості мікроорган до антибіотиків. Дизбактеріоз і способи його усунення.
13.Внешняя форма прокаріотних мікроорган
14.Роль вітчизняних вчених у розвитку мікро
15. Мікроскопічні гриби (будова, св-ва, способи розмноження).
16. Мікроскопічні гриби (визначення, класифікація, практичне значен).
17.Рост і розмноження прокаріотів. Крива росту
18. Нормальна і аномальна мікрофлора молока. Санітарно - бактеріологічне дослідження молока
19. Участь мікроорган у кругообігу вуглецю в природі.
20. Участь мікроорган у кругообігу азоту в природі
21. Морфологічні та физиологич особливості рикетсій, хламідій і мікоплазм.
22. Актиноміцети (св-ва, практичне значення).
23. Культивування анаеробних мікроорганізмів в умовах лабораторії.
24.Пітательние середовища для культивування прокаріотів і еукаріотів. Хімічний склад, способи приготування, класифікація.
25. Санітарно - бактеріологічне дослідження води і повітря. Практичне значення
26. Класифікація мікроорган по Берги. Номенклатура мікроорган. Поняття про вид мікроорган
27. Ферменти мікроорган (св-ва, класифікація, виявлення сахаролітіч і протеолітіч ферментів у мікроорган).
1.Історія розвитку мікро
5 етапів: 1. евристичний, 2. морфологічний, 3. фізіологічний, 4. імунологічний, 5. молекулярно-генетичний. 1) 4-3 ст до н.е. - 16 в н.е. Гіппократ, Варрон. Джироламо вперше ввів поняття інфекція, висунув теорію про виникнення інфекційної хвороби. Він стверджував, що є 3 шляхи: при безпосередньому дотику; апосредовательно через предмети; на відстані. 2) перші конструктори мікроскопа - брати Ганс і Захарій Янсон. У 1590г збільшення в 32 рази; Левенгук - збільшення в 300 разів. У 1974 - еритроцити людини, жаб і риб; у 1675 - найпростіші; в 1677 - сперматозоїди. 3) Луї Пастер - довів наявність життя без кисню - відкрив анаеробних мікроорганізмів, відкрив процес бродіння, ввів пастеризацію. Вперше в житті отримав вакцини від холери або пастерілеза птахів, сибірської виразки, від сказу. Роберт Кох - відкрив збудника туберкульозу, ввів в практику використання щільних пітат середовищ, розробив методи отримання чистих культур мікроорган, способи фарбував мікроорган. Іванівський відкрив віруси. Мечников - вивчив холеру людини, туберкульоз, основоположник вчення про антагонізм (протистояння між мікробами). Він створив клітинну теорію імунітету (фагоцитоз). Ерліх - теорія імунітету тільки гуморальна (у сироватці крові). 4) до 1940 р. Вчені відкривають явище алергії. Райський - поняття імунологічної пам'яті. Медовар - явище імунологічних толерантності - неотвечаемость імунної системи. 5) Розвиток генної інженерії та біотехнології. Світ мікробів об'єднані віруси, бактерії, еукаріоти.
2.Основні св-ва прокаріотних мікроорганізмів
Розмір кл 0,5-5 мкм. Зовнішня форма - у вигляді кульок - коки, палички, звивисті, 1 клітина. Відсутня ядро, є двухнітчатая кільцева ДНК, розташована в цитоплазмі і не відокремлена від неї ядерною мембраною. Основа клітинної стінки - пептидогликан або муреин. Здатність до фагоцитозу і піноцитозу відсутня. Дихання у бактерій аеробне, анаеробне або факультативне анаеробне. Головне св-во - наявність плазмід - більш короткі ділянки ДНК, не пов'язані з ядерними. У плазмідах записується інформація про стійкість до дезінфектантів, до антибіотиків.
3.Типи клітинних стінок прокаріотних мікроорган
Клітинна стінка гр + бактерій щільно прилягає до цитоплазматичній мембрані, масивна, її товщина знаходиться в межах 20-100 нм. Для неї характерна наявність тейхоєвих кислот, вони пов'язані з пептидогліканів та є полімери трехатомного спирту - гліцерину або пятіатомний спирту - рібіт, залишки яких з'єднані фосфодіефірних зв'язками. Тейхоєвих кислоти зв'язують іони магнію і беруть участь у транспорті їх у клітку. У складі клітинної стінки гр + прокаріотів в невеликих кількостях також знайдені полісахариди, білки і ліпіди. Пептидогликан - основний компонент клітинної стінки і становить від 50-90%. Значно вже пори, ніж у гр-, тому що мікрофібрил пептидоглікану зшиті компактно, тому при забарвленні фіксують фіолетовий комплекс генціанвіолет і йоду, не піддаються обесвечіванію етанолом і тому не сприймають додатковий барвник фуксин, залишаючись пофарбованими у фіолетовий колір. Клітинна стінка гр-бактерій багатошарова, товщина її 14-17 нм. Внутрішній шар - пептидоглікану, який утворює тонку безперервну сітку, навколишнє клітку. Пептидогликан становить від 10-10%. Пептидогликан містить тільки мезодіамінопімеліновую кислоту і не має лізину. Зовнішній шар клітинної стінки - зовнішня мембрана - складається з фосфоліпідів, ліпополісахариди, ліпопротеїну і білків. У зовнішній мембрані містяться білки основи (матричні), вони міцно пов'язані з пептідоглікановим шаром. Однією з їх функцій є формування в мембрані гідрофільних пір, через які здійснюється дифузія молекул. Значно ширше пори, ніж у гр +, тому що мікрофібрил пептидоглікану зшиті менш компактно, тому при забарвленні фіолетовий комплекс генціанвіолет і йоду буде вимиватися швидше. При додатковому нанесенні фуксину забарвлюються в червоний колір. Матричні білки виконують ще роль рецепторів для деяких фагів. Ліпополісахариди (ЛПС) клітинних стінок гр-бактерій складається з ліпіду А та полісахариду. Токсичний для тварин ЛПС отримав назву ендотоксин. Тейхоєвих кислоти у гр-бактерій не виявлено. Структурні компоненти клітинної стінки гр-бактерій відмежовані від цитоплазматичної мембрани і розділені проміжком, званим периплазмі або періплазматіческім простором.
4.Спори і спорогенез у прокаріотних мікроорган
Суперечки - особливий тип покояться репродуктивних клітин, характерізующ-ся різко зниженим рівнем метаболізму і високою резистентністю. Бактеріальна спору формується всередині материнської клітини і наз-ся ендоспори. Суперечки у прокаріотів це не спосіб розмноження, потрібна для збереження бактерій в несприятливих умовах зовнішнього середовища. Спороутворення володіють бацили, кластрідіі, споросарціна. Розташовуються центрально, субтермінально (ближче до кінця), термінально - на кінці паличок. У бацил діаметр суперечки не перевищує діаметра вегетативної клітини, а у кластрідій діаметр суперечки більше. Суперечки складається з спороплазми з нуклеоїдом, білком і діпіколіновой кислотою. Спороплазма оточена цитоплазматичною мембраною, до неї прилягає пептідоглікановий шар, потім розташовується шар кортекса, або кори. На поверхні є зовнішня мембрана. Зовні спору покрита багатошаровою оболонкою. Спороутворення - процес освіти проходить ряд стадій: 1) підготовча - завершується реплікація ДНК; клітина містить 2 або більше нуклеоида, один з них локалізується в спорогенной зоні, решті в спорангії, одночасно синтезується діпіколіновая кислота. 2) стадія предспори: з боку цитоплазматичної мембрани вегетативної клітини відбувається вростання подвійної мембрани, що відокремлює нуклеоїд з ділянкою ущільненої цитоплазми, в результаті утворюється проспорив. 3) утворення оболонок - між мембранами проспорив утворюється зародковий пептідоглікановий шар, над ним відкладається товстий пептідоглікановий шар кортекса і навколо його зовнішньої мембрани формується спорова оболонка. 4) закінчується освіту всіх структур суперечки, вона стає термостійкий, набуває форми і займає певне положення в клітині.
5.Внутрішні будова прокаріотних мікроорган
Цитоплазма - складна колоїдна сист, не рухається, распологаясь ядерний апарат, кіт не відокремлений від неї ніякими мембранами. Сост з цитозолю - гомогенної фракції, що включає розчинні компоненти РНК, ф-ти, продукти метаболізму, і структурних елементів - внутрішньоцитоплазматична мембран, рибосом (здійснюють біосинтез білка), амінок-т, включень, кіт образ у процесі життєдіяльності, і нуклеоида, крапельки нейтральних жирів, воску, сірки. У цитоплазмі можуть бути гранули глікогену. Нуклеоїд - ядро, сост з замкнутої в кільце двуспіральной нитки ДНК, кіт розглядають як одиночну бактеріальну хромосому, або генофор. Цитоплазматична мембрана - напівпроникна липопротеідна структура, яка відокремлює цитоплазму від клітинної стінки - поліфункціональна структура кл. Тришарове будова. Білково-ліпідний комплекс. Близько 10% сухого в-ва; 25-40% фосфоліпідів; 20-75% білка; 6% вуглеводів. Побудована з 2 мономолекулярних шарів, між якими розташований ліпідний шар, що складається з 2 рядів молекул ліпідів. Ф-ції: сприймає всю хім інф-цію, Вступники у кл з зовн ср; явл основним осмотіч бар'єром, завдяки кіт у кл підтримується определ осматіч Р; спільно з кл стінкою бере участь в регуляції росту і кліть ділення бактерій; в регуляції процесу реплікації хромосом і плазмід; містить велику кількість ф-тів; з нею пов'язані джгутики і апарат регулював їх рухів, бере участь в процесі транспорту піт в-в у кл і транспорту з кл продуктів її життєдіяльності, різних ф-тів і екзотоксинів; в синтезі компонентів клітинної стінки і утворений Мезас.
