Збудник туберкульозу

Мікобактерії можна класифікувати за Sneath - методу. Він полягає в тому, що класифікуються штами розташовують у таблицях за індексами їх подібності (під подібністю розуміють відношення властивостей, спільних для двох організмів. Індекси подібності S обчислюють за формулою:
nS 100
S =;
nS + nd
де в чисельнику число подібностей (nS) двох штамів, помножене на 100, а в знаменнику число подібностей плюс число відмінностей (nd) у двох штамів. Результат отримують у відсотках. Чим більше випробувано властивостей, тим точніше визначено штами.
Запропоновані класифікації не ре9ают проблему атипових мікобактерій. І хоча багато хто з них широко користуються до цього часу (угруповання Раньон), необхідна подальша робота з ідентифікації мікобактерій і раціональної систематизації з метою встановлення їх видової приналежності (Головльов, Скрябін, 1972; Зиков, Ільїна, 1978).
3. Збудники туберкульозу.
Щирими мікобактеріями туберкульозу є M.bovis, M.tuberculosis, M.avium, причому остання лише як збудник туберкульозу птахів; якщо M.avium виділяють від свиней і великої рогатої худоби, то мова йде про атипових микобактериях.
M.bovis відноситься до основного збудника туберкульозу великої рогатої худоби. Однак він патогенів і для інших домашніх і диких жуйних, людини і приматів, м'ясоїдних, а також папуг, і можливо деяких інших хижих птахів.
M.bovis - злегка зігнуті або прямі, короткі або помірно довгі, тонкі з закругленими кінцями палички (0,3 - 0,6 мкм завширшки, 1,5 - 4 мкм в довжину). Усередині палички іноді знаходять зерна (зерна Муха), зазвичай розташовані на кінцях мікобактерій. Як розмір, так і число що знаходяться в них гранул залежить від віку культури та умов її зростання (Драбкіна, 1963). Однак поліморфізм мікобактерій відзначають не тільки в культурі, але і патологічному матеріалі, де поряд з коккоподобнимі формами можуть бути присутні і більш довгі форми. У патологічному матеріалі мікобактерії туберкульозу бичачого виду розташовані паралельно або під кутом, або купками.
Мікобактерії туберкульозу нерухомі, спор не утворюють, джгутиків не мають. Оптимальна температура росту М.bovis - 37-38 С. Додавання гліцерину до яєчним середах уповільнює ріст мікобактерій або він взагалі не виявляється. При висіві патологічного матеріалу на середовище Левенштейна - Иенсена виростають круглі, маленькі, вологі, майже прозорі колонії кольору слонової кістки (дісгоніческій зростання). Культура M.bovis - мікроаерофільна. Тому посів у рідких або напіврідких середовищах дає зростання в глибині середовища. При пересіву культура адаптується до аеробному зростання.
M.tuberculosis - основний збудник туберк4леза людини, однак він патогенів і для приматів, собак, папуг і деяких тварин, що контактують з людиною. Мало патогенних для кроликів, кішок, кіз, великої рогатої худоби та домашньої птиці.
M.tuberculosis - прямі або злегка зігнуті тонкі палички, іноді зустрічаються дуже короткі або довгі, а іноді розгалужені форми. Таким чином, бактеріям туберкульозу властивий поліморфізм. Особливо часто поліморфізм мікобактерій описують при антибактеріальної терапії. Молоді особини мікобактерій - довшими, а більш зрілі - коротше, з'являються кокові форми. У старих культурах іноді бувають гіллясті форми мікобактерій. Мікобактерії містять гранули, кількість яких різні і залежить від багатьох факторів.
M.tuberculosis дає зростання на штучних поживних середовищах швидше, ніж M.bovis. додавання гліцерину до живильних середовищ покращує і прискорює ріст M.tuberculosis.мікобактеріі туберкульозу людського виду на щільних яєчних середовищах ростуть у вигляді сухих, крошковатих, матових колоній неправильної форми, іноді нагадують кольорову капусту. На бичачої сироватці, гліцериновому картоплі і 5%-ної гліцеринової сироватці вони ростуть повільно, пишно, товстими складчастими краями (еугоніческій зростання). Зазвичай колонії мають колір слонової кістки, однак при старінні набувають кремову або навіть жовте забарвлення. У воді погано суспензії. Культура M.tuberculosis високоаеробна; посів у рідку або напіврідку живильне середовище дає зростання на поверхні середовища. Оптимальна температура росту 37 С, але зростає, хоча значно гірше, при 30-34 С (рН 6,4 - 7,0). При кімнатній температурі і підвищеній температурі (45 С), як і M.bovis, зростання не дає.
M.avium - основний збудник туберкульозу домашніх і диких птахів. Він патогенів і для свиней, у меншій мірі для великої рогатої худоби. У людей може викликати туберкульоз нерідко з важким перебігом (Вдячний, 1980).
M.avium - тонкі, прямі або зігнуті, з заокругленими кінцями, суцільні або зернисті палички. Розмір непостійний, залежить від умови їх проживання та ін факторів. Сильно розвинений поліморфізм, внаслідок чого в препаратах - мазках відзначають як коккоподобние, так і довгі палички. Зростання культури мікобактерій туберкульозу пташиного виду на щільних яєчних середовищах з'являється раніше, ніж у культур мікобактерій бичачого і людського видів. Колонії вологі, гладкі, блискучі, мають вигляд закруглених бляшок кольору слонової кістки. На твердих живильних середовищах іноді утворюються кільцеподібні колонії з валікоподобнимі краями. Такі колонії на середовищах дають звичайно культури старше 1,5 міс. штами M.tuberculosis і M.bovis кільцеподібних колоній не утворюють. При старінні штами M.avium іноді набувають жовтого кольору. Рідко виявляють сухі, шорсткі колонії (R - форма).
M.avium не такі вимогливі до живильних середовищ, як збудник туберкульозу бичачого і людського виду. Тому він росте і на звичайному і на цукровому агарі. На гліцериновому агарі дає швидкий ріст у вигляді пухкого плоского нальоту; на гліцериновому бульйоні утворює поверхневу плівку. Добре суспензії у фізіологічному розчині. Оптимальна температура росту 40 С, але дає зростання і при 45 С, і в більшості випадків при кімнатній температурі, але значно повільніше і бідніший.
На підставі вивчення білкового складу мікобактерій, який специфічний для представників кожного виду і обумовлений спадковим кодом, пов'язаних зі структурою ДНК, виявлено близьку схожість денситограмме M.avium і М.intracellularae. Дані про подібність білкового комплексу служать додатковою підставою для віднесення M.avium до нехромогенним атиповим микобактериям за класифікацією Раньон (Фадєєва з співавторами, 1981).
а) Атипові мікобактерії.
Інтерес до проблеми атипових мікобактерій виник на початку 50-их років 20 століття, коли були виявлені захворювання людей клінічно і рентгенологічно подібні з туберкульозом, але збудники яких відрізнялися від мікобактерій туберкульозу. Атипові мікобактерії не відрізняються від збудника туберкульозу за морфологічними і тинкторіальними властивостями, але істотно різняться за культуральними, біохімічними та вірулентним властивостями для лабораторних тварин (Каграманов, 1963). Їх називають також некласифікований, анонімними мікобактеріями.
Щодо сутності мікобактерій є різні точки зору. Деякі дослідники вважають їх мутантами туберкульозних мікобактерій (Каграманов, 1967; Дихне з співавторами, 1966; Тогунова, 1966). Ця точка зору пов'язана з тим, що майже всі атипові мікобактерії були виділені від хворих на туберкульоз. Під впливом процесів загоєння мікобактерії втрачають свої основні або ж купують інші властивості. Вирішальним фактором, який доводить походження атипових мікобактерії від істинних мікобактерій туберкульозу, вважали можливість переходу їх переходу в типовий вірулентний штам збудника туберкульозу (Каграманов, 1963; Клебанов, 1966). Генетична спорідненість атипових мікобактерій з туберкульозними, підтверджує їх здатність викликати в піддослідних тварин специфічні або параспецифічних для туберкульозу клітинні реакції, а також сенсибилизировать лабораторних тварин до туберкуліну (Каграманов, 1963 і ін.)
Після впровадження в практику туберкулостатичної препаратів атипові мікобактерії з патологічних препаратів стали виділяти частіше. Ряд авторів причиною виникнення глибоких і часом незворотних змін у мікобактерій туберкульозу вважають хіміотерапію, підтвердженням цього послужило виділення низки атипових мікобактерій на середовищах, що містять фтівадіз (Драбкіна, Макарова, 1965; Дихне, 1966).
