Платон дуже пишався своїм визначенням людини: двоноге без пір'я. Воно мало великий успіх, поки кінік Діоген, обскуб півня, не виготовив наочний посібник. З часів Платона і Діогена з'явилося чимало нових визначень, в тому числі заснованих на описі властивостей молекули ДНК.
Для подальшого викладу важливо уявити собі молекулу ДНК у вигляді тексту, що визначає багато наших особливості як біологічного виду. Текст цей записаний послідовністю з молекулярних літер - нуклеотидів. У генетичному алфавіті їх всього чотири: А (аденін), Т (тимін), Г (гуанін) і Ц (цитозин). Загальна довжина нуклеотидної послідовності, одержуваної від кожного з батьків, - 3 млрд літер.
Генетичний текст людини трохи відрізняється від текстів близькоспоріднених видів. Так, в подібних генах людини і шимпанзе звичайно з 100 літер тексту 99 однакові. А у двох людей (якщо вони не однояйцеві близнюки) в середньому з тисячі тільки один нуклеотид інший. Саме з такими замінами пов'язані успадковані індивідуальні особливості кожної людини.
В останні кілька років вивчення різноманітності генетичних текстів (геномів) людей стало однією з найпопулярніших галузей науки. Тут є чисто практичний інтерес: адже з генетичними особливостями пов'язане здоров'я людини. Сьогодні в геномні дослідження фармацевтичні компанії вкладають величезні кошти і сподіваються отримати віддачу в найближчі десятиліття у вигляді принципово нових методів діагностики та лікування.
Є й інший аспект таких розробок: вони дозволяють реконструювати події давнього минулого, відновити історію виникнення виду Homo sapiens і шляхи міграцій різних народів. Ці дослідження привели до появи нових напрямків науки - молекулярної антропології та палеогеномікі.
Молекулярні годинник і філогенетичне древо
Ще в 60-х роках Л. Полінг і Е. Цукеркандл висловили ідею, що швидкість накопичення мутацій досить постійна: її можна використовувати як свого роду молекулярні годинник еволюційної історії. Пізніше, коли з'явилися методи читання нуклеотидних послідовностей (секвенування), швидкість накопичення мутацій була встановлена при порівнянні ДНК тих видів, час розбіжності яких визначалося за палеонтологічними знахідками.
Метод молекулярних годин прикладається і до вивчення подій еволюційної історії людини. Тут зручним інструментом дослідження служить мітохондріальна ДНК (мтДНК) та Y-хромосома. Решта хромосоми при передачі потомству обмінюються подібними шматками генетичного тексту - рекомбінують. У результаті в кожній хромосомі виникають нові, відмінні від батьківських, комбінації, що істотно ускладнює аналіз накопичення мутацій.
Y-хромосома передається тільки по чоловічій лінії - від батька до сина. Вона присутня в геномі чоловіків в єдиній копії і тому ні з чим не рекомбінує (за винятком невеликих ділянок на кінцях хромосоми, які не впливають на аналіз нерекомбінірующей частини). Раз з'явившись, мутації в Y-хромосомі зберігаються протягом тисяч поколінь, маркуючи тим самим усіх нащадків індивіда, у якого вони спочатку виникли. Сучасні чоловіки, які мають однакові мутації в Y-хромосомі, сходять до спільного предка по чоловічій лінії. Очевидно, що рідні брати, які отримали від батька Y-хромосоми з однаковими текстами, відносяться до однієї лінії. Однак якщо в одного з братів відбудеться мутація, яку він передасть своїм синам, лінії спадкоємства розійдуться на дві гілки.
Зараз створені бази даних, що містять інформацію про Y-хромосомах десятків тисяч людей з усіх куточків Землі. Сучасні методи генетичного та статистичного аналізу таких великих вибірок дозволяють встановити порядок виникнення мутацій і намалювати філогенетичне древо, що описує родинні зв'язки всіх людей по чоловічій лінії. Чим раніше виникла мутація, тим ближче до кореня дерева вона розташовується і тим більше гілок будуть її утримувати. Оскільки матеріал, доступний для дослідника, - це ДНК, отримана від наших сучасників, філогенетичне древо будується від кінців гілок до кореня.