6. Джгутики, ворсинки, пили. Способи пересування прокаріотів. Методи визначення рухливості у бактерій
Джгутики - тонкі, довгі, ниткоподібні, білкові освіти. З білка лабелліна. Він володіє скоротливою здатністю. За хар-ру розташований джгутиків і їх кол-ву различ: монотріхі (один полярно розташований джгутик), лофотрихи (пучок джгутиків на одному кінці), анфітріхі (за 1 або пучок на протилежних кінцях кл), перитрихи (по всій поверхні), атріхі (нерухомі). Вони хар-ни для молодих культур, з віком або за нестачі піт ср джгутики втрачаються. Рухливості бактерій определ мікро і макроскопіч методами. При мікроскопіч готують мазки роздавленої або висячої краплі. макроскопіч - методом уколу, посівом на полужіткій агар. Джгутики сост з 3 компонентів: базальне тільце, гачок, спіральна джгутикових нитку. Баз тільце сост з системи особливих кілець. У гр-бактеріями їхньою 2 пари: зовнішня L і Р і внут S і М. У гр + S і М. в рез-ті їх обертання відносно один одного відбувається обертання джгутика. Гачок - вигнутий білковий циліндр, що виконує ф-цію гнучкого зв'язує ланки між базальним тільцем і жорсткої ниткою джгутика. Ьазальное тільце - складна структура, що складається з центрального стрижня і кілець. Пересування прокаріотів здійснюється обертальними, поступальними, згинальних рухів. Пили. У бактерій, які є носіями плазмід є ниткоподібні структури білкової природи. Утворені з білка пілліна. Синтез цих ворсинок знаходиться під контролем плазмідних генів. Пили явл апаратом кон'югації з їх допомогою встановлюється контакт між кл донорам і кл реципієнтом. Існує 2 класу пілей - статеві і загального типу (фімбрії). Секс-пили - 1,2 і більше 5 на 1 кл. Ворсинки (фімбрії). Короткі нитки, к-ть кіт може досягати багато тис. з їх допомогою бактерії прикріплюються до певних поверхонь. Для багатьох хвороботворних бактерій фібриля явл фактором патогенності, тому що з їх допомогою бактерії прикріплюються до чуство кл і явл ф-ром адгізіі. Викликають аглютинацію еритроцитів.
7.Простие і складні методи фарбування мікроорган
Практичне значення. Препарати забарвлюють простим і складним методами. Простий метод. Для фарбування використовують який-небудь один барвний р-р. На фіксований мазок наносять розчин одного барвника: метиленовим синім забарвлений 4 хв, генціанвіолетом - 2 хв, фуксином - 1 хв. Фарбу змивають водою, мазок висушують фільтрувальним папером. На готовий мазок наносять краплю імерсійного масла, мікроскопіруют. Проста забарвлення дозволяє швидко ознайомиться з морфологією бактерій. Складні методи. Застосовують кілька р-рів барвнику і реактивів. Вони дозволяють визначити морфологію бактерій, їх тинкторіальні особливості та наявність структурних елементів кл, що має важливе диференційно-діагностичне значення. Одним з методів явл фарбування по Граму: на фіксований препарат на 2 хв накладають фільтрувальний папір, просочену генціанвіолетом. Папірець знімають і наносять розчин Люголя на 2 хв. Зливають, мазок обробляють спиртом 30 сек, промивають водою і забарвлюють фуксином 1 хв. За рез-ту фарбування определ тип клітинної стінки. Методи забарвлення суперечка: метод Меллера: фіксований мазок протруюють хромової к-тій 2 хв, промивають водою, висушують фільтрувальним папером, накладають фільтрувальн папір на мазок і наносять фуксин, препарат підігрівають, забарвлюють 7 хв, папірець і фарбу зливають і обробляють сірчаної к-тій 5 сек, промивають водою, забарвлений метиленової синню 4 хв, промивають водою, просушують фільтрувальним папером. Мікроскопують: суперечки рожево-червоні, вегетативна кл - синя. Метод Златогорова - такий же, тільки не обрабатив хромової к-тій. Метод Пєшкова: мазок фіксують, фарбують метиленової синню з підігрівом, змивають водою, дофарбовувати розчином нейтрального Червоного 10 сек, змивають водою, висушують фільтрувальним папером. Спори сині, кл - червона.
8. Культивування аеробних мікроорган в умовах лабораторії. Методи виділення чистої культури аеробних мікроорган
Мікроорганізми, вирощені на штучних піт ср - мікробними культурами, а отримання їх зростання на піт ср - культивуванням. Для культивування необхідні умови: оптимальний температурний режим з урахуванням, до якої групи належить досліджуваний вид бактерій, відповідні піт ср, аеробіоз (або анаеробіоз). Для забезпечення постійної оптимальної температури служать термостати. Лабораторний термостат - шафа з подвійними стінками, зовні облицьований матеріалом непроводнікамі тепла (пластик), внутрішня стінка металева. Між двома металевими стінками є вода (або повітря), що підігрівається електрикою. Від нагрітої води через внутрішню металеву стінку тепло надходить в термостат. Всередині є сітчасті полички, на яких розміщують штативи з пробірками, чашки Петрі і ін Постійна температура підтримується за допомогою терморегуляторів - при досягненні температури заданого рівня автоматично відбувається відключення приладу; при зниженні температури термостат знову включається автоматично. Крім забезпечення температурного режиму, слід враховувати тип дихання мікроорганізмів: при аеробному типі дихання ніяких додаткових умов створювати не потрібно. Виділення з суміші одного виду мікроба - виділення чистої культури. Один з перших методів запропонував Пастер - метод розведення. Досліджуваний матеріал послідовно розводять в рідкій піт середовищі: беруть ряд пробірок з МПБ, досліджуваний матеріал вносять у першу пробірку, перемішують, з неї переносять у другу і т.д. Пастер припускав, що в останній пробірці можливе зростання одного виду мікроба. Але це не так. Метод Коха - застосовується щільне середовище - використовуючи принцип Пастера, досліджуваний матеріал розводять у 4-5 пробірках з розплавленим і охолодженим МПА, обережно вміст пробірки виливають у чашку Петрі і розподіляють середу тонким шаром, чашку закривають, і коли А охолоне перевертають догори дном. Ставлять у термостат. Там де концентрація мікробів менше виростають ізольовані один від одного колонії. На звороті відзначають потрібну колонію, роблять посіви на МПБ і МПА і виростає чиста культура. Метод Дрігальского - метод пластинчастого посіву. беруть 4-5 чашок Петрі. Агарового середовища розплавляють в колбі, розливають у чашки і ставлять в термостат догори дном. Шпателем Дрігальского або пастерівською піпеткою рівномірно розтирають на поверхні середовища краплю. Цим же шпателем розтирають на поверхні другої чашки і т.д. Поміщають в термостат догори дном. Потрібну культуру засівають в МПА і МПБ. Біологічний метод - досліджуваний матеріал вводять сприйнятливому живий. При наявності патогенного мікроба живий гинуть, їх розкривають і роблять посіви. Метод Шукевич - рухливий мікроб переходить на поверхню А з конденсаційної рідини, з верхнього краю виросла культури роблять посіви і отримують чисту культуру. Хімічний метод - до піт ср додають хім в-ва, кіт діють на одних вбивчо, в інших затримується зростання, а треті не сприйнятливі.
9.Хіміческій склад бактеріальної Кл 1.Історія розвитку мікро
2.Основні св-ва прокаріотних мікроорган
3.Типи клітинних стінок прокаріотних мікроорган
4.Спори і спорогенез у прокаріотних мікроорган
5.Внутрішні будова прокаріотних мікроорган
6. Джгутики, ворсинки, пили. Способи пересування прокаріотів. Методи визначення рухливості у бактерій
7.Простие і складні методи фарбування мікроорган. Практичне значення
8. Культивування аеробних мікроорган в умовах лабораторії. Методи виділення чистої культури аеробних мікроорган.
9.Хіміческій склад бактеріальної кл
10. Вплив фізичних факторів на мікроорган, практичне значення. Стерилізація.
11. Вплив химич факторів. Дезінфекція
12. Вплив биологич факторів на мікроорган. Антибіотики. Визначення чутливості мікроорган до антибіотиків. Дизбактеріоз і способи його усунення.
13.Внешняя форма прокаріотних мікроорган
14.Роль вітчизняних вчених у розвитку мікро
15. Мікроскопічні гриби (будова, св-ва, способи розмноження).
16. Мікроскопічні гриби (визначення, класифікація, практичне значен).
17.Рост і розмноження прокаріотів. Крива росту
18. Нормальна і аномальна мікрофлора молока. Санітарно - бактеріологічне дослідження молока
19. Участь мікроорган у кругообігу вуглецю в природі.
20. Участь мікроорган у кругообігу азоту в природі
21. Морфологічні та физиологич особливості рикетсій, хламідій і мікоплазм.
22. Актиноміцети (св-ва, практичне значення).
23. Культивування анаеробних мікроорганізмів в умовах лабораторії.
24.Пітательние середовища для культивування прокаріотів і еукаріотів. Хімічний склад, способи приготування, класифікація.
25. Санітарно - бактеріологічне дослідження води і повітря. Практичне значення
26. Класифікація мікроорган по Берги. Номенклатура мікроорган. Поняття про вид мікроорган
27. Ферменти мікроорган (св-ва, класифікація, виявлення сахаролітіч і протеолітіч ферментів у мікроорган).
1.Історія розвитку мікро
5 етапів: 1. евристичний, 2. морфологічний, 3. фізіологічний, 4. імунологічний, 5. молекулярно-генетичний. 1) 4-3 ст до н.е. - 16 в н.е. Гіппократ, Варрон. Джироламо вперше ввів поняття інфекція, висунув теорію про виникнення інфекційної хвороби. Він стверджував, що є 3 шляхи: при безпосередньому дотику; апосредовательно через предмети; на відстані. 2) перші конструктори мікроскопа - брати Ганс і Захарій Янсон. У 1590г збільшення в 32 рази; Левенгук - збільшення в 300 разів. У 1974 - еритроцити людини, жаб і риб; у 1675 - найпростіші; в 1677 - сперматозоїди. 3) Луї Пастер - довів наявність життя без кисню - відкрив анаеробних мікроорганізмів, відкрив процес бродіння, ввів пастеризацію. Вперше в житті отримав вакцини від холери або пастерілеза птахів, сибірської виразки, від сказу. Роберт Кох - відкрив збудника туберкульозу, ввів в практику використання щільних пітат середовищ, розробив методи отримання чистих культур мікроорган, способи фарбував мікроорган. Іванівський відкрив віруси. Мечников - вивчив холеру людини, туберкульоз, основоположник вчення про антагонізм (протистояння між мікробами). Він створив клітинну теорію імунітету (фагоцитоз). Ерліх - теорія імунітету тільки гуморальна (у сироватці крові). 4) до 1940 р. Вчені відкривають явище алергії. Райський - поняття імунологічної пам'яті. Медовар - явище імунологічних толерантності - неотвечаемость імунної системи. 5) Розвиток генної інженерії та біотехнології. Світ мікробів об'єднані віруси, бактерії, еукаріоти.