В даний час атипові мікобактерії вважають самостійним видом бактерій. На підставі аналізу нуклеїнових кислот та серологічного дослідження мікобактерій, а також кількісної таксономії доведено, що атипові мікобактерії є самостійним видами, а не мутантами M.tuberculosis (Wayne, 1971). Встановлено специфічність білкового комплексу для різних груп і видів мікобактерій (Фадєєва з співавторами, 1984). Умовно - патогенні атипові мікобактерії більше схожі з мікобактеріями туберкульозу, ніж з сапрофіти (Фадєєва з співавторами, 1981).
За допомогою таких методів дослідження, як газорідинна хроматографія, мас - спектрометрія і ядерний магнітний резонанс, отримана більш точна інформація про склад і будову мікробних ліпідів, яка підтверджує самостійність видів атипових мікобактерій.
У різних видів мікобактерій виявлені як специфічні видові, так і міжвидові антигенні зв'язки. Tuboly (1967), вивчаючи вісім антигенних компонентів M.bovis визначив що, M.avium було чотири, а у видів сапрофітних мікобактерій - лише 2-3 антигенних компоненти, ідентичних з M.bovis. все це свідчить про неідентичності атипових мікобактерій збудників туберкульозу.

4. Антигенна структура мікобактерій.
У мікобактерій встановлені як специфічні видові, так і міжвидові і навіть міжродові антигенні зв'язки. У окремих штамів мікобактерій виявлені різні антигени (Kniker, 1965). Усі без винятку мікобактерії містять речовину, стійке до нагрівання і протеолітичних ферментів (Castelnuovo, Morellini, 1965). Ця речовина - полісахарид, що й служить загальним антигеном. Крім того, різні види мікобактерій мають специфічні антигени.
У штамах M.tuberculosis - 10, у штамах M.bovis, M.avium і атипових микобактериях - 8-10, а в сапрофітних видах мікобактерій - 4-6 антигенних компонентів. У M.avium знайдено чотири, видів сапрофітних мікобактерій - лише 2-3 ідентичних з M.bovis мають ідентичний антигенний спектр з восьми антигенів, з яких 5-6 були общеродових і реагували з Антисироватка - ми до мікобактерій та інших видів: шість - з M.tuberculosis ,3-5 - з M.kansasii, 2-4 - з M.marium, 2-4 - з M.scrofulaceum, 1-3 - з M.avium ,1-4 - з M.intracellularae, 3 -4 - з M.xeponi ,1-2 - з M.fortuitum. В культурних фільтрату M.bovis виявлено до 20, а у M.tuberculosis - 17 антигенів (Лисенко, 1984, 1987).
Антигени різних видів мікобактерій (M.bovis, M.tuberculosis, M.avium) неідентичні між собою по кількісному і якісному змісту хімічних речовин (Шаріфуллін, 1981).
5. Хімічний склад.
До складу мікобактерій входить вода (80-80,9%), зольні (2,6%) і органічні речовини (11,6%), у той числі ліпіди, білки, полісахариди і др.Із зольних речовин в микобактериях виявлені фосфор, кальцій, магній, натрій, калій, залізо, цинк і марганець. У микобактериях туберкульозу человеческог7го виду фосфор займає 74% зольних речовин.
Білки і ДНК. Білки становлять 57-84% сухої маси мікобактерій. Вони мають ряд характерних властивостей. Кожному виду мікобактерій характерний свій набір білкових фракцій, які можна використовувати для ідентифікації різних видів мікобактерій. Білки мікобактерій містять від 18 до 20 амінокислот, в основному аргінін, гістидин та лізин. З мікобактерій туберкульозу виділені туберкулопротеіди, які у здорових тварин не викликають ураження тканин. При введення таких туберкулопротеідов в організм експериментальної тварини розвивається чутливість сповільненого типу або шкірна реакція типу Артюса. При з'єднанні туберкулопротеідов з ліпополісахаридами або іншими компонентами мікобактерій в організмі експериментальних тварин розвивається стан підвищеної чутливості сповільненого типу. У сенсибилизированном організмі туберкулопротеіди викликають шкірні та загальні туберкулінові реакції. Туберкулопротеіди - це єдині компоненти мікобактерій. Які продукують in vitro реакції. Вважаються аналогами шкірної проби підвищеної чутливості сповільненого типу.
Туберкулопротеіди є повними антигенами, викликаючи в організмі тварин специфічні антитіла. Вони також активні і специфічні в серологічних реакціях. ДНК мікобактерій відноситься до гуанін - цитозин (ГЦ)-типу ДНК
Полісахариди. Складають до 15% сухої маси мікобактерій туберкульозу. Вони присутні в микобактериях як у вільному, так і зв'язаному стані з фосфотідамі, воском, нуклеїновими кислотами та білками.
Ліпіди. На відміну від інших мікроорганізмів мікобактерії туберкульозу характеризуються підвищеним вмістом ліпідів, що досягають 10-40% сухої ваги мікобактерії. Вміст ліпідів у мікробній клітці не стабільно, А коливається в залежності від виду мікобактерій, віку культури і середовища, на якій їх вирощують.
У микобактериях більша частина ліпідів зосереджена в клітинній стінці. Так, в стінках M.bovis зосереджено до 66% віх ліпідів.
У клітинах гліцерин утворює складні ефіри не тільки зі звичайними жирами, а й з міколовимі кислотами. Віск у більшості випадків являє собою гліколіпіди, пептідоліпіди і глікопептідоліпіди. Істинний віск хроматографічно виявлений в ліпідах клітинній стінці патогенних мікобактерій (1966р.). Гліцериди і віск служать запасними клітинними речовинами.
Крім того, в микобактериях присутні міколовие кислоти, які мають 58-87 атомів вуглецю в молекулі, а аліфатична ланцюг містить 22-24 вуглецевих атома. Міколовие кислоти входять до складу клітинних стінок мікобактерій, утворюючи арабиногалактанмукопептидный комплекс, а також знаходяться в стінках у вільному стані, у складі воску Д і корд-фактора. Кислотоустойчивость мікобактерій безпосередньо пов'язана з присутністю в клітинах міколових кислот.
Розгалужені жирні кислоти (фтіеновие, мікоцеразіновие і міколовие та їх ефіри) викликають утворення туберкульозних горбків. Особливо токсичним ліпідним сполукам виявився корд-фактор 6,6-діміколат трегалози, що міститься у всіх микобактериях. Корд - чинник пригнічує міграцію лейкоцитів, що в кінцевому рахунку захищає упровадилися в макроорганізм мікобактерії від руйнування їх лейкоцитами. Ліпіди відіграють важливу біологічну роль у підвищенні резистентності до несприятливих умов зовнішнього середовища і макроорганізму. Завдяки їм мікобактерії стійкі до кислот, лугів, антисептичним речовин, висушування і т.д.
Ліпіди мікобактерій володіють комплексним біологічним дією, яка виражається в їх токсичності, освіті специфічних змін ви тканинах, від них залежить вірулентність мікобактерій, а також формування чутливості підвищеного типу.

6. Мінливість мікобактерій.
Один з видів мінливості мікобактерій туберкульозу - освіта фільтруються форм (Тогунова, 1927; Хоменка з співавт. 1982). Це дуже дрібні, невидимі при звичайній мікроскопії форми, які мають дуже слабкою вірулентністю. Їх можна виявити лише у випадку реверсії, використовуючи для цього повторні пасажі на морських свинках. У цих випадках іноді виявляються кислотостійкі палички, які мають дуже низькою вірулентністю.
Фільтрівні форми слід розглядати як найдрібніші фрагменти мікобактерій туберкульозу, які утворюються в несприятливих умовах існування і здатні до реверсії.
Хоча цьому питанню присвячено багато робіт вітчизняних та зарубіжних авторів, природа даних форм, їх структура, а також значення в патогенезі туберкульозу досі остаточно не встановлені.
L - форми мікобактерій туберкульозу отримані і описані вперше в 1942 році Alexander - Jackson, в Радянському Союзі - в 1972-1974 рр.. Шмельовим і Дорожковой. Це дефектні щодо клітинної стінки або повністю втратили її варіанти мікобактерій. Для L - форм характерні різко змінена морфологія бактеріальної клітини і знижений метаболізм. Вони мають низьку вірулентність і швидко руйнуються в зовнішньому середовищі. З - за відсутності або пошкодження клітинної стінки вони не сприймають зазвичай застосовуються барвники для фарбування мікобактерій, внаслідок чого їх не вдається виявити бактеріоскопічно в мазках з уражених органів. Перетворення мікобактерій туберкульозу в L - форми відбувається не тільки під дією протитуберкульозних препаратів, але і під впливом захисних сил макроорганізму, і, можливо, інших факторів (Земскова, Дорожкова, 1984).