При відомій швидкості накопичення мутацій у розрахунку на покоління, число мутацій, що розрізняють двох людей, можна перевести в абсолютне час, що минув з моменту появи їх генетичних ліній, тобто встановити, коли жив останній загальний предок цих двох людей. При вивченні батьківській лінії аналізують близько півтора-двох десятків мінливих ділянок ДНК (SNP-і STR-маркери) в Y-хромосомі, розмір якої становить 60 тис. пар основ.
Еволюційну історію жіночої лінії можна простежити по мітохондріальній ДНК (мтДНК). Плід будь-якої статі отримує її тільки від матері, оскільки в спермії немає мітохондрій. У порівнянні з ДНК хромосом це дуже маленька молекула - у людини всього 16 500 пар нуклеотидів. На відміну від ядерних генів, більшість яких представлено однієї (в Y-хромосомі) або двома копіями (у решті хромосомах), в кожній клітині міститься до декількох десятків тисяч копій молекул мтДНК. Крім того, ця молекула - кільцева, а, як відомо, такі молекули стабільніше, ніж лінійні. Саме ці особливості дозволили дослідникам прочитати мтДНК з рештків стародавніх людей, в тому числі і неандертальців. Можна вважати, що мітохондріальна ДНК - подарунок природи молекулярним біологам.
Для побудови філогенетичного дерева по материнській лінії досить визначити послідовність нуклеотидів невеликих (близько 400 пар нуклеотидів) фрагментів, які мутують найбільш швидко. Інший метод аналізу - визначення змін в ділянках ДНК, які розпізнаються ферментами, рестріктазами. Для більшої точності використовують комбінацію обох методів. Оскільки технічно вивчати мтДНК простіше, такі роботи були розпочаті раніше, ніж по Y-хромосомі.
"Мітохондріальна Єва"
Перші здобули популярність дослідження мтДНК представників різних рас виявили спільність походження всіх нині живих людей по жіночій лінії. У 1987 р. А. Вілсон і його колеги з Каліфорнійського університету в Берклі отримали мтДНК від 147 представників різних рас [1]. У досліджуваному фрагменті вони визначили кількість індивідуальних мутацій, а також їх координати і тип. Аналіз показав, що всі мтДНК виникли від однієї предкової послідовності. За ступенем їх різноманітності Вілсон оцінив час, який минув з тих пір, як існувала предковая послідовність. Воно обчислюється як час сходження всіх ліній мтДНК в одну точку, звану точкою коалесценції. Відповідно до його висновками, загальна "праматір", до якої виходять всі типи мтДНК сучасних людей, жила в Східній Африці менше 200 тис. років тому. Встановити послідовність виникнення мутацій у поколіннях предків у обстежених індивідів тоді не вдалося, але роботи останніх років підтвердили висновки Уїлсона.
Питання про прабатьківщину людства дискутується не одне десятиліття. Частина фахівців вважала, що людина виникла в одному з регіонів світу (найбільш часто згадувалася Африка) і потім розселився по всій Землі. Інша дотримувалася так званої мультирегіональних гіпотези, згідно з якою предкової вид Homo erectus перетворився на Homo sapiens в різних точках земної кулі незалежно. З появою молекулярних даних значну перевагу отримала "африканська" гіпотеза.
| Філогенетичне древо популяцій |
Після робіт Уїлсона володарку предкової мтДНК охрестили "мітохондріальної Євою". Це відразу породило невірні тлумачення - ніби все людство походить від однієї жінки. Насправді лінії мтДНК сучасниць "Єви", безсумнівно існували, до нашого часу не дійшли. І сталося це не тому, що "Єва" була особливою. Концепція молекулярних годин побудована на припущенні про нейтральність більшості мутацій, тобто увазі, що нічим особливим від одноплемінниць "Єва" не відрізнялася. Просто генетичне разноообразіе в популяції завжди зменшується, якщо в низці поколінь трапляються різкі падіння чисельності (проходження "пляшкового горлечка"). А таке в історії людства траплялося не раз. Так що з часом всі інші лінії, крім однієї, зникли за статистичними причин.