2.Основні св-ва прокаріотних мікроорганізмів
Розмір кл 0,5-5 мкм. Зовнішня форма - у вигляді кульок - коки, палички, звивисті, 1 клітина. Відсутня ядро, є двухнітчатая кільцева ДНК, розташована в цитоплазмі і не відокремлена від неї ядерною мембраною. Основа клітинної стінки - пептидогликан або муреин. Здатність до фагоцитозу і піноцитозу відсутня. Дихання у бактерій аеробне, анаеробне або факультативне анаеробне. Головне св-во - наявність плазмід - більш короткі ділянки ДНК, не пов'язані з ядерними. У плазмідах записується інформація про стійкість до дезінфектантів, до антибіотиків.
3.Типи клітинних стінок прокаріотних мікроорган
Клітинна стінка гр + бактерій щільно прилягає до цитоплазматичній мембрані, масивна, її товщина знаходиться в межах 20-100 нм. Для неї характерна наявність тейхоєвих кислот, вони пов'язані з пептидогліканів та є полімери трехатомного спирту - гліцерину або пятіатомний спирту - рібіт, залишки яких з'єднані фосфодіефірних зв'язками. Тейхоєвих кислоти зв'язують іони магнію і беруть участь у транспорті їх у клітку. У складі клітинної стінки гр + прокаріотів в невеликих кількостях також знайдені полісахариди, білки і ліпіди. Пептидогликан - основний компонент клітинної стінки і становить від 50-90%. Значно вже пори, ніж у гр-, тому що мікрофібрил пептидоглікану зшиті компактно, тому при забарвленні фіксують фіолетовий комплекс генціанвіолет і йоду, не піддаються обесвечіванію етанолом і тому не сприймають додатковий барвник фуксин, залишаючись пофарбованими у фіолетовий колір. Клітинна стінка гр-бактерій багатошарова, товщина її 14-17 нм. Внутрішній шар - пептидоглікану, який утворює тонку безперервну сітку, навколишнє клітку. Пептидогликан становить від 10-10%. Пептидогликан містить тільки мезодіамінопімеліновую кислоту і не має лізину. Зовнішній шар клітинної стінки - зовнішня мембрана - складається з фосфоліпідів, ліпополісахариди, ліпопротеїну і білків. У зовнішній мембрані містяться білки основи (матричні), вони міцно пов'язані з пептідоглікановим шаром. Однією з їх функцій є формування в мембрані гідрофільних пір, через які здійснюється дифузія молекул. Значно ширше пори, ніж у гр +, тому що мікрофібрил пептидоглікану зшиті менш компактно, тому при забарвленні фіолетовий комплекс генціанвіолет і йоду буде вимиватися швидше. При додатковому нанесенні фуксину забарвлюються в червоний колір. Матричні білки виконують ще роль рецепторів для деяких фагів. Ліпополісахариди (ЛПС) клітинних стінок гр-бактерій складається з ліпіду А та полісахариду. Токсичний для тварин ЛПС отримав назву ендотоксин. Тейхоєвих кислоти у гр-бактерій не виявлено. Структурні компоненти клітинної стінки гр-бактерій відмежовані від цитоплазматичної мембрани і розділені проміжком, званим периплазмі або періплазматіческім простором.
4.Спори і спорогенез у прокаріотних мікроорган
Суперечки - особливий тип покояться репродуктивних клітин, характерізующ-ся різко зниженим рівнем метаболізму і високою резистентністю. Бактеріальна спору формується всередині материнської клітини і наз-ся ендоспори. Суперечки у прокаріотів це не спосіб розмноження, потрібна для збереження бактерій в несприятливих умовах зовнішнього середовища. Спороутворення володіють бацили, кластрідіі, споросарціна. Розташовуються центрально, субтермінально (ближче до кінця), термінально - на кінці паличок. У бацил діаметр суперечки не перевищує діаметра вегетативної клітини, а у кластрідій діаметр суперечки більше. Суперечки складається з спороплазми з нуклеоїдом, білком і діпіколіновой кислотою. Спороплазма оточена цитоплазматичною мембраною, до неї прилягає пептідоглікановий шар, потім розташовується шар кортекса, або кори. На поверхні є зовнішня мембрана. Зовні спору покрита багатошаровою оболонкою. Спороутворення - процес освіти проходить ряд стадій: 1) підготовча - завершується реплікація ДНК; клітина містить 2 або більше нуклеоида, один з них локалізується в спорогенной зоні, решті в спорангії, одночасно синтезується діпіколіновая кислота. 2) стадія предспори: з боку цитоплазматичної мембрани вегетативної клітини відбувається вростання подвійної мембрани, що відокремлює нуклеоїд з ділянкою ущільненої цитоплазми, в результаті утворюється проспорив. 3) утворення оболонок - між мембранами проспорив утворюється зародковий пептідоглікановий шар, над ним відкладається товстий пептідоглікановий шар кортекса і навколо його зовнішньої мембрани формується спорова оболонка. 4) закінчується освіту всіх структур суперечки, вона стає термостійкий, набуває форми і займає певне положення в клітині.
5.Внутрішні будова прокаріотних мікроорган
Цитоплазма - складна колоїдна сист, не рухається, распологаясь ядерний апарат, кіт не відокремлений від неї ніякими мембранами. Сост з цитозолю - гомогенної фракції, що включає розчинні компоненти РНК, ф-ти, продукти метаболізму, і структурних елементів - внутрішньоцитоплазматична мембран, рибосом (здійснюють біосинтез білка), амінок-т, включень, кіт образ у процесі життєдіяльності, і нуклеоида, крапельки нейтральних жирів, воску, сірки. У цитоплазмі можуть бути гранули глікогену. Нуклеоїд - ядро, сост з замкнутої в кільце двуспіральной нитки ДНК, кіт розглядають як одиночну бактеріальну хромосому, або генофор. Цитоплазматична мембрана - напівпроникна липопротеідна структура, яка відокремлює цитоплазму від клітинної стінки - поліфункціональна структура кл. Тришарове будова. Білково-ліпідний комплекс. Близько 10% сухого в-ва; 25-40% фосфоліпідів; 20-75% білка; 6% вуглеводів. Побудована з 2 мономолекулярних шарів, між якими розташований ліпідний шар, що складається з 2 рядів молекул ліпідів. Ф-ції: сприймає всю хім інф-цію, Вступники у кл з зовн ср; явл основним осмотіч бар'єром, завдяки кіт у кл підтримується определ осматіч Р; спільно з кл стінкою бере участь в регуляції росту і кліть ділення бактерій; в регуляції процесу реплікації хромосом і плазмід; містить велику кількість ф-тів; з нею пов'язані джгутики і апарат регулював їх рухів, бере участь в процесі транспорту піт в-в у кл і транспорту з кл продуктів її життєдіяльності, різних ф-тів і екзотоксинів; в синтезі компонентів клітинної стінки і утворений Мезас.
6. Джгутики, ворсинки, пили. Способи пересування прокаріотів. Методи визначення рухливості у бактерій
Джгутики - тонкі, довгі, ниткоподібні, білкові освіти. З білка лабелліна. Він володіє скоротливою здатністю. За хар-ру розташований джгутиків і їх кол-ву различ: монотріхі (один полярно розташований джгутик), лофотрихи (пучок джгутиків на одному кінці), анфітріхі (за 1 або пучок на протилежних кінцях кл), перитрихи (по всій поверхні), атріхі (нерухомі). Вони хар-ни для молодих культур, з віком або за нестачі піт ср джгутики втрачаються. Рухливості бактерій определ мікро і макроскопіч методами. При мікроскопіч готують мазки роздавленої або висячої краплі. макроскопіч - методом уколу, посівом на полужіткій агар. Джгутики сост з 3 компонентів: базальне тільце, гачок, спіральна джгутикових нитку. Баз тільце сост з системи особливих кілець. У гр-бактеріями їхньою 2 пари: зовнішня L і Р і внут S і М. У гр + S і М. в рез-ті їх обертання відносно один одного відбувається обертання джгутика. Гачок - вигнутий білковий циліндр, що виконує ф-цію гнучкого зв'язує ланки між базальним тільцем і жорсткої ниткою джгутика. Ьазальное тільце - складна структура, що складається з центрального стрижня і кілець. Пересування прокаріотів здійснюється обертальними, поступальними, згинальних рухів. Пили. У бактерій, які є носіями плазмід є ниткоподібні структури білкової природи. Утворені з білка пілліна. Синтез цих ворсинок знаходиться під контролем плазмідних генів. Пили явл апаратом кон'югації з їх допомогою встановлюється контакт між кл донорам і кл реципієнтом. Існує 2 класу пілей - статеві і загального типу (фімбрії). Секс-пили - 1,2 і більше 5 на 1 кл. Ворсинки (фімбрії). Короткі нитки, к-ть кіт може досягати багато тис. з їх допомогою бактерії прикріплюються до певних поверхонь. Для багатьох хвороботворних бактерій фібриля явл фактором патогенності, тому що з їх допомогою бактерії прикріплюються до чуство кл і явл ф-ром адгізіі. Викликають аглютинацію еритроцитів.
7.Простие і складні методи фарбування мікроорган
Практичне значення. Препарати забарвлюють простим і складним методами. Простий метод. Для фарбування використовують який-небудь один барвний р-р. На фіксований мазок наносять розчин одного барвника: метиленовим синім забарвлений 4 хв, генціанвіолетом - 2 хв, фуксином - 1 хв. Фарбу змивають водою, мазок висушують фільтрувальним папером. На готовий мазок наносять краплю імерсійного масла, мікроскопіруют. Проста забарвлення дозволяє швидко ознайомиться з морфологією бактерій. Складні методи. Застосовують кілька р-рів барвнику і реактивів. Вони дозволяють визначити морфологію бактерій, їх тинкторіальні особливості та наявність структурних елементів кл, що має важливе диференційно-діагностичне значення. Одним з методів явл фарбування по Граму: на фіксований препарат на 2 хв накладають фільтрувальний папір, просочену генціанвіолетом. Папірець знімають і наносять розчин Люголя на 2 хв. Зливають, мазок обробляють спиртом 30 сек, промивають водою і забарвлюють фуксином 1 хв. За рез-ту фарбування определ тип клітинної стінки. Методи забарвлення суперечка: метод Меллера: фіксований мазок протруюють хромової к-тій 2 хв, промивають водою, висушують фільтрувальним папером, накладають фільтрувальн папір на мазок і наносять фуксин, препарат підігрівають, забарвлюють 7 хв, папірець і фарбу зливають і обробляють сірчаної к-тій 5 сек, промивають водою, забарвлений метиленової синню 4 хв, промивають водою, просушують фільтрувальним папером. Мікроскопують: суперечки рожево-червоні, вегетативна кл - синя. Метод Златогорова - такий же, тільки не обрабатив хромової к-тій. Метод Пєшкова: мазок фіксують, фарбують метиленової синню з підігрівом, змивають водою, дофарбовувати розчином нейтрального Червоного 10 сек, змивають водою, висушують фільтрувальним папером. Спори сині, кл - червона.