L - форми мікобактерій туберкульозу можуть знаходитися в макроорганізмі в стабільному і нестабільному стані, тобто реверсувати у вихідний мікробний вид з відновленням вірулентності. При цьому вірулентні властивості стабільних L - форм мікобактерій різко знижені в порівнянні з вірулентністю нестабільних форм. Останні викликають у морських свинок генералізований туберкульоз, у той час як стабільні L - форми обумовлюють лише морфологічні зміни, близькі до вакцинному процесу. Стабільні L - форми мікобактерій в переважній більшості випадків знаходять у неактивних вогнищах туберкульозу. Припускають, що ці осередки сприяють виникненню у здорових інфікованих людей протитуберкульозного нестерильного імунітету (Земскова, Дорожкова, 1984).
У сучасних великих господарствах на тлі використання хіміотерапії створюються сприятливі умови для утворення L - форм мікобактерій туберкульозу в організмі у великої рогатої худоби (Байтерякова, Макаров, 1982). Застосуванні ізоніазиду з лікувально - профілактичної метою при туберкульозі телят сприяє утворенню в організмі L - форм мікобактерій. Ці L - форми викликають прихований перебіг хвороби (Федосєєв з співавт., 1985).
Присутність в організмі ВРХ мікобактерій туберкульозу пояснює латентний перебіг тварин у тих господарствах, де причину туберкульозу звичайним методами дослідження встановити не вдається (Байтерякова з співавт., 1982).
L - трансформація мікобактерій туберкульозу вивчена ще не достатньо, так само як і патогенетична роль L - форм мікобактерій туберкульозу.
Лікарську стійкість мікобактерій туберкульозу слід розглядати як одну з форм прояв з мінливості. Зокрема, у присутності, туберкулостатичної препарату як фактора відбору може відбутися зміна значної частини клітин в популяції чи домінуюче розмноження лікарсько-стійких мікроорганізмів. Лікарська стійкість у різних штамів мікобактерій не постійна, а коливається в широких межах. В основі виникнення лікарської стійкості лежить спонтанна мутація. Внаслідок спонтанної мутації можливі зміни в морфології колоній штаму мікобактерій.
Крім того, описаний ряд мутагенних факторів: УФЛ, радіація, різні хімічні речовини та ін, що викликають у мікобактерій утворення пігментних, лікарсько-стійких, ауксотрофних та інших змінених мутантів.
7.Патогенность і вірулентність різних видів мікобактерій.
Під патогенністю мікобактерій мається на увазі їх здатність долати природні захисні сили організму, проникати в нього, розмножуватися у ньому і викликати патологічні зміни, а під вірулентністю - ступінь хвороботворності мікобактерій.
Патогенність мікобактерій не є стабільним ознакою, а змінюється залежно від багатьох ознак. Так, вид мікобактерій, що володіє вираженою вірулентністю для одного виду тварин, нешкідливий для інших. Наприклад, мікобактерії патогенні для птахів, однак не патогенні для морських свинок, коней і рідко викликають туберкульоз у великої рогатої худоби.
Один і той же штам мікобактерій може мати різну вірулентність по відношенню до різних тварин одного і того ж виду (Драбкіна, 1963). Тому для визначення вірулентності досліджуваного штаму мікобактерій слід використовувати кілька видів дослідних тварин. Крім того, на вірулентність впливають шляхи їх введення в організм, доза вводиться штаму, вік досліджуваного штаму і, звичайно, тварина, що піддається зараженню.
Види збудників туберкульозу найбільш патогенні для тих тварин, на яких вони адаптувалися. Так, M.bovis - найбільш патогенних для великої рогатої худоби, M.tuberculosis - для людини, а M.avium - для птахів.
Збудник туберкульозу ВРХ патогенів і для інших домашніх і диких жуйних і м'ясоїдних тварин, людини і мавп, проте ступінь патогенності для них різна.
Збудником туберкульозу бичачого виду заражаються і верблюди, причому відсоток їх зараженості більше в тих господарствах, де більш широко поширений туберкульоз великої рогатої худоби (Кібасов, 1980). Хоча вівці більш стійкі до M.bovis в порівнянні з ВРХ, але в умовах великого зараження останніх високовірулентних збудником і вівці захворюють на туберкульоз (Данко, 1983). У хутрових звірів до збудника туберкульозу ВРХ особливо чутливі норки і нутрії, дещо менше - песці та сріблясто - чорні лисиці (Хайкін, 1983). У свиней реєстрували туберкульоз, викликаний M.bovis. Найбільшу захворюваність свиней відзначали в господарствах неблагополучних щодо туберкульозу ВРХ. Частота захворюваності у кішок і собак залежить від ступеня контактування їх з великою рогатою худобою хворих на туберкульоз (Басибеков зі співавторами, 1985). Крім вищеназваних тварин туберкульозом бичачого виду хворіють коні, кози, осли, мавпи, кролики, морські свинки та інші види тварин.
M.avium - основний збудник туберкульозу диких і домашніх птахів. Частіше він викликає туберкульоз у курей і загону курячих, рідше - у качок, гусей, індиків, лебедів та інших видів птахів. Представники ряду курячих заражаються як спонтанно, так і експериментально при будь-якому способі інфікування, причому зараження збудником призводить до розвитку туберкульозу, яке закінчується загибеллю птахів.
Можливо й зараження сільськогосподарських тварин тубе5ркулезом пташиного виду. При інфікуванні ВРХ микобактериям пташиного виду звичайно не розвивається типових патоморфологічних змін, проте названий збудник викликає у ВРХ короткочасну сенсибілізацію організму до туберкуліну. У ВРХ, сенсибилизированного M.avium, відсутні типові зміни, проте в лімфатичних вузлах кишечника був виявлений M.avium (Кочмарскій, 1983).
Велика рогата худоба заражається збудником туберкульозу пташиного виду через корм і воду, забрудненими випорожненнями кури інших птахів, у тому числі і голубів. Але не виключена можливість інфікування здорових тварин від зараженого M.avium худоби (Доронін, 1961; Щербань, 1968).
При зараженні ВРХ M.avium іноді вражені вим'я, мезентеральние лімфатичні вузли і серозні покриви грудної та черевної порожнин при нормальних легень, що невластиво туберкульозу M.bovis. З домашніх птахів до збудника туберкульозу птахів найбільш сприйнятливі свині. Джерелом зараження свиней M.avium можуть бути хворі кури (Щуревскій, 1972). Від клінічно здорових свиней з туберкулезоподобнимі змінами в лімфатичних вузлах M.avium виділили Аніщенко з співавторами (1970), Лиепиньш (1973), Юдін (1977), Солоненко (1980), Акберов (1986) і ін
У країнах, де ще не ліквідовано туберкульоз птахів, свині заражаються від домашньої птиці. Однак ліквідація туберкульозу птахів та утримання свиней у промислових комплексах віддалено від домашньої птиці незначно зменшило число реагують на туберкулін свиней.
У даному випадку джерелом зараження могли бути голуби, горобці, заражені M.avium, а також грунт і вода, де M.avium можуть перебувати тривалий час.
Крім вищезгаданих видів тварин збудником туберкульозу птахів заражаються коні, кози, вівці, мавпи, кролики та інші види тварин.
У медичній літературі описані випадки легеневої та позалегеневої форми туберкульозу у людей, викликані мікобактеріями пташиного виду (Ченськи зі співавторами, 1986; Шмельов, 1973; Зиков, 1978). В ослаблених людей з порушенням опірності організму M.avium може стати причиною важких легеневих захворювань (Зиков, Ільїна, 1978).
Види M.avium M.intracellulare по бактеріологічні та біохімічні дослідження практично неможливо розрізнити, то останнім часом їх розглядають як мікобактерії комплексу avium - intracellulare. Збудниками мікобактеріозу свиней майже без винятку є мікобактерії комплексу avium - intracellulare (Рудайтіс, 1974; Зерен, 1975; Козлов, 1983; Нечваль, 1986).
Види швидкозростаючих мікобактерій в основному сенсибилизируют тварин до туберкуліну, оскільки їх виділяють їх незмінених лімфатичних вузлів ВРХ, реагував на туберкулін.