Поки люди живуть разом, з'являються у них мутації поширюються по всій групі. Якщо ж групи діляться, мутації в них накопичуються незалежно. Число таких відмінностей між групами пропорційно часу, який пройшов з моменту їх розбіжності, що і дозволяє датувати події популяційної історії. На основі вивчення мтДНК населення різних регіонів світу вдалося з'ясувати шляхи і дати основних міграцій прекрасної половини людства.
Африканські предки
До великої радості генетиків реконструкція популяційної історії людства по Y-хромосомі показала, що "Адам" - предок сучасних чоловіків - жив приблизно там же, де і "Єва". Хоча дані, отримані при аналізі Y-хромосоми, менш точні, ніж мітохондріальні, вони також вказують на африканське походження людини і єдину предкової популяцію. Молекулярні датування часу її поділу на гілки, що ведуть до сучасних популяціям, залежать від методів оцінки і, за даними різних авторів, коливаються від 30-40 тис. років тому (що суперечить палеонтологічними даними) до 180 тис. років тому. Як найбільш вірогідний називають період від 57 до 135 тис. років тому [2].
Гіпотезу африканського походження людини підтверджує низка незалежних досліджень. Особливо цікаві роботи з вивчення народів Південної і Східної Африки - бушменів і готтентотів. Їх мови містять клацають звуки, ніде більше не зустрічаються, і відносяться до так званої койсанських групі (комбінація слів "де-не-койн" - самоназва готтентотів і "сан" - назва бушменів), відокремлено стоїть в системі мов світу. Вони значно відрізняються від інших африканських народів, в тому числі і від своїх сусідів банту, не тільки лінгвістично, але й антропологічно: у них більше світла шкіра, вузький ніс, для жінок бушменів характерно надлишкове відкладення жиру на сідницях (стеатопігія), а для чоловіків - особливу будову статевих органів. Відмінності виявляються і в мтДНК: у бушменів виявлена мутація, яка з'явилася однією з перших після виникнення людини як виду [3]. У Y-хромосомі деяких бушменів також присутня давня мутація, не виявлена ні в кого з людей в інших частинах світу, але знайдена у мавп. Ймовірно, вона виникла ще до поділу предкової ліній людини і шимпанзе (5-7 млн років тому) і безперервно підтримувалася в частині предкової популяції людини і шимпанзе. Можливо, ця мутація збереглася тільки у бушменів тому, що їхні численні предки в певний момент історії заселяли значну частину африканського континенту. Згодом вони були витіснені на південь племенами, що говорять на банту. На це вказують і результати вивчення кісткових останків людей, знайдених в Африці, - вони подібні за типом з сучасними представниками койсанських групи.
Цікаво, що популяційні відмінності по Y-хромосомі опинилися в кілька разів вище, ніж по мтДНК. Це говорить про те, що перемішування генетичного матеріалу по жіночій лінії більш інтенсивно, тобто рівень міграції жінок майже на порядок вище, ніж у чоловіків [4]. І хоча ці дані на перший погляд можуть здатися дивними (подорожі завжди вважалися прерогативою чоловіків), їх можна пояснити характерною для більшості людських суспільств патрилокальну (відходом дружини в будинок чоловіка). Шлюбні міграції жінок залишили більше помітний слід на генетичній карті людства, ніж далекі походи Чингізхана або Аттіли [5].
Дослідження ДНК неандертальців
У 1997 р. генетик С. Пебо зумів прочитати фрагмент мтДНК, виділеної з останків неандертальця, знайденого в 1856 р. в Фельдгоферовской печері поблизу Дюссельдорфа в Німеччині [6]. Ця печера знаходиться в долині Неандерталь (Neander Tal). У 1863 р. англійський антрополог і анатом У. Кінг запропонував для знахідки назву Homo neanderthalensis *. Влітку 2000 р. з'явилося повідомлення іншої групи вчених про дослідження другого зразка неандертальської мтДНК з останків кістяка дитини, знайденого в печері Мезмайская на Північному Кавказі [7]. У другому випадку останки точно датовані радіовуглецевим методом - ним 29 тис. років. Це - представник однієї з останніх жили на Землі груп неандертальців.
* Цікаво, що назва долини, дане на честь композитора XVII ст. Йоахіма Ноймана (Neumann - нова людина - по-грецьки Neander), означає «нова людина».