8. Культивування аеробних мікроорган в умовах лабораторії. Методи виділення чистої культури аеробних мікроорган
Мікроорганізми, вирощені на штучних піт ср - мікробними культурами, а отримання їх зростання на піт ср - культивуванням. Для культивування необхідні умови: оптимальний температурний режим з урахуванням, до якої групи належить досліджуваний вид бактерій, відповідні піт ср, аеробіоз (або анаеробіоз). Для забезпечення постійної оптимальної температури служать термостати. Лабораторний термостат - шафа з подвійними стінками, зовні облицьований матеріалом непроводнікамі тепла (пластик), внутрішня стінка металева. Між двома металевими стінками є вода (або повітря), що підігрівається електрикою. Від нагрітої води через внутрішню металеву стінку тепло надходить в термостат. Всередині є сітчасті полички, на яких розміщують штативи з пробірками, чашки Петрі і ін Постійна температура підтримується за допомогою терморегуляторів - при досягненні температури заданого рівня автоматично відбувається відключення приладу; при зниженні температури термостат знову включається автоматично. Крім забезпечення температурного режиму, слід враховувати тип дихання мікроорганізмів: при аеробному типі дихання ніяких додаткових умов створювати не потрібно. Виділення з суміші одного виду мікроба - виділення чистої культури. Один з перших методів запропонував Пастер - метод розведення. Досліджуваний матеріал послідовно розводять в рідкій піт середовищі: беруть ряд пробірок з МПБ, досліджуваний матеріал вносять у першу пробірку, перемішують, з неї переносять у другу і т.д. Пастер припускав, що в останній пробірці можливе зростання одного виду мікроба. Але це не так. Метод Коха - застосовується щільне середовище - використовуючи принцип Пастера, досліджуваний матеріал розводять у 4-5 пробірках з розплавленим і охолодженим МПА, обережно вміст пробірки виливають у чашку Петрі і розподіляють середу тонким шаром, чашку закривають, і коли А охолоне перевертають догори дном. Ставлять у термостат. Там де концентрація мікробів менше виростають ізольовані один від одного колонії. На звороті відзначають потрібну колонію, роблять посіви на МПБ і МПА і виростає чиста культура. Метод Дрігальского - метод пластинчастого посіву. беруть 4-5 чашок Петрі. Агарового середовища розплавляють в колбі, розливають у чашки і ставлять в термостат догори дном. Шпателем Дрігальского або пастерівською піпеткою рівномірно розтирають на поверхні середовища краплю. Цим же шпателем розтирають на поверхні другої чашки і т.д. Поміщають в термостат догори дном. Потрібну культуру засівають в МПА і МПБ. Біологічний метод - досліджуваний матеріал вводять сприйнятливому живий. При наявності патогенного мікроба живий гинуть, їх розкривають і роблять посіви. Метод Шукевич - рухливий мікроб переходить на поверхню А з конденсаційної рідини, з верхнього краю виросла культури роблять посіви і отримують чисту культуру. Хімічний метод - до піт ср додають хім в-ва, кіт діють на одних вбивчо, в інших затримується зростання, а треті не сприйнятливі.
75-85% вода, 25-15% - сухий залишок. Провідна роль належить 4 осн елемента, кіт отримав зв органогени: кисень - 30% сухого залишку, Н - 6-8%, С-45-55%, N-8-15%. Вода у кл може бути в 2 станах: вільна вода, кіт явл розчинить для крісталіч в-в і в ній відбувається рух іонів; зв'язана вода, кіт входить до складу білків, жирів і вуглеводів. У бактеріологіч кл на частку білків - 60-70%, вуглеводи - 20%, ліпіди -1-2%. Підвищений містив ліпідів надає клітині кислотно-спирто-щелочеустойчівость. Білки - високомолекулярні полімерні сполуки, які утворюються при гідролізі амінок-ти - складні - протеїди, прості - протеїни. Ф-ції білків - гол структурний матеріал для всіх клітинних мембран, вони забезпечивши рухово ф-ції, транспорт пітат в-в через мембрану. Вуглеводи - багатоатомні спирти (вабить, дульцит) і полісахариди (глікоген). Грають енергітіч роль у кл. Ліпіди - жирні к-ти і нейтральні жири, фосфоліпіди цітоплазматіч мембрани. Явл резервом кл, використовують як вихідні компонент для синтезу білка. Мін в-ва - 3-10% сухий залишку. Мікро та макроелементи. Мікробні ф-ти. Гол св-ва: специфічність і термолябільность. У мікроорганізм набір ф-тів генетично закріплений і передається у спадок. Различ ф-ти: 1. екзоф-ти - виділ кл в зовнішнє середовище і каталізує розкладений складних в-в субстрату до більш простих. 2. ендофіт-ти - локалізуються в самій кл і бере участь у внутрішньоклітинних процесів обміну в-в. 3. конститутивні - явл постійного компонентом кл і можуть бути виявлені навіть при відсутності в середовищі субстрату, кіт вони каталізують. 4. адаптивні - виробляються кл тільки тоді, коли в середовищі появл соотвествующий субстрат. Розрізняють: оксіредуктазу, трансферазу, гідролаз, ліази, ізомерази, лігази і кіназу. Наявність ф-тів можна виявити за допомогою спец середовищ.
10. Вплив фізичних факторів на мікроорган, практичне значення
Стерилізація. Фізичні фактори: температура, світло, електрику, висушування, промениста енергія, осмотичний Р та ін Вплив температури. Для кожного виду бактерій є певна температура розвитку, і в залежності від меж цієї температури бактерії можуть бути розділені на 3 фізіологічні групи: Психрофільні, мезофільні і термофільні. Високі і низькі температури по-різному впливають на мікроби. При низьких температурах мікробна кл переходить в стані анабіозу. Низькі температури припиняють гнильні і бродильні процеси. Висока температура в особливості нагрівання парою під тиском, згубно діє на мікроби. Чим більше температура виходить за межі максимуму, тим швидше загинуть вегетативні ф-ми мікроорган. В основі бактерицидної дії високих температур лежить пригнічення ферментів: каталази, дегідрази, - денатурація білків і порушення осмотичного бар'єру. Спори бактерій більш стійкі до дії високої температури. Застосування високої температури є найпоширенішим, зручним і надійним способом стерилізації - процес, що викликає загибель патогенних і непатогенних мікроорган і їх форм в будь-якому матеріалі. Існують різні методи стерилізації: фізичний та хімічний. Фізичний - сухим жаром, вологим жаром, фільтруванням. Сухим жаром: стерилізація сухою парою в печах Пастера (сушильні шафи) (чистий скляний посуд), прожарювання (фламбірованіе) на вогні (металеві предмети). Вологим жаром: кип'ятіння, автоклавування (пором в автоклавах: посуд в папері, перев'язувальні матеріали), текучим паром (без тиску в апараті Коха: поживні середовища), тіндалізація (стерилізація у водяній лазні: білок містять в-ва), пастеризація - гинуть вегетативні форми мікробів, суперечки зберігаються, але швидке охолодження перешкоджає їх проростанню і подальшому розмноженню мікробів. Фільтрування - рідини. Хімічний-в лабораторній практиці має обмежене застосування і зводиться до консервації, з метою попередження бактеріального забруднення піт ср, вакцин. Піт ср консервують хлороформом, толуолом. Вакцини - фенолом, формаліном. Для дезінфекції - фенол, хлорамін, спирт.
11. Вплив химич факторів
Дезінфекція. Хіміотаксіс - відповідна реакція бактерійних клітини на проникаюче в неї речовину. Розрізняють позитивний і негативний хіміотаксіс. Якщо в краплю води, що містить рухливі бактерії, опустити один кінець капіляра, наповненого розчином пептона, через кілька секунд у отвір капіляра накопичиться велика кількість бактерій - позитивний хіміотаксіс. Коли бактерії уникають диффундирующего у воду в-ва - негативний хіміотаксіс. У малих концентраціях + Хіміотаксіс викликають пептон, мінеральні солі. Зворотна дія - вільні кислоти, луги і спирти. Хімічні речовини можуть гальмувати або повністю пригнічувати ріст мікроорганізмів. Якщо хімічна речовина пригнічує ріст бактерій, але після видалення його ріст знову відновлюється, то говорять про бактеріостазе, тобто про затримку росту мікроба, а не про його загибель. При бактерицидну дію хімічний агент викликає загибель клітин. Бактерицидну дію хімічних речовин має величезне практичні значення, так як цей факт враховується при використанні хімічної в-ва в якості дезінфектанту. Бактерицидні хім в-ва за дією на бактерії можна підрозділити на поверхнево-активні речовини, барвники, спирти, кислоти, луги, феноли та їх похідні, солі важких металів, окислювачі та групу формальдегіду. Поверхнево-активні в-ва змінюють енергетичне співвідношення. Бактеріальні клітини втрачають - і набувають + заряд, що спричиняє порушення нормальної функції цитоплазматичної мембрани. До таким по-вам відносять мила, жирні к-ти, миючі засоби. Вони ушкоджують клітинну стінку, але не проникають у клітину.
Барвники мають властивості затримувати ріст бактерій: діамантовий зелений, риванол, фуксин, метіонін, кіт порушують процеси клітинного ділення.
Фенол, крезол та їх похідні спочатку ушкоджують клітинну стінку, а потім і білки клітини. Деякі речовини цієї групи пригнічують ф-цію коферменту (діфосфопірідін нуклеотиду), що бере участь в дегидрировании глюкози та молочної кислоти.
Солі важких металів (свинець, мідь, цинк, срібло, ртуть) викликають коагуляцію білків клітини. При взаємодії солі важкого металу з білком утворюються альбумінати металу і вільна кислота.