Проте є випадки опису важко протікають маститів корів, викликаних M.fortuitum і M.smegmatis.
Види швидкозростаючих мікобактерій (M.fortuitum, M.chelonei) в одиничних випадках були виділені з вмісту абсцесів собак і кішок (Басибеков зі співавторами, 1985).
Атиповими мікобактеріями заражаються і птиці. Описано в основному випадки виділення атипових мікобактерій від курей, у тому числі скотохромогенние і швидкозростаючих мікобактерій. Від диких птахів також ізольовані культури атипових мікобактерій (Мартма, Тяхнас, 1974; Михайлова, 1976).
8. Механізм передачі збудника.
  Переміщення збудника туберкульозу від зараженого організму в сприйнятливий здоровий є для нього біологічної необхідністю, оскільки це забезпечує збереження збудника в природі як виду. Нескінченне перебування збудника в організмі неможливо, тому що тривалість життя тварини обмежена, а цього смертю гине і збудник.
Потрапивши з зараженого організму в зовнішнє середовище, збудник позбавляється природних умов існування. Отже, термін його перебування у зовнішньому середовищі теж обмежений. Мікобактерії повинні знову потрапити в організм сприйнятливої ​​тварини. Весь процес переміщення збудника з зараженого організм в сприйнятливий здоровий називають механізмом передачі. Він складається з трьох фаз: виведення збудника з зараженої тварини, перебування у зовнішньому середовищі, впровадження в організм здорової тварини.
Механізмом передачі збудника інфекції називають еволюційно сформовану видову пристосованість патогенного мікроорганізму до переміщення джерела збудника інфекції до здорового сприйнятливих тварин, що забезпечує нові випадки зараження і безперервність епізоотичного процесу. Характер передачі залежить від локалізації збудника в зараженому організмі і шляхів його виділення, а впровадження в новий організм - від знаходження воріт інфекції (Бакуля, 1979; Конопаткін, Бакуля, 1984).
Виведення збудника туберкульозу з організму зараженої тварини здійснюється при фізіологічних процесах (дихання, молоковіддача, дефекація, сечовипускання, десквамація епітелію) і при патологічних явищах (кашель, носові закінчення, пронос і т.д.).
В організм тварини збудник впроваджується через слизову оболонку дихальних шляхів чи шлунково - кишкового тракту.
У корм мікобактерії туберкульозу потрапляють з виділеннями хворих тварин. Забруднення грунту відбувається при випасі хворих тварин, зрошенні полів незнезаражені рідким гноєм і стічними водами підприємств, що переробляють тваринну сировину і продукти (м'ясокомбінати, забійні станції, молочні пункти тощо). Швидкість санації залежить від типу самого грунту та що у ній органічних і мінеральних речовин, а також температури, вологості, рН та інших факторів. Корми можуть забруднюватися у приміщеннях (скотарнях, свинарники, пташники), де утримуються хворі тварини, на території ферми. Відомі випадки занесення збудника в благополучні господарства з зараженим сіном, соломою.
У гною мікобактерії туберкульозу бичачого виду можуть зберігати життєздатність від 5 до 24міс. (Самовол, Жаров, 1973).
Трупи загиблих від туберкульозу тварин і уражені органи вимушено убитих тварин при певних умовах також можуть бути факторами передачі збудника. У трупах і уражених органах мікобактерії туберкульозу можуть виживати до 2міс. і навіть до 2 років. Гниття і розклад трупів слабо діє на збудника туберкульозу. Несвоєчасне прибирання трупів і уражених органів убитих тварин веде до зараження грунту, пасовищ, водойм.
У м'ясі замороженому, яке зберігається у холодильнику, збудник туберкульозу зберігає життєздатність до 1 року, в солоному м'ясі - до 45-60дн. Тому використання незнезараженої м'яса тварин, хворих на туберкульоз, може призвести до зараження хутрових звірів, собак, кішок.
Яйця курей, хворих на туберкульоз, можуть містити збудник туберкульозу та сприяти його передачі.
Сукупність чинників і механізмів передачі збудника інфекції називають шляхами його розповсюдження. Туберкульоз може передаватися аерогенним і аліментарним шляхом.
У людей можливе проникнення збудника через шкіру, наприклад при обробленні м'яса убитих тварин і при розтині трупів тварин, що загинули туберкульозу. У звірівництві люди можуть заразитися подібним чином при розтині звірів, хворих на туберкульоз, і при зйомці шкурок, коли при розриві черевної стінки відбувається контакт уражених органів з незахищеними руками (Хайкін, 1976).
Таким чином, шляхи передачі збудника туберкульозу надзвичайно різноманітні. При проведенні протитуберкульозних заходів велике значення мають виявлення цих шляхів і розрив механізму передачі збудника.
9. Вплив хімічних факторів на мікобактерії.
Мікобактерії туберкульозу дуже стійкі до багатьох хімічних речовин. Їх висока стійкість пов'язана з будовою клітинної стінки, яка забезпечує їм механічну осмотичну захист (Єрохін, 1982).
У відношення кислот мікобактерії досить резистентні. Так, в 5-10%-ном розчині соляної та сірчаної кислот вони стають життєздатними протягом 24г. У 5%-ном розчині фенолу вони не гинуть протягом 24 год (Вдячний, 1980). Високої бактерицидністю щодо мікобактерій 1%-ний розчин хлораміну з додаванням 1%-ного розчину хлористого амонію (Вашков, 1977). 0,5%-ний розчин етостеріла вбиває мікобактерії туберкульозу протягом 30 хв., 5%-ний розчин карболової кислоти - протягом 5 ч. і 3%-ний розчин лізолу - протягом 1 год. Однак, за іншими даними, навіть 10%-ний розчин лізолу вбиває мікобактерії туберкульозу тільки протягом 12год. (Вдячний, 1980).
M.avium зберігає вірулентність в патологічному матеріалі, що зберігається в 30%-ном розчині гліцерину при температурі 5 С протягом 2 місяців, а виживання протягом 3 місяців.
Досить швидко мікобактерії вбивають 50-70% алкоголь (Lindner, 1971). Соління і кип'ятіння лише незначно знешкоджує мікобактерії.
Збудники туберкульозу досить чутливі до дії кратковолнового УФ випромінювання, і при опроміненні їх протягом 30с. Гинуло 92,3% мікобактерій (Шахбанов з співавт., 1972). Збудник бичачого виду гинув при інфрачервоному електронагріванні при температурі 75 С протягом 60с., Людського і пташиного видів при 77 С - 3с. M.intracellulare при 75 С - 30с. Однак значно стійкіші до інфрачервоного випромінювання і електронагріву M.scrofulaceum, яка загинула при температурі 75 С тільки через 5хв. (Позднякова, 1985).
Стійкість мікобактерій до хімічних і фізичних факторів обумовлена ​​як їх видовою приналежністю, так і умовами в яких вони знаходяться. Атипові мікобактерії пір порівнянні з M.bovis і M.avium більш стійкі до 3%-ному лужному розчину формальдегіду і 8%-ний емульсії феносмоліна, особливо M.intracellulare і M.gordonae (Количев, 1984).
10. Іммунізуючу властивості мікобактерій.
З часу відкриття збудника туберкульозу були проведені численні дослідження з вивчення імуногенності живих і вбитих туберкульозних та атипових мікобактерій.
Імунопрофілактика туберкульозу за допомогою вакцин гетерогенного типу, що виготовляються з мікобактерій, патогенних для холоднокровних, виявилася неефективною.
Імунізація тварин мікобактеріями туберкульозу, убитими фізич - кими або хімічними методами (тепло, сонячне світло, хлор, йод, олеїнова кислота, сечовина, ацетоном, бензином і ін), не дала задовільних результатів (Кальметт, 1929).
При використанні в якості вакцин збудника туберкульозу пташиного, людського, мишачого видів мікобактерій, виділених з мідяниці, водяний черепахи, а також емульсії, приготовленої з лімфатичних вузлів туберкульозних тварин, були встановлені їх імуногенні властивості.
Вакцина БЦЖ сприяє утворенню імунітету у телят, але не забезпечує надійного захисту від туберкульозу. Крім того, поява алергії у вакцинованих тварин і відсутність придатних для практики методів диференціації поствакцинальних реакцій на туберкулін від постінфекційний ускладнює її застосування.
Як метод боротьби з туберкульозом імунізацію ВРХ у ветеринарній практиці не проводять (Шишков з співавт., 1986). Деякі вітчизняні дослідники рекомендують використовувати вакцину БЦЖ в загальному комплексі протитуберкульозних заходів.