Неандертальці - група гомінідів, предки яких вийшли з Африки раніше, ніж предки сучасних людей. Неандертальці населяли Європу і Західну Азію в період від 300 тис. до 28 тис. років тому. Якийсь час вони співіснували з людиною сучасного анатомічного типу, що розселилися в Європі близько 40 тис. років тому. Раніше на основі морфологічного порівняння неандертальців з людиною сучасного типу було запропоновано три гіпотези: неандертальці - прямі предки людини; вони внесли деякий генетичний внесок у генофонд Homo sapiens, вони представляли незалежну гілку, яку повністю витіснив людина сучасного типу.
| Місця знахідок останків неандертальців. Відзначено положення печер Фельдгофер і Мезмай |
Результати молекулярно-генетичних досліджень свідчать на користь третьої гіпотези. Обидві неандертальські мтДНК мають загальні відмінності від мтДНК людей, що виходять за межі внутрішньовидового різноманіття H.sapiens. Це говорить про те, що неандертальці - генетично окрема, хоча і близькоспоріднена людині гілку. За кількістю відмінностей між їх мтДНК час існування останнього загального предка людини, і неандертальця оцінюється в 500 тис. років. Палеонтологи вважають, що предки неандертальців з'явилися в Європі близько 300 тис. років тому, тобто генетичні лінії, що ведуть до людини і неандертальцю, розділилися раніше цієї дати, як показують датування по мтДНК.
Таким чином, неандерталець еволюціонував в Європі одночасно з предком сучасної людини в Африці. Відомо, що в Європі 40-50 тис. років тому розселився людина сучасного типу, а неандертальці вимерли 28 тис. років тому. Невідомо, яка зв'язок цих подій - програв чи неандерталець в конкуренції з людиною або вимер з інших причин.
Хвилі міграцій і заселення континентів
Вважається, що циклічні зміни клімату, що відбувалися з інтервалом в десятки тисяч років, грали істотну роль в еволюції і поширення всіх видів, у тому числі і людини. У періоди похолодання наростала маса континентальних льодовиків, жилі природно-кліматичні зони зсувалися на південь, рівень моря і озер знижувався на сотні метрів, збільшувалася площа пустель, зменшується тропічні ліси. З настанням льодовика в Європі скорочувалися жилі зони і чисельність тварин, суцільне "море" життя розпадалося на окремі "озера".
У періоди потепління підвищувалися чисельність і різноманітність живих форм, види розселялися на придатні для життя території - з Африки до Азії і Європи через Суецький перешийок і в Європі - на звільнені з-під льодовика території. Таким чином, контакти африканської та євразійської біоти визначалися глобальними циклами потепління-похолодання. Ці коливання приводили до значних змін флори і фауни всього Земної кулі.
.
Шляхи і час розселення людей, встановлені при аналізі основних
материнських і батьківських (показано кольором) генетичних ліній
Дослідження генетичного різноманіття сучасних людей показали, що воно значно нижче, ніж, наприклад, у шимпанзе, наших найближчих родичів у світі тварин. Це означає, що людина як вид значно пізніше шимпанзе пройшов через "пляшкове горлечко" - різке падіння чисельності популяції, та / або це падіння для людини було набагато істотніше, ніж для шимпанзе.
Різні групи генетиків прийшли до висновку, що протягом останнього мільйона років чисельність популяції прямих предків людини коливалася від 40 до 100 тис. У період проходження "пляшкового горлечка", близько 130 тис. років тому, значно знизилося генетично різноманітність предків людини, так як їх загальна чисельність скоротилася до 10 тис. індивідів і носії багатьох генетичних варіантів зникли [10]. Для порівняння - чисельність нині живуть шимпанзе (а цей вид знаходиться під загрозою зникнення) складає 100-200 тис. особин.
Схематичне представлення популяційної історії людини і неандертальця на основі аналізу мтДНК і палеонтологічних даних. Лінії мтДНК сучасних людей сходяться в точці (точка коалесценції), що відповідає зниженню чисельності популяції ("пляшкове горлечко") і яка відділяє людини сучасного анатомічного типу від архаїчних африканських гомінідів. Поділ генетичних ліній (точка коалесценції) передує поділу популяцій. Кольором показані передбачувані коливання чисельності популяцій, встановлені за рівнем різноманітності ДНК сучасних людей.