Ряд металів (срібло, мідь, і ін) мають олігодінаміческім дією (бактерицидної здатністю). Окислювачі діють на сульфгідрильні групи активних білків. До них відносяться Cl, що вражає гідролази, амілази, протеази бактерій, хлорне вапно, хлорамін, що вживаються з метою дезінфекції, Хорошим окислювачем є йод у вигляді йодного розчину, який не тільки окисляє активні групи білків цитоплазми бактерій, але і викликає їх денатурацію. Окислюючими властивістю володіють перманганат калію, перекис водню та інші речовини. Спирти. Спирт у 70%-ної концентрації володіє бактерицидною активністю відносно білків мікробної клітини, які згортаються і випадають на поверхню мікроба і зменшують проникнення спирту в глубоколежащие шари бактерій. Кислоти і підстави. Бактерицидна дія пов'язана зі зміною рН живильного середовища. На практиці застосовуються як засоби знищення мікробів на об'єктах окруж ср (сірчана, оцтова), для створення певної зони рН в мікробіологічних середовищах; при виготовленні та консервуванні харчових продуктів (оцтова), тому що дозволяють створити середовища, несприятливу для розвитку гнильних мікроорган. Луги гідролізують колоїдні системи, внаслідок чого відбувається загибель мікробної клітини. Формальдегід приєднується до аміногрупи білків і викликає їх денатурацію. Хімічні речовини (хлор, сірчана кислоти, гідроокис натрію, феноли, формальдегід) широко використовують для дезінфекції та хімічної стерилізації. Дезінфекція - знищення тільки патогенних мікробів у зовнішній СР
12. Вплив биологич факторів на мікроорган. Антибіотики. Визначення чутливості мікроорган до антибіотиків. Дизбактеріоз і способи його усунення
Дія біологічних факторів виявляється в антагонізмі мікробів, коли продукти жізнедеятельностіодніх мікробів обумовлюють загибель інших. Антибіотики - різновид хіміотерапевтичних препаратів - хім в-ва, що виділяються деякими мікроорган і пригнічують ріст і розвиток тих чи інших мікробів. За походженням антибіотики можна розділити на чотири групи: 1.Антібіотікі, виділені з грибів. Гриби і актиноміцети є найбільш активними продуцентами антибіотиків. Так, Pinicillium notatum виділяє антибіотичну в-во - пеніцилін, Stгерtоmyсеs rimosus - окситетрациклін (тераміцин). 2.Антібіотікі, виділені з бактерій. Мають менше практичне значення, тому що ефективність їх нижче, ніж антибіотиків грибного походження. Продуценти антибіотиків - різноманітні бактерії. У більшості це сапрофіти, що живуть у грунті і мають яскраво виражену біохімічною активністю. До них відносяться граміцидин, поліміксин та ін Більшість антибіотиків токсичні при парентеральному введенні, тому застосовуються місцево. З. Антибіотики тваринного походження: еритрин, що виділяється з еритроцитів різних тварин, лізоцим - полісахарид, отриманий з яєчного білка. Клітинами деяких тканин продукується інтерферон, гнітючий життєдіяльність багатьох збудників вірусних інфекцій. 4.Антібіотікі рослинного походження. Фітонциди - отруйні в-ва, що виділяються рослинами (цибуля, часник, алое, кропива та ін.) Це леткі в-ва, що володіють антибактеріальними св-вами щодо багатьох м мікроорганізмів: стафілококів, стрептококів, кишкової палички та інших Характерним св-вом антибіотиків є вибірковість їхньої дії на мікробну клітину. Антибіотики вражають лише клітини мікроорганізмів. Існують антибіотики, що діють на деякі види мікроорганізмів (пеніцилін), і антибіотики, що мають широкий спектр антимікробної дії (тетрациклін). За механізмом дії на мікроби антибіотики діляться на бактерицидні, що вбивають бактерій (пеніцилін, стрептоміцин), і бактеріостатичні, що затримують зростання мікробів (всі інші антибіотики). По дії на мікроорганізми їх можна розділити на 2 групи: порушують синтез клітинної стінки і її мембран; порушують синтез ДНК, РНК і білка. Чутливість мікроба до антибіотиків перевіряється методами: 1) серійних розведень в рідкому або на щільному середовищі і 2) дифузії в агар із застосуванням дисків, що містять антибіотики. Стійкість мікробів до антибіотиків. Антибіотик завдає лише перше пошкодження збудника захворювання. Остаточна ліквідація інфекційного процесу здійснюється мікроорганізмом, мобілізуючим захисні сили на боротьбу зі збудником хвороби. Перш ніж застосовувати антибіотик, ветлікар повинен добре вивчити його св-ва, знати, при яких захворюваннях він використовується. Інакше можуть виникнути наслідки - токсикози, роздратування шлунково-кишкового тракту і т. п. Не слід занадто захоплюватися антибіотикотерапією, тому що непомірний прийом цих речовин може викликати розвиток суперінфекції - захворювань, пов'язаних з порушенням нормальних взаємин між мешканцями тваринного організму. У цьому випадки пригнічується збудник інфекції і нормальна мікрофлора організму. Починає посилено розмножуватися нечутлива до антибіотика мікрофлора, викликаючи дисбактеріоз, коліт і ін До багатьох антибіотиків розвивається алергія. Цілий ряд мікробів під впливом антибіотиків втрачають чутливість до того чи іншого антибіотика і утворюють антибіотико-резистентні форми. У таких мікробів змінюються ферментативні св-ва і антигенна структура, що призводить до посилення вірулентності. Застосування антибіотиків безглуздо. З метою запобігання виникнення резистентних мікробів при лікуванні необхідно комбінувати антибіотики або використовувати їх у поєднанні з іншими хімічними засобами.
13.Внешняя форма прокаріотних мікроорган
За формою клітин бактерії поділяються на три основні групи: кулясті, або коки, паличкоподібні і покручені. Коки - мають вигляд правильного кулі, еліпса, бобу, від взаємного розташування клітин після поділу розрізняють: мікрококи, стафілококи, диплококи, стрептококи, тетракоккі і сарцини. Утворюються при розподілі в одній площині. Мікрококи діляться в рівних площинах і розташовуються поодинці, парами або безладно. Стафілококи - діляться в різних площинах і розташовуються несиметричними гронами. Диплококи - діляться в одній площині, утворюючи попарно з'єднані коки. Стрептококи - коки, розташовані у вигляді ланцюжка. Тетракоккі - діляться в двох взаємно перпендикулярних площинах і розташовуються по 4. Сарцини - діляться в трьох взаємно перпендикулярних площинах і утворюють правильні пакети по 8-1б клітин і більше. Паличкоподібні - мають осьову симетрію і циліндричну форму тіла з округлими або загостреними кінцями. Діляться на дві групи: неспоровие палички - бактерії і палички, що утворюють спори, - бацили. Палички, у яких діаметр суперечки перевищує ширину вегетативної клітини - клостридії через свою веретеноподібної ф-ми. У залежності від взаємного розташування клітин паличкоподібні бактерії поділяють на одиночні і безсистемні скупчення, діплобактеріі і діплобацілли (розташовуються попарно), а також стрептобактеріі і стрептобацили (форми, що утворюють довгі чи короткі ланцюжки). До паличкоподібні формам т / ж відносять коринебактерії і фузобактерії. Коринебактерії - прямі або зігнуті палички з булавовидними потовщеннями на кінцях. Фузобактерії - довгі, товсті, з загостреними кінцями палички. Покручені - володіють спіральної симетрією. До них відносяться вібріони, спірили і спірохети. Вібріони - циліндрична вигнута форма, тіло представляє один неповний завиток у вигляді коми. Спірили - мають форму спірально звивистих паличок з 4-6 витками. Спірохети - еластичні спіралеподібні довгі клітини, що складаються з осьової нитки (аксістіля), цитоплазми з рибосомами та включеннями, нуклеоида, мезосом, цитоплазматичної мембрани і клітинної стінки. По кол-ву осьових фібрил различ: спірохети (більше 100), крістіспіри (більше 100), трепонеми (1-4), Боррель (15-20), лептоспіри (2).
14.Роль вітчизняних вчених у розвитку мікро
Велика заслуга в розвитку мікробіології Мечникова. До числа найважливіших робіт в області мікробіології відносяться його дослідження патогенезу холери людини, туберкульозу. Він є основоположником вчення про мікробному антагонізмі, який став основою для розвитку науки про антибіотикотерапії. Обгрунтував теорію довголіття і запропонував для продовження людського життя використовувати кисляк, яка згодом була названа мечніковских. Він організував першу в Росії бактеріологічну станцію. Розвиток нового напрямку в мікробіології - імунологію - вчення про несприйнятливості організму до інфекційних хвороб. Створив фагоцитарну теорію імунітету, розкрив сутність запалення як захисної реакції організму. Гамалії - відкрив пташиний вібріон (холероподобное захворювання птахів), названий на честь Мечникова, його ім'ям. Гамалі вперше спостерігав і описав явище спонтанного лізису бактерій під впливом бактеріофага, брав активну участь у створенні першої бактеріологічної станції в Росії і ввів у практику щеплення проти сказу. Габричевский першим почав читати курс бактеріології в Московському університеті. Випустив підручник «Медична мікро6іологія», створив у Москві перший бактеріологічний інститут. Виготовляли противодифтерийную сироватку. Встановив значення гемолітичного стрептокока як збудника скарлатини, розробив і запропонував вакцину проти неї. Вивчив кишкову паличку і се роль в патології людини. Ценковський вперше встановив близькість бактерій і синьо-зелених водоростей і описав явище симбіозу; обгрунтував класифікацію мікробів, віднісши бактерій до рослинних організмів; відкрив збудника Клек і розробив способи його попередження в цукровому виробництві. Виготовив вакцини проти сибірської виразки. Іванівський створив новий розділ - вірусологію. Встановив збудника мозаїчної хвороби тютюну, який отримав назву фильтрующегося вірусу. Виноградський розробив накопичувальні живильні середовища, виділив і вивчив азотфіксуючою і нитрифицирующие бактерії грунту, установив роль мікробів у кругообігу азоту, вуглецю, фосфору, заліза і сірки; вперше довів існування бактерій, самостійно синтезують органічні ве-ва, що дозволило відкрити новий тип харчування мікробів - аутотрофізм. Міхін відкрив збудника лептоспірозу ВРХ, розробив методику виготовлення формолвакціни проти паратифу телят і протівоколібактеріозной сироватки, а т / ж методику гипериммунизации коней при отриманні протівосібіроязвенной сироватки. Він є автором підручника «Курс приватної мікробіології для ветеринарних лікарів і студентів».