Вивчення вакцинного штаму мікобактерій людського виду В-115 показало його високу залишкову вірулентність. З штаму «Валле» мікобактерій туберкульозу бичачого виду отримано новий авірулентний вакцинний штам «БК - Харків» (Черкас, Кандиба, Дикий, 1974).
Вивчені іммунізуючий властивості вакцини із штаму БЦЖ, рідкої вакцини «БК - Харків», рідкої вакцини із штаму В-115 (Вейсфлейер, 1975) та із штаму «К» (Говоров, Кассич з співавт., 1978) на ВРХ в експериментальних і похідних умовах. Щеплення телят не дала освіти імунітету достатньої напруженості. При контакті з хворими коровами телята захворювали на туберкульоз.
11. Діагностика.
Для успішної боротьби з туберкульозом важливе значення має своєчасне виявлення хворих та заражених тварин. Діагноз на туберкульоз у тварин встановлюють на основу патологоанатомічних, бактеріологічних, включаючи біологічну пробу, і аллергіческ5іх досліджень з урахуванням епізоотологічних даних і клінічних ознак хвороби. В якості додаткових способів при діагностиці туберкульозу у тварин застосовують серологічні дослідження та симультанних алергічну пробу.
При проведенні бактеріологічного дослідження використовують бактеріоскопічний, культуральний і біологічний методи.
Для дослідження необхідні шматочки печінки, селезінки, легенів і лімфовузли від убитих або загиблих тварин. При наявності туберкульозних змін в органах беруть проби з уражених ділянок. При пересиланні взятий матеріал консервують у 30%-ном розчині гліцерину. Від живих тварин досліджують молоко, мокротиння, слиз, гній і фекалії.
Для бактеріоскопії з матеріалу роблять мазки, фіксують їх на полум'я, фарбують за Ціль-Нільсену і досліджують під мікроскопом. Мікобактерії виявляються не в кожному випадку, тому просматрівают100-200 або навіть 500 полів зору.
Іноді в матеріалі, надісланому в лабораторію, туберкульозних мікобактерій мало і виявити їх важко. Тоді вдаються до методів збагачення: центрифугированию або флотації. Для цього матеріал подрібнюють, розтирають у ступці, заливають 1%-ним розчином їдкого натру, розмішують і переносять в колбу, яку струшують 10-15 хв. Потім вміст центрифугують 10 хв., Надосадову рідину зливають і, осад нейтралізують кислотою і з нього роблять мазки. Метод флотації грунтується на адсорбції вуглеводнями (ксилолом, бензином, нафта) мікобактерій туберкульозу і Спливання останніх разом з ними. Його використовують частіше за все при дослідженні молока і мокроти, бронхіальної слизу, ексудату.
Пі дослідженні молока 30 мл його наливають у стерильні флакони з вузьким горлом ємністю 100 мл і додають рівну кількість 5%-ного розчину їдкого натру. Суміш струшують протягом 2-3 хв., А потім флакони ставлять у водяну баню при температурі 50-60 С на 1 год. Потім до вмісту флакона додають 1 мл ксилолу, і знову струшують протягом 15 хв. в шуттель-апараті. Після струшування у флакон додають дистильовану воду, поки його вміст не підніметься до вузької частини шийки. Після відстоювання протягом 1-2 ч. в ньому утворюється сливкообразной кільце. 3-4 краплі з нього наносять пастерівською піпеткою на злегка підігріте предметне скло. У міру підсихання наносять на предметне скло по 3-4 краплі ще 2-3 рази, щоб отримати товстий мазок. Мазки висушують у сушильній шафі, знежирюють ефіром, фіксують на полум'ї, фарбують за Ціль-Нільсену і мікроскопіруют.
Для отримання культур мікобактерій матеріал перед посівом піддають обробці за методом Гона, Левенштейна-Суміоші або Алікаевой. При обробці, по Гону, шматочки органів і тканин подрібнюють і розтирають у ступці, потім заливають 3-10%-ним розчином сірчаної кислоти і центрифугують 10-15 хв. при 3 тис.оборотов в хвилину. Період дії кислотою не повинен перевищувати 20-30 хв. Потім надосадову рідину зливають, в осад додають кілька крапель стерильного фізіологічного розчину і роблять посіви на живильні середовища, а також готують мазки. Застосовуючи метод Левенштейна-Суміоші, матеал обробляють таким же чином, але перед посівом осад відмивають від сірчаної кислоти 1-2 рази фізіологічним розчином за допомогою центрифуги. За методом А.П. Алікаевой матеріал розрізають на шматочки, поміщають у ступку і заливають 3-6%-ним розчином сірчаної кислоти на 10-20 хв. Потім шматочки тканин промивають 5 хв. фізіологічним розчином і розтирають.
Для отримання культур мікобактерій роблять посіви на поживні середовища (Петраньяні, Гельберга та ін.) Кожен матеріал висівають на 5-10 пробірок про середовищем. Пробірки заливають розплавленим парафіном. Посіви переглядають не рідше одного разу на тиждень і витримують у термостаті не менше трьох місяців. У разі відсутності росту з поверхні середовища роблять зіскрібок платинової петлею, готують мазок для бактеріоскопії і в разі виявлення в ньому мікобактерій роблять посів на свіжу середу.
Для біологічного дослідження використовують той самий матеріал, який був приготовлений для посіву, а наявність в ньому сірчаної кислоти нейтралізують 10%-ним розчином двовуглекислої соди.
Заражають кроликів, трьох морських свинок, а при необхідності трьох курей і ведуть за ними спостереження.
12. Диференціальна діагностика.
Мікобактерії розрізняються між собою за швидкістю і характером росту на живильних середовищах, з морфології, по патогенності та інших властивостей. Раніше визначення виду їх називали типуванням, оскільки вони ділилися на типи. Для визначення виду мікобактерій туберкульозу запропоновано чимало методів: бактеріоскопічне, культуральний, біохімічний і тд.
Для визначення виду найчастіше використовують біологічний метод. З цією метою ставлять біопробу на трьох морських свинках та трьох кроликах, а якщо необхідно, тои на трьох курей. Культуру мікобактерій вводять тваринам у дозі 1мг сирої бактеріальної маси, суспендованих в 1мл стерильного фізіологічного розчину, морським свинкам підшкірно в області паху, кроликам - внутрішньовенно в крайову вену вуха, курям - у подкрильцевую вену. У морських свинок при розвитку туберкульозного процесу через 2-4 тижні на місці введення культури утворюється виразка, а також збільшення і ущільнення регіонарного лімфатичного вузла. Свинки прогресивно худнуть. У кроликів і курей при розвитку туберкульозу спостерігають виснаження і зниження апетиту. Кур досліджують туберкуліном. Через три місяці морських свинок, курей і кроликів вбивають, розкривають і проводять бактеріологічне дослідження паренхіматозних органів.
Належність досліджуваної культури до того чи іншого виду визначають за такими даними:
- При генералізованому процесі у морських свинок і кроликів - M.bovis;
- При генералізованому процесс6е у морських свинок, а у кроликів відсутність поразки або поодинокі вогнища в легенях - M. Tuberculosis;
- При генералізованому процесі у курей і сепсисі у кроликів - M.avium.
М.М. Іванов і Л.В. Кирилов запропонував для визначення M.avium досліджувану культуру вводити двом курям внутрішньошкірно у борідку в дозі 0,1 мг. На місці введення M.avium викликають припухлість, а до 25 - 30-го дня виразку. Іноді спостерігається перфорація борідки.
Серодіагностика. Для цієї мети вивчали реакції преципітації, аглютинації, дифузної преципітації, зв'язування комплементу, гемаглютинація і гемолізу. Реакція преципітації і реакція аглютинації у ссавців тварин виявилися неефективними. Лише у курей кровокапельная реакція аглютинації дала обнадійливі результати.
Найбільш вивчена реакція зв'язування комплементу (РСК). Її застосовують як додатковий метод при відборі тварин для діагностичного забою серед реагують на туберкулін. У РСК велику роль грає якість антигену. Кращим з них раніше вважали метиловий антиген Негр і Боке. В останні роки більш ефективними були визнані сложносмешанний антиген Т.А. Луценко і комплексний антиген Ю. Я. Кассич. В основу сложносмешанного антигену був узятий полісахаридний комплекс, отриманий з мікобактерій туберкульозу. До складу комплексного антигену Ю.Я. Кассич входить полісахаридний комплекс, метиленовий екстракт туберкульозних мікобактерій і водний екстракт легеневої тканини здорової великої рогатої худоби.