Порівняльний аналіз мтДНК різних популяцій сучасних людей дозволив припустити, що ще до виходу з Африки, близько 60-70 тис. років тому (коли також спостерігалося зниження чисельності, хоча і не настільки значне), предковая популяція розділилася принаймні на три групи, що дали початок африканської, монголоїдної та європеоїдної рас [8]. У вітчизняній літературі їх позначають як екваторіальна, азіатсько-американська та євразійська раси, що більш точно відображає їх сучасне географічне поширення.
Частина расових ознак, можливо, виникла пізніше як адаптація до умов проживання. Це відноситься принаймні до кольору шкіри - одному з найбільш значущих для більшості людей расових ознак. Ступінь пігментації у людини генетично задана і, ймовірно, в кожній популяції відповідає географічній широті проживання. Пігментація забезпечує захист від сонячного опромінення, але не повинна перешкоджати утворенню, наприклад, деяких вітамінів, що запобігають рахіт і необхідних для нормальної плодючості [12].
На основі генетичних даних поступово прояснюється картина заселення Азії, Європи і Америки. У нещодавно опублікованих роботах визначені частоти древніх типів мтДНК та Y-хромосом, принесених до Європи 40-50 тис. років тому першими поселенцями, а також інших, що поширилися пізніше, в тому числі і тих, які відображають експансію землеробських племен з Близького Сходу 9 тис . років тому. І тут генетичні дослідження пролили світло на ще одне питання, також викликав на протязі багатьох років гарячі суперечки.
Як поширюється культура? Переймають чи люди традиції, технології та ідеї від представників іншої культури (концепція культурної дифузії); або ідеї та технології подорожують по світу тільки разом зі своїми носіями, і зміна культури відбувається одночасно зі зміною населення (концепція деміческой дифузії)?
До недавнього часу переважала концепція деміческой дифузії. Вважалося, що хлібороби, що прийшли в Європу з Малої Азії близько 10 тис. років тому, внесли основну частку в генофонд сучасних європейців, витіснивши проживали в Європі палеолітичні популяції [9]. Проте опубліковані в минулому році, але вже загальновизнані роботи [10, 11] показали, що генетична частка мігрантів-хліборобів складає в сучасному населенні Європи не більше 10-20%. Це означає, що відносно невелике число хліборобів привнесло в палеолітичну Європу технічні новації, і в результаті на всій європейській території змінився тип господарства і культури.
Генетична різноманітність народів Росії
У Росії вивчення генетичного різноманіття видів має дуже давню традицію, що сходить до робіт 20-х років минулого століття засновників вітчизняної генетики А. С. Серебровського та С. С. Четверикова. Найбільший підсумок популяційно-генетичних досліджень людини 80-90-х років - п'ятитомне видання "Генофонд і Генографія народонаселення" за загальною редакцією професора Ю. Г. Ричкова з Інституту загальної генетики РАН (Ричков та ін, 2000). Його праці, виконані у рамках фундаментальних наукових програм РАН, РФФД, а також програми "Пріоритетні напрями генетики", і зараз лежать в основі принципів добору матеріалу для сучасних досліджень і формування вихідних гіпотез. Ряд лабораторій, учасників російської програми "Геном людини" (у тому числі і наша лабораторія), вивчає генетичну різноманітність народів європейської частини Росії [12].