15. Мікроскопічні гриби (будова, св-ва, способи розмноження)
Властивості: майже всі вони аероби; джерело азоту - білки, пептони, амінокислоти, нітрати. Гетеротрофний тип харчування. Вегетативне тіло грибів - грибниця, або міцелій, складається з розгалужених ниток - гіфи. У вищих грибів міцелій септірован (гіфи розділені поперечними перегородками - септах на окремі ділянки). Гіфи здатні рости в довжину і розвиватися на поверхні або всередині живильного субстрату. Розрізняють: субстратний міцелій (вростає в живильне середовище); повітряний міцелій (на кінці розташовуються органи плодоношення). Клітинна стінка грибів товста, міцна містить целюлозу і хітин. Вона багатошарова, включає до 10 шарів, підтримує осмотичний тиск у клітині, визначає виборчу проникність стінки і є головним захистом від несприятливих факторів. Цитоплазматична мембрана тришарова і бере участь в обміні вещ-в. У цитоплазмі розташовуються 1 або кілька ядер з подвійною мембраною і з ядерцями, з хромосомами, мітохондрії, лізосоми, вакуолі, рибосоми, глікоген. У клітинах грибів відсутня крохмаль, одним з продуктів метаболізму є сечовина. У грибів розрізняють 3 типи розмноження: 1) вегетативне розмноження - у неветвящихся грибів відбувається брунькування, у розгалужених - утворюються різні види ендоспори (артроспори - утворюються при розпаді гіфів, хламідоспори - під час розпаду гіф, покриті товстою оболонкою, бластоспори - в результаті брунькування з подальшим відділенням клітини від батька). 2) безстатеве розмноження - у нижчих грибів формуються ендоспори (спорангіоспори), у вищих формуються екзоспори (конідії). 3) статеве розмноження - відбувається злиття гаплоїдних чоловічих і жіночих гамет. У нижчих грибів, що живуть у воді, відбувається злиття двох зооспор з утворенням цисти. У вищих грибів - злиття решт міцелію, якщо зливаються одностатеві клітини, то утворюються зігоспори, якщо різні клітини - ооспори. У багатоклітинних грибів після злиття різностатевих клітин виявляється спочиваюча клітина - сумка - аск - в ній може утворитися 4-8 статевих суперечка.
16. Мікроскопічні гриби (визначення, класифікація, практичне значен)
Гриби - без хлорофільние, нижчі, еукаріотичні, хемоорганотрофние мікроорганізми. Розрізняють: гриби-паразити, сапрофіти, симбіонти. Гриби за морфологічним ознакою поділяються на нижчі і вищі. Нижчі гриби мають одноклітинний міцелій. Вищі - багатоклітинний або септірованний і гіфи мають перегородки - септи. Нижчі гриби включають 4 класи: 1) зігоміцети (мукорози). 2) ооміцети (фітофтороз). 3) плазмодіевие (кила капусти). 4) хітрідіоміцети (рак картоплі). Вищі гриби: 1) септірованние - багатоклітинний міцелій або безміцеліальние гладкі гриби (дріжджі, пеніціліум). 2) базидіоміцети - дозрівання статевих спор відбувається на базидії (їстівні отруйні шапинкових грибів). 3) Недосконалі гриби - недосконалі гриби - відсутня статева стадія розмноження (мікотоксикози, трихофітія). Значення: зігоміцети використовуються в промисловості для отримання антибіотика раміціна, аскоміцети використовуються як продуценти антибіотиків, ауколоідов, ферментів.
17.Рост і розмноження прокаріотів. Крива росту
Зростання мікробів - збільшення її m, що відбувається в рез-ті надходження піт в-в і синтезу з них складних органічних об'єднаний. Під зростанням у бакто подразумев не тільки зростання окремої кл, але і загальне збільшення числа кл в рез-ті розмноження. Досягши певних розмірів, кл припиняє свій ріст і починає розмножуватися. Розмноження - здатність мікробів до самовідтворення, збільшення кол-ва особин мікробної популяції. Розмножуються простим поперечним поділом. Типи поділу бактерій. 1. клітинний розподіл випереджає поділ, що призводить до утворилися багатоклітинні паличок і коків. 2. Синхронне клітинний розподіл, при яких поділ і розподіл нуклеоида супроводжується освіта одноклітинних організмів. 3. Розподіл нуклеоида випереджає клітинний розподіл, обумовлюючи освіта многонуклеоідних бактерій. Поділ бактерій відбувається 3 способами: 1) розламування - коли кл ламається по всій ширині, 2) ковзне роздільний - кл не ламається, а формується перетяжка, 3) січної поділ - кл ламається і складається . Загальну закономірність росту і розмноження бактеріальної популяції прийнято показувати графічно у вигляді кривої, яка відображає залежність логарифма числа живих клітин від часу. Ця крива росту має S - подібну ф-му і дозволяє розрізнити кілька фаз росту, що змінюють один одного в певній послідовності: 1) лагфаза - не спостерігається зростання кл, не збільшивши їх кількість, а іноді знижується, 2) фаза лагоріфміческого зростання - подвоєння кол-ва кл за визначений час і цей проміжок часу зв періодом генерації. Він явл постійним для кожного виду мікроорганізму. У цей період кількість молодих живий кл переважає над кількістю неживих кл. 3) стаціонарна фаза - число нових зростаючих кл = числу відмерлих кл. 4) фаза відмирання - в середовищі переважають токсичні продукти обміну, мертвих клітин більше, ніж живих. У клітин можуть спостерігатися Морфологіч змінений (втрата джгутиків, гр + фарбуються як гр-).
18. Нормальна і аномальна мікрофлора молока. Санітарно - бактеріологічне дослідження молока
Якісний склад мікрофлори молока в момент його отримання з вимені представлений молочнокислими стрептококами і лактобактеріями. У процесі жізнедеятеольності вони зброджують молочний цукор, створюючи як основного продукту бродіння молочну к-ту. Іноді утворюється вуглекислий газ, летючі к-ти (оцтова), ароматичні в-ва (діацетил). Молочнокислі стрептококи - Streptococcus lactis, а т / ж Str. cremoris, використовуваний для виготовлення вершків, масла і сиру. До кислотним стрептокока відносять термофільний стрептокок Str. termophilus. При зброджуванні молочного цукру утворюється молочна к-та і невелика кількість ароматичних в-в. Термофільний стрептокок застосовується при виробництві заквасок для йогурту, ряжанки. Санітарно - бактеріологічне дослідження молока. Цей продукт може містити різні патогенні мікроорганізми і служити джерелом зараження челов та живе. Молоко - хороший продукт, в якому мікроорганізми швидко розмножуються. Ступінь обсіменіння молока бактеріями залежить від санітарних умов утримання та годування живий. Санітарно-биологич оцінку молока висловлюють загальним мікробним числом та колі-титром, а т / ж наявністю або отсутсвием патогенних бактерій та а / т до них (кільцева РА з молоком при бруцельозі). Ступінь обсіменіння бактеріями молока визначають пробою на редуктазу (р-ція відновлення - знебарвлення метиленового синього). Колі - титр определ посівом 1 мл кожного розведення на ср Кесслера. Загальне мікробне число визначають послідовним розведенням у 3-7 пробірок, з кожної пробірки беруть по 1 мл і вносять у стерильну чашку Петрі, заливають МПА, ставлять в термостат.
19. Участь мікроорган у кругообігу вуглецю в природі
З02 входить до складу органічних сполук, кіт є продуктами фотосинтезу. У повітрі його міститься небагатьом. Велика роль і підтримці рівноваги і кругообігу З02 мікроорганізмів. Роль мікробів в розкладанні клітковини. До складу клітковини) входить більше 50% всього органічного вуглецю біосфери. Після загибелі рослин вона розкладається, в рез-ті звільняється вуглець. Розкладання клітковини відбувається в аеробних і анаеробних умовах. Аеробне розкладання - під впливом актиноміцети і грибів родів аспергилл і пеніціліум. Анаеробне бродіння відбувається в два етапи: 1 - клітковина осахаривают, 2 - цукор розкладається на спирти, молочну, масляну к-ти, водень. Два типи анаеробного бродіння клітковини - водневе і метанове, які здійснюються бактеріями - целлюлозоразрушітелямі. Бродіння клітковини відбувається в преджелудках ВРХ при поїданні великої кількості зеленої маси бобових. Розкладання пектинових в-в. Руйнування загиблих рослин відбувається за активної участі мікроорганізмів, що руйнують пектинові міжклітинні в-ва, що зв'язують рослинні клітини. Пектинові бродіння - роду бацила і клостридій. Спиртове бродіння. При спиртовому бродінні мікроорган перетворюють вуглеводи з утворенням етилового спирту і вуглекислоти - культуральні дріжджі. Їх ділять на пилоподібні (клітини окрем, ізольовані) і пухкі (кл склеєні). Пилоподібні використовують для виробництва спирту, пухкі у виноробстві і пивоварінні. Молочнокисле бродіння. Відбувається розпад вуглеводів, а також багатоатомних спиртів і білків до молочної кислоти. Молочнокислі бактерії діляться на гомоферментативное і гетероферментативних. Гомоферментативное молочнокисле бродіння. Бактерії утворюють лише одну молочну кислоту, що обумовлено кокової і палочковому молочнокислими бактеріями. Кокові форми - рід стрептоксоков: стрептококус Лактіс - клітини овальної форми, розташовані у вигляді ланцюжків, нерухомий, гр +. Крім моносахаридів, зброжує лактозу і мальтозу. Паличковий бактерії рід лактобаціллюс. Гетероферментативних. Його здійснюють представники родів лактобаціллюс - невеликі палички, гр +. При зброджуванні глюкози - молочна к-та, інші органічні продукти і СО2. Пропионово-кисле бродіння. Здійснюється бактеріями роду пропіонібактеріум - нерухомі палички, поліморфні, гр +, спор не утворюють, анаероби. Джерелами Е для них - вуглеводи, органічні до-ти, спирти та ін в-ва. Кінцеві продукти бродіння - пропіонова і оцтова к-ти. Бактерії використовують для отримання віт В12. Маслянакіслое бродіння бактерії з роду клостридій - велика паличка, рухлива, гр +, утворює спори, анаероб. Бродіння починається з розкладання цукрів у пировиноградную к-ту. Це бродіння буває небажаним - прогоркание рослинних олій та жирів тваринного походження. Оцтовокислі окислення-процес, при якому етиловий спирт окислюється до оцтової к-ти під впливом оцтовокислих бактерій - рід ацетобактер - короткі палички, нерухомі, гр-, немає суперечка, аероби. Використовують для виробництва харчового оцту з вина і спирту в промислових умовах. При силосуванні кормів.