Для постановки реакції досліджувані сироватки інактивують у водяній бані при 60 С протягом 30 хв. Антиген і комплемент титрують. У пробірки розливають випробовувані сироватки в розведеннях: 1:5, 1:10, 1:20, 1:40 і 1:80 по 0,25 мл і додають антиген і комплемент теж по 0,25 мл. Потім штативи з пробірками ставлять на 30хв. у водяну баню при 37 - 38 С, потім виймають і додають у кожну пробірку гемолітичну систему, яка складається з 0,25 мо 2%-ної суспензії еритроцитів барана і 0,25 мл гемолизина в робочому титрі. Потім штативи знову поміщають у водяну баню на 15хв. Реакцію враховують попередньо після лазні і остаточно через 16-18 годин. Оцінку проводять за затримки гемолізу. Отримання позитивної РСК в титрі 1:20 і вище вказує на наявність у тварини туберкульозного процесу.
Реакцію гемаглютинації запропонував Мідлбрук і Дюбо. Суть її полягає в Ом, що антиген, що міститься у витяжках мікобактерій, має здатність адсорбуватися на поверхні еритроцитів і сенсибилизировать їх до сироватці крові туберкульозних тварин, яка викликає аглютинацію таких еритроцитів.
Реакція гемолізу полягає в тому, що після врахування реакції гемаглютинації в кожну пробірку додають комплемент. У пробірках, де містилася сироватка туберкульозних тварин, настає гемоліз.
Алергічна діагностика. У тварин, заражених туберкульозом, через 15-20 днів з'являється алергія, що виражається підвищенням чутливості до продуктів життєдіяльності мікобактерій (токсинів).
Протягом багатьох років для алергічної діагностики застосовували тільки альттуберкулін Коха. В даний час у ссавців тварин і птахів застосовують альттуберкулін і сухий очищений туберкулін (ППД - протеїн пуріфіед дериват).
Альттуберкулін готують на біофабриках, вирощуючи культури мікобактерій туберкульозу бичачого і людського виду на м'ясо - пептонном гліцериновому бульйоні протягом 6-8 тижнів, після чого культуру збовтують і стерилізують в автоклаві при 120 С 30хв., А потім випарюють при 80-90 С: 1 / 10 початкового об'єму, відстоюють і фільтрують через фільтр Зейтца. Отриманий таким чином туберкулін прозорий, коричневого кольору, має специфічний запах. Він містить близько 40-50% гліцерину.
ППД готують, вирощуючи культури мікобактерій туберкульозу на синтетичному середовищі. У фільтрат 8-тижневої культури додають трихлоруксусную кислоту для осадження протеїнів. Осад обробляють, очищаючи від слідів цієї кислоти і висушують. Отриманий препарат представляє собою аморфну ​​масу світло коричневого кольору з сіруватим відтінком. До сухого очищеного туберкуліну біофабрики випускають розчинник, який являє собою безбарвну прозору рідину з легкою опалесценцією. Туберкулін і розчинник випускають в ампулах і флаконах.
Застосовують туберкулін для внутрішньошкірної та очної проби.
Для внутрішньошкірної туберкулінізації ссавців тварин (крім свиней і мавп) застосовують сухий очищений туберкулін або альттуберкулін для ссавців, для свиней - одночасно сухі очищені туберкуліну для ссавців і птахів, птахам - сухий очищений туберкулін для птахів. Враховують реакцію у ВРХ, буйволів, верблюдів через 72 год. після введення препарату, у кіз, свиней, собак, хутрових звірів через 48ч., а у птахів через - 30-36ч. у тварин реакція на місці введення туберкуліну проявляється у вигляді розлитого набряку тестоватой або м'якої консистенції, не має, як правило, чітких меж з навколишньою тканиною. Що супроводжується місцевим підвищенням температури, а іноді хворобливістю. При обліку реакції місце введення препарату пальпують, а при виявленні зміни товщину шкірної складки вимірюють кутіметром, порівнюючи її з товщиною складки незміненій шкіри поблизу місця введення туберкуліну. Велика рогата худоба, верблюдів і оленів вважають що реагують на туберкульоз при потовщенні шкірної складки на 3мм і більше; кіз, овець, собак, свиней, хутрових звірів, курей - при утворенні припухлості в місці введення туберкуліну, норок - при опуханні століття.
Очну туберкулінізації (офтальмопробу) застосовують у коней. А іноді у великої рогатої худоби одночасно з внутрішньошкірної пробій. Її проводять дворазово з інтервалом в 5-6 днів. Очний піпеткою на кон'юнктиву нижньої повіки наносять 3-5 крапель туберкуліну. Враховують реакцію через 6, 9, 12, 24г. після першого та через 3, 6, 9, 12г. після другого введення. Реакція виражається у виділенні слизисто-гнійного або гнійного секрету і гіперемії кон'юнктиви.
Епізоотологічний метод. При підозрі на захворювання тварини на туберкульоз проводять епізоотологічне обстеження. При цьому узагальнюють і аналізують статистичні дані ветеринарної звітності про туберкульоз великої рогатої худоби та інших видів тварин не менш ніж за п'ять років. Враховують дані боенской статистики. З'ясовують коли і за якими ветеринарними документами надійшли в господарство тварини, умови їх розміщення в карантині, дату і результати дослідження в період профілактичного карантину; можливість контакту тварин цього господарства на пасовищах, водоймах і скотопрогонів трактах з тваринами неблагополучних господарств. Збудник туберкульозу може бути занесений в благополучні стада з незнезаражені обратом, доставленим з молочного заводу, куди надійшло молоко з неблагополучної ферми. При цьому захворювання зазвичай реєструють у телят.
Людина також може заражати велику рогату худобу збудником туберкульозу бичачого виду, якщо він сам хворіє на туберкульоз, викликаним бактеріями цього виду. Збудник туберкульозу людського виду сенсибілізує ВРХ до туберкуліну і лише зрідка викликає обмежені зміни, переважно в лімфатичних вузлах, регіонарних місцях проникнення мікобактерій в організм тварини. У свиней при зараженні цим видом мікобактерій виявляють патологоанатомічні зміни, характерні для туберкульозу. Тому з'ясовують також наявність хворих на туберкульоз людей, що працюють на фермі. Аналіз цих даних сприяє своєчасному встановленню діагнозу.
Клінічний метод. Перебіг туберкульозу у тварин зазвичай хронічне, з постійно наростаючими симптомами. З моменту зараження до появи ознак хвороби може пройти кілька місяців або років. Клінічні ознаки туберкульозу у тварин не завжди типові. У одних хворих тварин вони можуть бути взагалі відсутніми, в інших спостерігаються неяскраві симптоми, за якими можна лише підозрювати захворювання туберкульоз.
При нормальних умовах годівлі та утримання туберкульоз у великої рогатої худоби може протікати без видимих ​​клінічних ознак. Вони проявляються тільки при далеко зайшов патологічному процесі. Найчастіше уражаються легені, кишечник, вим'я, а також підщелепні, заглоткові, привушні, бронхіальні, брижових та інші лімфатичні вузли. Яким би шляхом не виникло захворювання, воно спочатку має обмежений характер у вигляді дрібних вогнищ, переважно в легенях. При легеневій формі спочатку підвищується температура (40 С), з'являється різкий короткий сильний кашель (особливо вранці), який потім стає слабким, частим і супроводжується болями. Хворі тварини поступово худнуть, стоять згорблений, понуро опустивши голову; пересуваються з працею, рідко лягають, піднімаються зі стогоном. Шерсть скуйовджене, втрачає блиск, шкіра втрачає еластичність. Через рот і носові отвори іноді виділяється слизово - гнійне витікання. Якщо уражена плевра, то тварина відчуває біль при натисканні між ребрами.
Підщелепні і заглоткові лімфатичні вузли збільшуються в розмірах, стають хворобливими, малорухомими. Шкіра над ними поступово стоншується і, при прогресуванні хвороби,
лімфатичні вузли розплавляються, а утворений в них гній проривається назовні і тривалий час виділяється через свищі.
Туберкульоз кишечника протікає хронічно і супроводжується прогресуючим схудненням і переміжними проносами, не піддаються лікуванню.
Поразка вимені характеризується місцевим процесом з ураженням однієї або обох задніх часток, іноді передніх. Уражена частка збільшена, дифузно або гнездной ущільнена. У глибині залозистої тканини після сдаіванія молока прощупуються туберкульозні вогнища різної величини і консистенції. Надвимянние лімфатичні вузли збільшені до розміру курячого яйця, на дотик щільні горбисті.