Лінії мтДНК, що потрапили до Європи в епоху палеоліту близько 40-50 тис. років тому, становлять зараз значну частину мтДНК людей, що населяють території від північно-заходу Європи до Уральських гір. Найбільш чіткі відмінності, виявлені між окремими лініями мтДНК, вказують на їх монголоїдної або європеоїдне походження. Ми обстежили росіян і більшість народів Волзького басейну і Уралу. З'ясувалося, що у всіх народів, крім башкирів, по материнській лінії переважає європеоїдну компонент. Градієнт його падіння проходить приблизно з заходу на схід і не корелює з мовою цих народів. У росіян (населення Рязанської, Курської і Калузької областей), які говорять на мові індоєвропейської групи, 97-98% материнських ліній - європеоїдні, а частка монголоїдного компонента становить 2-3%. Європеоїдні лінії переважають також у народів фінно-угорської мовної групи (марі, удмурти, комі) - від 80 до 94%, і у тюркомовний народів, що проживають в цьому регіоні. Так, 85% татар по материнській лінії європеоїдні, а чувашів 90%. Лише у їхніх східних сусідів, башкир, монголоїдні лінії становлять 65%. Значить, сучасна межа розселення європеоїдів і монголоїдів географічно проходить приблизно по Уралу, а популяційно-генетично - між башкирами, що мешкають по обидва боки Уральського хребта, і їх західними сусідами - татарами. Повторимо, що частка європеоїдних і монголоїдні ліній не корелює з мовою, якою розмовляють ці народи.
Материнські генетичні лінії у народів Волго-Уральського регіону. Частка європеоїдних ліній мтДНК (кольоровий сектор) падає при просуванні з заходу на схід, а частка монголоїдні (білий сектор) зростає. Досліджені етнічні групи відносяться до різних мовних сімей: індоєвропейської (зі слов'янських мов, що відносяться до цієї родини, наведені російські), уральської (фінно-угорські мови; вказані білим шрифтом) і алтайської (тюркські мови; підкреслені)
Наші дослідження показують і різноманітні деталі формування окремих народів. Наприклад, монголоїдні лінії мтДНК у народів Волго-Уральського регіону мають різне походження: одні з них з'явилися, ймовірно, з Сибіру, а інші - з Центральної Азії. Поєднання виявлених нами генетичних ліній утворює мозаїку, яка характеризує кожен з цих народів.
Проектів з вивчення генетичного різноманіття людей стає все більше. Вони дають відомості, важливі для охорони здоров'я, а також для реконструкції історичних подій. Зараз відомо, що багато мутації не нейтральні, швидкість їх накопичення може бути різною для різних ділянок ДНК і на різних етапах еволюції. Тому абсолютні датування, отримані на основі молекулярних методів, можуть досить сильно відрізнятися в залежності від використовуваної системи аналізу, і повинні уточнюватися в міру розвитку експериментальних методів і теоретичних інструментів дослідження.
На закінчення можна припустити, що склалися до теперішнього часу уявлення про послідовність еволюційних і міграційних подій в історії людини як виду навряд чи сильно зміняться. Це, однак, не виключає сюрпризів при виявленні деталей формування і взаємодії різних популяцій, що приводили до виникнення і зміну мов і культур. Такі дослідження допоможуть не тільки краще зрозуміти причини, що визначили сучасну структуру народонаселення Землі, але і передбачити тенденції цих процесів, що може бути вкрай важливим для вироблення стабільних і збалансованих відносин між народами в майбутньому.
Література
1. Cann RL, Stoneking M., Wilson AC / / Nature. 1987. V.325. № 6099. P.31-36.
2. Zhivotovsky LA / / Mol. Biol. Evol. 2001 (in divss).
3. Viglant L., Stoneking M., Harpending H. et al. / / Science. 1991. V.253. P.1303-1307.
4. Seielstad MT, Minch E., Cavalli-Sforza LL / / Nat. Genet. 1998. V.20. P.278-280.
5. Stoneking M. / / Nat. Genet. 1998. V.20. P.219-220.
6. Krings M., Stone A., Schmitz RW et al. / / Cell. 1997. V. 90. № 1. P.19-30.
7. Ovchinnikov IV, Gotherstrom A., Romanova GP et al. / / Nature. 2000. V.404. № 6777. P.490-493.
8. Lahr MM, Foley RA / / Yearbook of physical anthropology. 1998. V.41. P.137-176.
9. Cavalli-Sforza LL Genes, peoples, and languages. NY, 2000.
10. Richards M., Macaulay V., Hickey E. et al. / / Am. J. Hum. Genet. 2000. V.67. P.1251-1276.
11. Underhill P., Cavalli-Sforza LL, Oefner PJ / / Nat. Genet. 2000. V.26. P.358-361.
12. Orekhov V., Poltoraus A., Zhivotovsky LA et al. / / FEBS Lett. 1999. V.445. № 1. P.197-201.