20. Участь мікроорган у кругообігу азоту в природі
N - найважливіший біогенний елемент, що входить до складу білкової молекули кожної живої істоти. Запаси газоо6разного азоту в атмосфері величезні. Однак ні рости, ні живий він не доступний, тому що рослини можуть використовувати для харчування N мінеральних соедіненіq, а живий у ф-ме органіч об'єднаний. Цикл перетворень N в природі за участю мікроорганізмів складається з 4 етапів: фіксації атмосферного N, амоніфікація, нітрифікація і денітрифікація. Фіксація атмосферного N. Здатністю фіксувати атмосферний N і будувати з нього тіло своєї клітини мають азотфіксуючою мікроорганізми. Вони зумовлюють підвищення родючості грунту: 2 групи мікроорганізмів: вільноживучі (Clostridium pasteurianum) і мікроорганізми симбіонти (рід Rhisobium). Clostridium pasteurianum - поліморфні полички, рухливі, гр + анаероби, утворюють спори. Rhisobium - рухливі, палички гр-, спор не утворюють, при старінні втрачають рухливість. Амоніфікація білків. Значні запаси органічного N зберігаються в ростить і живий тканинах. Коли гинуть рослини і тварини, компоненти їх тіла піддаються дії мікроорган, і азотисті сполуки руйнуються з утворенням аміаку - амоніфікація. Процес може відбуватися в аеробних і в анаеробних умовах за участю різноманітних мікроорганізмів: бацил, клостридій, актиноміцетів. Розщеплення білкових в-в відбувається за рахунок протеолітичних ф-тів, що виділяються мікроорганізмами, що отримали назву гнильних. При аеробному кінцевими продуктами є: аміак, С02, сульфати і вода. В анаеробних-аміак, С02, органічні до-ти, індол. Аеробні аммонофікатори: Bac. subtilis - паличка, рухлива, гр +, утворює спори. Анаеробні аммонофікатори - Cl. putrificum - паличка, рухлива, гр +. амоніфікація сечовини. Сечовина непридатна для азотистого живлення рослин, і тільки після разлеженія її мікроорганізмами вона стає засвоювання. Бактерії, що розкладають сечовину - уробактерій. Сечовина перетворюється на аміак і СО2. до них відносять: Bac. probates - велика паличка, рухлива, гр +, утворює спори. Нітрифікація. 2 фази. 1 фаза - окислення солей амонію до солей азотистої к-ти (рід Nitrococcus). 2 фаза-окислення азотистої к-ти до солей азотної к-ти (рід Nitrococcus). Новоутворена азотна к-та вступає в з'єднання з лугами, в рез-ті утворюється селітра. Вона добре розчиняється у воді і засвоюється рослинами, в рез-ті підвищується родючість грунту. Денітрифікація. Зворотний нітрифікації. Розрізняють пряму і непряму денітрифікацію. Пряма викликається бактеріями, широко поширеними в грунті. Денітрифікуючі бактерії відновлюють нітрати до молекулярного азоту. Непряма здійснюється чисто хім шляхом при взаємодії нітритної кислоти з амінними сполуками. Роль мікробів в цих процесах непряма і зводиться до утворення нітратів.
21. Морфологічні та физиологич особливості рикетсій, хламідій і мікоплазм
Рикетсії - облігатні внутрішньоклітинні паразити еукаріотів; гр-бактерії, що мають форму коротких паличок із закругленими кінцями і коків, іноді ниток. Клітинна стінка містить пептидоглікану, цитоплазматична мембрана характеризується високою проникністю. Мають рибосоми, нуклеоїд, розмножуються в цитоплазмі, рідше в ядрі уражених клітин господаря поперечним поділом, ниткоподібні форми - дробленням. Хламідії - облігатні внутрішньоклітинні паразити ссавців і птахів зі складним циклом розвитку. Гр-бактерії, що мають форму коків, У процесі розвитку проходять 3 стадії: елементарного тільця (кулястої ф-ми, мають компактний нуклеоїд і ригідну 3-х шарову клітинну стінку, кіт стійка до осмат Р, до механ впливів, трипсину; здатні склеювати еритроцити ; здатні виживати у зовн середовищі), ретикулярне тільце (сферичне освіта, имеющ сітчасту структуру з тонкою клітинно ст і фібрилярний нуклеоїд) і проміжне тільце (проміжна стадія між елементарних і ретикулярних тільцем). Елементарне тільце - інфекційна ф-ма, а ретикулярно - вегетативна (розмножується шляхом бінарного поділу внутрішньоклітинно). Мікоплазми - найдрібніші вільноживучі прокаріоти без ригідній клітинної стінки. Роль клітинної стінки у них виконує 3-х шарова цитоплазматична мембрана.
Основним ліпідним компонентом мембрани є стерини, в цитоплазмі розташовуються рибосоми і нуклеоїд. Мікоплазми не синтезують пептидоглікану. Мають вираженим поліморфізмом - від дрібних сферичних, кільцеподібних клітин до ниткоподібних, розгалужених міцеліальних форм. У культурах на рідких пітат ср виявляються кулясті утворення, їх називають елементарними тілами, вони є мінімальними репродукуючі одиницями. Всі мікоплазми гр-. Фільтруються через бактеріальні фільтри. Більшість фак анаероби, але т / ж аблігатние аероби. Можуть рости як на безклітинних, так і клітинних піт СР Розмножу шляхом бінарного поперечного поділу.
22. Актиноміцети (св-ва, практичне значення)
Актиноміцети (променисті гриби) одноклітинні гр + бактерії. Їх тіло (міцелій) складається із тонких і довгих гіф (ниток), здатних до істинного розгалуженню: гіфи можуть бути прямими або спіралевіднимі і мають єдину з основною ниткою оболонку і протопласт. На щільних середовищах актиноміцети утворюють субстратний, що вростають в середу, і повітряний міцелій. Крім міцелярних зустрічаються паличкоподібні і кокковідіие форми. Будова аналогічно гр + бактеріям, клітинна стінка містить пептидогликан і не має, як у грибів, хітину і целюлози. Розмножуються за допомогою спор (конідій); з окремих гілок зрілих гіф повітряного міцелію утворюються спороносцах, які в результаті сегментації перетворюються в суперечки. У сприятливих умовах а вони проростають у вегетативні клітини. Гетеротрофний тип харчування та аеробний тип дихання, зустрічаються також і анаероби. Окремі види синтезують пігменти: рожевий, жовтий, синій і ін Живуть переважно в грунті, виявляються у воді, на рослинах, шкірі і слизових оболонках тварин, розкладають органічні субстрати, в тому числі недоступні для ін мікроорган. Відіграють важливу роль у кругообігу в-в і Е, утворенні грунту та її родючості. Багато служать продуцентами антибіотиків, вітам, амінок-т, ферментів. Більшість сапрофіти, але є і патогенні. До них відноситься Actinomyces bovis - збудник актиномікозу ВРХ.
23. Культивування анаеробних мікроорганізмів в умовах лабораторії
Мікроорганізми, вирощені на штучних піт ср - мікробними культурами, а отримання їх зростання на піт ср - культивуванням. Для культивування необхідні умови: оптимальний температурний режим з урахуванням, до якої групи належить досліджуваний вид бактерій, відповідні піт ср, аеробіоз (або анаеробіоз). Для забезпечення постійної оптимальної температури служать термостати. Лабораторний термостат - шафа з подвійними стінками, зовні облицьований матеріалом непроводнікамі тепла (пластик), внутрішня стінка металева. Між двома металевими стінками є вода (або повітря), що підігрівається електрикою. Від нагрітої води через внутрішню металеву стінку тепло надходить в термостат. Всередині є сітчасті полички, на яких розміщують штативи з пробірками, чашки Петрі і ін Постійна температура підтримується за допомогою терморегуляторів - при досягненні температури заданого рівня автоматично відбувається відключення приладу; при зниженні температури термостат знову включається автоматично. Крім забезпечення температурного режиму, слід враховувати тип дихання мікроорганізмів: при аеробному типі дихання ніяких додаткових умов створювати не потрібно. Для анаеробів необхідно виключати доступ кисню. З цією метою використовують ексикатор або анаеростат. Ексикатор - скляна посудина з притертою кришкою. Кришка може бути суцільна або з отвором в центрі. В отвір вставляють пробку, в неї скляні канюлі з гумовим шлангом для підключення до насоса для викачування повітря. Створення анаеробіозу можна здійснити фізичним, хімічним і біологічним методами. Фізичний - з герметично закритого ексикатора викачують повітря і поміщають його в термостат. Використовують анаеростати - металевий, герметично закривається посудину, забезпечений кранами для видалення повітря і вакуум-манометром. Використовуються термоанаеростати-анаеростат, що нагрівається, як термостат. Хім спосіб - використовують ексикатор без отвору. На дно ставлять чашку Петрі з хім в-вами, які активно зв'язують кисень повітря. Зверху ставлять підставку з отворами, а на неї - пробірку або чашки Петрі кришку щільно закривають. Біологічний - спільне вирощування анаеробів і аероб.