Поразка матки і яєчників супроводжується абортами, яловістю.
Хвороба може протікати генералізовано, тобто з ураженням багатьох органів і лімфатичних вузлів.
Хворі кури стають млявими, худнуть. Блідне і зморщується гребінь. Птахи малорухливі, несучість знижується, грудні м'язи атрофуються. Генералізація процесу супроводжується ураженням кишкового тракту. Відзначають пронос, що викликає різке виснаження птахів, іноді уражаються кістки, суглоби, розвивається кульгавість.
Клінічний прояв хвороби у інших видів тварин недостатньо характерно.
З клінічних методів діагностики при туберкульозі застосовують огляд, пальпацію, перкусію, аускультацію і термометрію.
При огляді визначають вгодованість тваринного, стан шкіри, лімфатичних вузлів, слизових оболонок, кількість дихальних рухів, їх ритм, силу і симетричність, тип дихання. Також досліджують прийом корму і пиття. Порожнина рота, глотки. Кишечник, акт дефекації екскременти.
Пальпацией встановлюють підвищену чутливість гортані та грудної клітини. За допомогою аускультації визначають стан легенів, шлунка і кишечника. Перкусіями виявляють фізичний стан легенів і плеври.
Огляд проводять при денному світлі, частіше вранці, коли тварини піднімаються. При розладі тих чи інших функцій необхідно дослідити відповідні системи організму. При наявності поганого апетиту, відсутності жуйки або, навпаки, при тривалих проносах особливу увагу звертають на органи травлення, а за наявності кашлю, витікань з носа - на дихальну систему.
На початку захворювання перкусія та аускультація не дають відхилень від норми. З розвитком процесу при аускультації чути хрипи, ослаблене везикулярне дихання або дихальні шуми на окремих ділянках легені не прослуховуються зовсім. Перкусіями виявляють осередки притуплення.
При натисненні або перкусії грудної клітини тварини намагаються відхилитися і кашляють; шум тертя плеври вказує на шорсткість плевральних листків або наявність перлинних вузлів.
Нормальна температура тіла у великої рогатої худоби коливається в межах 37,5 - 39,5 С. у міру розвитку хвороби температура часом підвищується на 0,5 - 1,5 С.
Велике діагностичне значення має дослідження лімфатичних вузлів методами огляду і пальпації. При цьому слід враховувати, що розмір лімфатичних вузлів значно коливається в залежності від розміру і віку тварини. При дослідженні звертають увагу на величину, будова, форму, консистенцію, температуру шкіри, що покриває вузол, чутливість, чіткість відмежування від оточуючих тканин, рухливість самого вузла і, що знаходиться під ним шкіри.
У великої рогатої худоби легко промацуються підщелепні, предлопаточние, колінної складки, надвимянние, привушні і заглоткові лімфатичні вузли. При промацуванні підщелепних лімфатичних вузлів однією рукою тварина утримують за ріг, а інший пальпують, предлопаточних - стають поруч з шиєю тварини, обличчям до задньої частини його тіла, і, охопивши шию обома руками, просовують пальці під передній край лопатки. Надвимянние лімфатичні вузли пальпують після сдаіванія молока обома руками, стоячи ззаду тваринного і захопивши пальцями праворуч і ліворуч задні частки вимені у верхній третині останнього і поступово пропускаючи їх між пальцями. При туберкульозі лімфатичні вузли звичайно горбисті, щільні, безболісні та малочутливі і зазвичай не зрослася з розташованої над ними шкірою. Іноді вони досягають пухлини величиною майже з кулак і більше, звичайно малорухливі, круглої або яйцеподібної форми.
У деяких випадках при переході патологічного процесу на серозний покрив внутрішніх статевих органів у корів підвищується статева збудливість, внаслідок чого у них щомісяця або з меншими проміжками виявляються симптоми полювання. У пізнішій стадії хвороби статеве збудження стає майже безперервним («німфоманія»).
На плановому проведенні профілактичних та оздоровчих заходів можна запобігти розвитку клінічних ознак туберкульозу у великої рогатої худоби, що заразився збудником туберкульозу бичачого виду. Клінічно хворих тварин частіше виявляють в стадах господарств, які тривалий час неблагополучних по туберкульозу. Необхідно враховувати, клінічно хворі тварини нерідко перебувають у стані анергії і на туберкулін не реагують. Тому в неблагополучних по туберкульозу господарствах одночасно з туберкулінізації необхідно проводити клінічне обстеження тварин.
13. Імунітет і алергія при туберкульозі.
При зараженні тварин на туберкульоз в організмі розвиваються алергія та імунітет. Імунітет слід розглядати як несприйнятливість (частіше відносну) до первинного інфікування, а в подальшому до суперінфекції, в результаті чого організм чи не інфікується взагалі (що спостерігається вкрай рідко), або захворювання протікає безсимптомно, організм долає його самостійно.
Відносна вроджена резистентність до туберкульозної інфекції, більш-менш виражена, властива багатьом представникам тваринного світу. З хребетних найбільшою резистентністю володіють холоднокровні: риби, амфібії та рептилії. Серед найбільш високоорганізованих представників хребетних - птахів і ссавців - одні види високорезистентних, інші менш резистентні або дуже чутливі до туберкульозу.
Інфекція у комах протікає по типу простого симбіозу, при якому мікобактерії живуть в тілі комах протягом більш-менш тривалого часу, не викликаючи туберкульозних змін і не завдаючи їм ніякої шкоди.
Холоднокровні не сприйнятливі до мікобактерій людського, бичачого та пташиного виду, сприйнятливі тільки до мікобактерій холоднокровних.
Найбільш чутливі папуги, які схильні до спонтанного зараження мікобактеріями пташиного, бичачого і людського виду. Гуси і качки виявляють більшу резистентність до туберкульозу.
Серед ссавців до збудника туберкульозу сприйнятливі мавпи, морські свинки, велика рогата худоба, кролі, а також людина.
До туберкульозної інфекції слабо сприйнятливі щури, Р. Кох згодовував щурам м'ясо полеглих від туберкульозу тварин, і пацюки залишалися здоровими.
Організм людини і великої рогатої худоби має відомої ступенем природного імунітету. Але вроджений імунітет недостатній для того, що б уберегти велику рогату худобу і людини у разі масивного зараження.
Реактивність як властивість організму відповідати зміною життєдіяльності на дії навколишнього середовища і порушення діяльності систем організму обумовлена ​​генетичними особливостями виду і окремого організму. Реактивність мікроорганізму відображає його здатність попереджати і долати інфекцію і тому може служити станом показником стану організму на любо1й стадії еволюції туберкульозу.
Про те, що видова реактивність має вирішальне значення для виникнення і перебігу туберкульозної інфекції, відомо давно. Але лише в 40 - 50 рр.. встановлені порогові дози мікобактерій туберкульозу, які викликають стан інфікованості, що переходить в захворювання. Так, для виникнення специфічних змін у вигляді туберкульозного горбика в легкому морської свинки необхідно до 23 туберкульозних мікобактерій (Lurie, Abromson, 1948).
Велика рогата худоба має видовий специфічної опірністю, що виробилася і закріпилася в поколіннях в результаті багатовікового контакту з цією інфекцією. Без природної стійкості, ймовірно, тварини не могли б встояти проти епізоотій. Ступінь індивідуальної вродженої стійкості у тварин неоднакова: одні тісно і тривало стикаються з бактеріовидільником і не заражаються, інші, заражаються, але не хворіють, треті - заражаються і хворіють.
Резистентність організму до туберкульозу з віком коливається. Зараження для новонароджених телят дуже небезпечно, тому що воно в цей період може перейти в захворювання. Але в більшості випадків у тварин, що заразилися в молодому віці, хвороба проявляється при перших, других, третіх отеленнях.
Організм тварин своєму розпорядженні захисними реакціями щодо туберкульозної інфекції, але його можливості самозахисту обмежені.
Якщо мікобактерії туберкульозу, тим чи іншим шляхом потрапили в організм тварини, приживаються в ньому, то розмножуються і викликають тканинні зміни в різних органах у вигляді окремих або множинних горбків або більших туберкульозних поразок.
Про наступив поразку можна судити з низки ознак. Один з них - реакція на туберкулін. Інша ознака зараження - наявність у легенях і лімфатичних вузлах туберкульозних змін, які виявляють при забої або загибелі тварини.