24.Пітательние середовища для культивування прокаріотів і еукаріотів. Хімічний склад, способи приготування, класифікація
Живильні середовища розрізняють за консистенцією рідкі, напіврідкі, щільні (тверді); походженням - тваринного або рослинного і синтетичні живильні середовища (певного складу); за призначенням: 1) універсальні; 2) спеціальні: а) для культивування окремих видів, що не ростуть на звичайних ср, б) диференційно-діагностичні-для визначення особливостей бактеріальних культур (цукролітичних, протеолітичних св-в); в) селективні - для виділення мікробів одного виду з досліджуваного матеріалу; г) елективні середовища (виборчі); д) середовища накопичення, в кіт придушується ріст супутніх бактерій і безперешкодно розвивається, накопичується шуканий вигляд, який містився у невеликій концентрації. Широко застосовують середовища тваринного походження - МПБ, МПА, МПЖ. До будь-яких піт ср пред'являються вимоги: стерильність, оптимальна рН, наявність в середовищі необхідних піт в-в, достатня вологість. Приготування універсальних піт СР МПБ рідка піт ср, прозора. Вихідний матеріал - м'ясна вода: свіже яловиче м'ясо нарізають дрібними шматочками, заливають водою 1: 2; екстрагують 24 год, варять 1,5-2 год, що википає кол-во рідини доливають водою, фільтрують у колби, закривають пробками і стерилізують в автоклаві 30 хв. Додають пептон і NaС1. Так як м'ясна вода має слабокислу реакцію, при виготовленні МПБ бульйон подщелачивают (додають КОН), кип'ятять 2-3 хв. МПА-щільна піт СР До МПБ додають промитого дрібно нарізаного А (безазотисті органічне в-во, що отримується з морських водоростей), розплавляють А, фільтрують через ватно-марлевий фільтр. Щоб А не ущільнився, фільтрацію проводять в апараті Коха або користуються спеціальною металевою двостінний воронкою, всередину якої (між стінками) заливається гаряча вода. Розливають по пробірках, стерилізують 30 хв у автоклаві. Пробірки розкладають в похилому положенні, залишають при кімнатній температурі, середа ущільнюється, стає твердою. ПМПА готують як МПА тільки додають менше А. Кип'ятять до розплавлення, фільтрують, стерилізують в автоклаві. Приготування спеціальних піт СР МПЖ. До МПБ додають желатин, що розплавляють її, фільтрують, розливають у пробірки, стерилізують текучою парою. МППБ Китта - Тароцці. Готують печінкову воду: печінка ВРХ нарізають дрібними шматочками, заливають водою 1:1, кип'ятять, фільтрують, стерилізують. Її змішують з МПБ 2:1. Кип'ятять, розливають по пробірках. Перед розливом у пробірки кладуть шматочки вареної печінки, зверху середовища заливають 1-2 мл вазелінового масла, стерилізують в автоклаві 30 хв. Цукровий МПБ. До МПБ додають глюкози, розливають у пробірки, стерилізують текучою парою 20 хв. Цукровий МПА. До розплавленого МПА додають глюкози, розливають в гарячому вигляді, стерилізують. Сироватковий МПБ і МПА. Сироватку крові додають до МПБ в колбочках; якщо сироватку додати до розплавленого МПА - сироватковий А-розливають у чашки. Кров'яний МПА. Отриману дефібринованої кров додають до розплавленого МПА, перемішують, розливають у чашки. У термостат дном вгору. Диференційно-діагностичні СР Ср Гисса. Основою явл пептона вода (NаС1, пептони, розчинені у воді, що дистилює), до неї додають вуглеводи і індикатор Андреде (р-р фуксину, р-р NаОН в дистильованій воді), фільтрують, розливають у пробірки з поплавками. Стерилізують текучою парою. Середовище Ендо. МПА розплавляють, додають лактози, фуксин, знебарвлені сірчанокислим Na. Всі кип'ятять і розливають по чашках. Агар Левіна - А Хоттингера з розчином метиленового синього, бактеріологічними лужним еозином, лактозою, двоосновний фосфорнокислим калієм. Порошок ср Левіна розчиняють у воді, кип'ятять 5 хв, розливають по чашках. У термостат. Селективна і диференційно-діагностичне середовище Плоскирєва - А, що містить лактозу, солі жовчних к-т, кальциновану соду, діамантову зелень, NаС1, індикатор нейтральний червоний, для отримання середовища сухий порошок розводять у дистильованій воді. Вісмут-сульфіт-агар: МПА, що містить цитрат вісмуту, сульфіт натрію, дифосфат натрію, діамантову зелень, глюкозу, кальциновану соду. Сух в-во розводять у дистильованій воді, охолоджують, збовтують, розливають по чашках Петрі. У термостат. Молоко - злегка подщелачивают двовуглекислої содою, фільтрують, розливають у пробірки, стерилізують текучою парою. Середовища накопичення. Середа Шустова - МПА з додаванням водного розчину натрійтіосульфата та розчину Люголя. Рослинні живильні середовища. Картопляні ср - картоплю очищають, нарізають, занурюють у розчин двовуглекислої соди на 1-2 год, просушують фільтрувальним папером і поміщають в пробірки Ру. На дно пробірки до перетяжки наливають гліцерінізірованную воду. Стерилізують 20 хв.
25. Санітарно - бактеріологічне дослідження води і повітря. Практичне значення
Санітарна оцінка води виражається загальним мікробним числом, якісним і кількісним визначенням забрудненості її бактеріями групи кишкової палички. Визначення загальної кількості бактерій у воді. З відкритих водойм роблять послідовні розведення за загальноприйнятою методикою - 1 мл води переносять в пробірку з 9 мл водопровідної води, розмішують її та 1 мл переносять у наступну пробірку. Всього 3-7 розведень. З кожної пробірки беруть по 1 мл і вносять в чашку Петрі, заливають розплавленим МПА. Ставлять у термостат. Кількість колоній розглядають під лупою. Визначення колі-титру. - Найменша кількість води, в якій виявляють кишкову паличку. Для визначення використовують бродильну пробу і метод мембранних фільтрів. Бродильна проба - воду в певних кількостях висівають на середовище накопичення, потім при наявності зростання, характерного для кишкової палички, пересівають на диференційно-діагностичні середовища. Метод мембранних фільтрів частіше застосовують в лабораторній практиці - певний об'єм води пропускають під тиском через фільтри% 3, виготовлені з нітроцелюлози, з наступним накладенням їх матовою стороною на поверхню А Ендо, витримуванням в термостаті. Потім виросли колонія підраховують, вивчають, визначають колі-титр та колі-індекс. Дослідження повітря. Повітря є сприятливим середовищем для проживання мікроорганізмів. Для санітарної оцінки повітря враховують загальне у мікробів в 1 м ³ і якісний склад. Дане дослідження здійснюють седиментаційним, фільтраційним і аспіраційним методами. Седиментаційних метод осідання Коха - в чашки Петрі з МПА залишають відкритими на 5 хв у приміщенні, закривають, надписують, в термостат, підраховують колонії мікробов.Чтоби визначити мікробне число в повітрі (кількість бактерій, що містяться в 1 м ³), його підраховують за формулою Омелянського: Х =
26. Класифікація мікроорган по Берги. Номенклатура мікроорган. Поняття про вид мікроорган
Класифікація Берги 1923р. систематика займається всебічним описом видів мікроорган, з'ясовано ступеня родинних відносин між ними і об'єднаний їх по Ур-ню спорідненості у класифікаційні одиниці або таксони. Осн і самої нижчої таксономіч одиницею явл вид мікроорган - рід, сімейство, порядок, клас, відділ, царство. Вид - сукупність споріднених мікроорган, имеющ єдине походження і генотип, подібних за Морфологіч і биологич св-вам і обладающ спадково закріпленою здатністю викликати у середовищі природного проживання определ специфич процеси. В основі систематики лежать ознаки: 1) Морфологіч ознаки - величина, ф-ма, хар-р взаєморозташування кл. 2) Тенкторіальние св-ва - здатність забарвлений різного при барвниками, особливо гол ознакою явл відноси до фарбували по Граму. 3) Культуральні св-ва - особливості росту бактерій на рідких і щільних середовищах. 4) Рухливість бактерій - рухливі і нерухомі. Рухливі поділяються - плазують, ковзаючі - пересуваються за рахунок хвилеподібно скорочений кл; плавающ бактерії, у кіт рухливість пов'язана з наявністю джгутиків. 5) Спорообразован: спорообразующ бактерій - враховувати розмір суперечка, її розташований у кл; споронеобразующіе. 6) физиологич св-ва - за способом живлення - автотрофи, гетеротрофи; по азотному харчування - аміноавтотрофи, аміногетеротрофи; тип дихання - аеробний, анаеробний, факультатив анаероби, мікроаерофільні. 7) Біохіміч св-ва - здатність ферментувати різні у / в; протеолітична активність - здатність розкладати білкові утворений; утворений індолу, сірководню, аміаку та ін 8) Чутливість до специфічних бактеріофагів. 9) Антигенні св-ва - залежать від химич складу клітинної стінки і джгутиків бактерій. 10) Химич сост клітинної стінки - вчить містив і склад цукрів і амінок-т.
27. Ферменти мікроорган (св-ва, класифікація, виявлення сахаролітіч і протеолітіч ферментів у мікроорган)
Гол св-ва: специфічність і термолябільность. У мікроорганізм набір ф-тів генетично закріплений і передається у спадок. Различ ф-ти: 1. екзоф-ти - виділ кл в зовнішнє середовище і каталізує розкладений складних в-в субстрату до більш простих. 2. ендофіт-ти - локалізуються в самій кл і бере участь у внутрішньоклітинних процесів обміну в-в. 3. конститутивні - явл постійного компонентом кл і можуть бути виявлені навіть при відсутності в середовищі субстрату, кіт вони каталізують. 4. адаптивні - виробляються кл тільки тоді, коли в середовищі появл соотвествующий субстрат. Розрізняють: оксіредуктазу, трансферазу, гідролаз, ліази, ізомерази, лігази і кіназу. Наявність ф-тів можна виявити за допомогою спец середовищ. Сахаролитические св-ва виявляють при посіві бактерій на диференційно - діагностичні середовища з різними вуглеводами і індикатором. Найчастіше застосовують середовища Гіса (з індикатором Андреде). Набір середовищ з різними вуглеводами (Г, Л, мальтоза, С, маніт, дульцит, арабіноза, сорбіт та ін), стерильне знежирене молоко, молоко з лакмусом, молоко з метиленовим синім - строкатий ряд. Посіви культур здійснюють за загальноприйнятою методикою бактеріологічною петлею. Після інкубування в термостаті враховують рез-тат ферментації вуглеводів: зміна кольору піт ср (в червоний колір при індикаторі Андреде) означає розщеплення вуглеводу і освіта в середовищі кислих продуктів розпаду, а т / ж газоподібні в-ва. Для визначення цукролітичних св-в часто застосовують напіврідкі ср з вуглеводами й індикатором ВР (суміш водного блакитного з розоловой к-тій), а т / ж щільні середовища з вуглеводами і індикатором (А Ендо, Левіна, Плоскірєва). Для виявлення протеолітичної здатності мікроорганізмів досліджувану культуру засівають в МПЖ, іноді користуються згорнутої кров'яної сироваткою коні, коагульованими білком курячого яйця. Посів мікробів у застиглу стовпчиком МПЖ виробляють уколом, занурюючи голку з культурою в глиб піт ср до дна пробірки. У тих пробірках, де під дією ферментів бактерій відбудеться протеоліз желатини, середа розріджується. Мікроби різних видів розріджують желатину неоднаково. Одні - у вигляді лійки (сибірська виразка), інші - у вигляді панчохи (стафілококи). Здатність мікроорганізмів гідролізувати казеїн визначають на молочному А Ейкман: Протеолиз проявляється пептонізаціей казеїну - навколо колоній утворюється чітка зона просвітлення молочного А. При посіві в молоко протеоліз виражається проясненням стовпчика молока, появою осаду. Ступінь протеолізу і глибину розщеплення білка у різних видів бактерій визначають по утворенню кінцевих продуктів розпаду (індол, сірководень, аміак та ін.)