Дуже важлива роль, як встановив І.І. Мечников, належить білим кров'яним тельцям, клітинам печінки, селезінки, лімфатичних вузлів, кісткового мозку. Вони фагоцитують, руйнують і виводять з організму мікобактерії і утворені ними отруйні речовини (токсини). Але навіть якщо мікобактерії і залишаються в будь - якому органі, то образующі6е5ся при цьому пошкодження поступово відмежовуються або рубцюються.
Механізм імунітету при туберкульозної хвороби багато в чому до кінця ще не вивчений, і деякі питання його залишаються спірними. У інфікованої мікобактеріями туберкульозу великої рогатої худоби розвиваються всі типи імунологічних реакцій. Імунна відповідь при туберкульозі характеризується не тільки виробленням різних антитіл і розвитком клітинного імунітету (фагоцитозу), а й появою підвищеної чутливості сповільненого типу (ПЧЗТ). Встановлено, що ПЧЗТ на ряду з антитілоутворення представляє невід'ємну частину імунних реакцій організму і може розглядатися як основна ланка у розвитку протитуберкульозного імунітету.
У імунній відповіді організму беруть участь лімфоїдні клітини, серед яких виділяють В і Т - лімфоцити, які відрізняються організацією і умовами функціонування рецепторів, що реагують з антитілами. В - лімфоцити відповідальні за гуморальні форми імунної відповіді організму. Т - лімфоцити не продукують антитіла, але виконують дуже важливу роль у клітинних імунних реакціях у вигляді ПЧЗТ, 4участвуют в міжклітинної кооперації в процесі синтезу антитіл.
Імунний захист при туберкульозі пов'язана головним чином з макрофагами і Т - лімфоцитами. Процес починається зі взаємодії мікобактерій з макрофагами. Результатом чого можуть бути як активація, так і супресія специфічного запалення. Виходячи взаємодії мікобактерій з макрофагами можуть бути різні - від внутрішньоклітинної деструкції до розмноження і персистенції в організмі, що залежить як і від біологічних властивостей мікобактерій, так і від активації макрофагів, яка визначається інтенсивністю протікають в них метаболічних процесів.
Своєрідність протитуберкульозного імунітету полягає в розвитку комплексу імунних процесів - клітинно-опосередкованого імунітету, ПЧЗТ і антитілоутворення. Але якщо клітинний імунітет і сповільнену гіперчутливість розглядаю як основні механізми протитуберкульозного імунітету, то відносно біологічної ролі антитіл ясності немає. Їх виявляють у низьких титрах, вони не мають протективні властивості і, як правило, не тільки коригують, але часто конкурують з вираженістю клітинного імунітету. У зв'язку з тим, що синтезуються антитіла різних типів і різних класів, що виконують різні функції, простого виявлення в серологічних реакціях титрів циркулюючих антитіл явно не достатньо.
Туберкульоз - інфекція, при якій з винятковою яскравістю виражені всі типи алергічних і парааллергіческіх реакцій при безпосередній залежності клініко-анатомічних ознак цього захворювання від стану загальної та імунологічної реактивності зараженого організму (Здродовский, 1969).
Алергія - компонент специфічного набутого імунітету (оскільки вона включається імунологічними механізмами), який розвивається у відповідь на введення антигену (Авербах з співавт., 1976). Однак алергія в порівнянні з іншим більшістю імунних реакцій при взаємодії з антигеном викликає велике пошкодження клітин макроорганізму. Це не специфічне пошкодження по відношенню до тканин. Оскільки воно обумовлене не наявністю загальних антигенних детермінант з чужорідною речовиною, на якому розвинувся імунітет в тканинах, а неспецифічної фіксацією антитіл - реагинов ІМЛІ комплексів антиген - антитіло на клітинах. Алергічні реакції можуть бути до певної межі корисними і стають шкідливими, коли пошкодження тканин досягає великих розмірів. Алергічні реакції можуть бути як місцевими (локалізованими), так і загальними (наприклад, анафілаксія).
В основі місцевих алергічних явищ при введенні туберкуліну лежить реакція між антигеном і антитілом.
Туберкульозна алергія пов'язана з проникненням в організм туберкульозних мікобактерій і характеризується підвищеною чутливістю до повторного введення останніх або їх продуктів. Р. Кох (1891) спостерігав класичний алергічний феномен (феномен Коха), в якому він встановив, що туберкульозні свинки інакше реагують на введення туберкуліну, ніж здорові. У здорових тварин первинне підшкірне введення мікобактерій викликає протягом декількох днів місцеве запалення, яке супроводжується абсцесом і аденітом, інфекція генерализуется, а виразка не загоюється до самої смерті тварини. У туберкульозних ж свинок відбувається інша реакція: слідом за повторним введенням мікобактерій виникає місцеве алергічне запалення з подальшим виразкою поразки: вже через 2-3 дні шкіра покривається кіркою засихає, через деякий час остання спадає і відбувається подальше загоєння рубцем, регіонарні залози не втягуються в запальний процес. Таким чином, у феномені Коха яскраво виражена підвищена чутливість туберкульозних тварин до повторного введення мікобактерій і в той же час резистентність до реінфекції. Інтенсивність феномена Коха змінюється в залежності від індивідуальності тварини, від виду і вірулентності мікобактерій, дози реінфекції і часу проміжку між первинною інфекцією та реінфекція (Драбкіна, Равіч - Щербо, 1959).
Туберкулінові реакції відображають стан алергену в організмі у зв'язку з інфікованістю збудником туберкульозу. Після відкриття збудника був вишуканий і застосований як діагностикум туберкулін (Гельман, 1888, 1890). Для виявлення алергічного відповіді на туберкулін запропоновано велику кількість проб: підшкірна, внутрішньошкірна, пальпебральной, очна і т.д.У місці внутрішньошкірного введення утворюється припухлість, що досягає найбільшого розміру через 48 - 72 год., Тобто це час, необхідний для підходу і скупчення імунокомпетентних клітин, взаємодії їх з антигенами розвитку запального процесу. За ступенем зовнішнього прояву реакції підрозділяють на нормергіческіе, помірні, гіпеергіческіе - сильні і гіпоергіческіе - слабкі. Відсутність реакції на туберкулін називають анергією. Алергічний відповідь організму при ураженні виникає через 5 - 10 або 42 - 60 дн. і більше.
На прояв алергічних реакцій впливає годівля, утримання тварин, клімато-географічні умови, природа і доза вводиться подразника, місце його введення, ступінь вираженості туберкульозного процесу в організмі, анатомо-фізіологічні властивості місця введення алергену, індивідуальні особливості сам ого досліджуваного організму, супутні захворювання і ін фактори.
Термін «алергія» залишається широко поширеним, але нерідко використовується в спотвореному уявленні про патогенез захворювання.
Так, наприклад, до цих пір багато лікарів вважають позитивну туберкулінову пробу типовим проявом алергії при туберкульозі, тоді як реакція шкіри на туберкулін - класичне прояв феномена ПЧЗТ, виражене міграцією в шкіру сенсибілізованих лімфоцитів і наступним запаленням цієї ділянки. Механізм розвитку цієї реакції при внутрішньошкірної пробі такий же як при введенні туберкуліну, вакцини БЦЖ, алергенів з атипових мікобактерій.
Крім туберкулінових проб для визначення підвищеної чутливості сповільненого типу in vitro застосовують методи, засновані на впливі специфічних антигенів на імунокомпетентні лімфоїдні клітини. Найбільш широко використовуються реакції бласттрансформації лімфоцитів, гальмування міграції макрофагів і лейкоцитів, пошкодження нейтрофільних клітин крові і т.д. Однак широкого застосування вони не знайшли.
14. Специфічна профілактика.
На початковому етапі впровадження протитуберкульозної вакцинації були зроблені різні способи виготовлення та застосування вакцин на лабораторних тваринах і на великій рогатій худобі. Випробовували вакцини з убитих мікобактерій туберкульозу, а також живі й ослаблені різними способами. Запобіжні вакцини розробляли Місснер, Кліммер, Кох, Берінг, Зельтер та ін Всі ці вакцини в даний час представляють лише історичний процес.
На початку минулого століття була створена вакцина, приготована з культур мікобактерій туберкульозу людського виду, ослаблених шляхом висушуванні в безповітряному просторі (Берінг, Ремель і Руппель). Потім Кліммер запропонував для щеплення великої рогатої худоби вакцину під назвою «антіфіматоль». Були спроби застосувати в якості вакцини культуру мікобактерій туберкульозу холоднокровних, виділені від черепахи. Проте всі ці вакцини не володіли достатньою імуногенність.