приховати рекламу

Екстракорпоральне запліднення

[ виправити ] текст може містити помилки, будь ласка перевіряйте перш ніж використовувати.


Нажми чтобы узнать.
скачати

і трансплантація ембріона - запліднення яіцеклеткі поза організмом і пересадка роздрібнюється ембріонів в порожнину матки. До теперішнього часу вже понад 1000 дітей народилося після ЕО та ТЕ.

Незважаючи на те, що вже досягнуто певних успіхів у застосуванні цього методу, враховуючи дорогостоющую апаратуру та обладнання, лікарські препарати в основному імпортного виробництва, цей метод в нашій країні налагоджено тільки у великих науково-дослідних та клінічних установах.

Показання:

  1. безпліддя, викликане непрохідністю маткових труб;

  2. труднооб безпліддя (можливо, пов'язане стем, що ембріон не може покинути блискучу оболонку, імплантуватися і розвиватися) після проведеного повного клінічного дослідження, включаючи гормональне, ендоскопічне, імунологічне.

  3. деякі форми ендометріозу,

  4. олігоспермія.

  5. патологія слизу цервікального каналу.


Схема лікування за допомогою методу ЕКО

Етапи

  1. відбір пацієнток (див. показання);

  2. контроль дозрівання фолікулів (трансвагінальна ехографію, дослідження 17 -естрадіолу крові);

  3. отримання ооцитів;

  4. прединкубацію, запліднення in vitro, культивування, кріоконсервації;

  5. ембріотрансплантацію;

  6. контроль розвитку вагітності;

Умови проведення

  1. збережена в повному обсязі функціональна здатність матки до імплантації і виношування вагітності;

  2. відсутність протипоказань до вагітності та пологах (соматичні, психічні, генетичні захворювання);

  3. збережена здатність яєчників до адекватної відповіді на стимуляцію овуляції - екзогенну і ендогенну;

  4. відсутність новоутворень, запальних і анатомічних змін в органах малого тазу.

Підбір хворих

Необхідно звернути увагу на наступні чинники:

  1. Вік батьків. У жінок у віці 40 років у 23 рази частіше народжуються діти з синдромом Дауна (Simpson, 1979).

  2. Наявність доведеною здатності до зачаття.

  3. Наявність порушень метаболізму, таких як цукровий діабет, аутоімунний тіреоідізм і дефіцит артітріпсіна, що привертають до появи анеуплоідіі у плода.

  4. Наявність анеуплоідіі. Якщо один з батьків є анеуплоідом, то збільшується ризик народження дітей з хромосомними порушеннями.

Всі подружні пари, відібрані для лікування за методом ЕКЗ, повинні розуміти його суть, знати про можливий ризик і дати продумане згоду на лікування.

Підготовка хворих

За 2 або 3 місяці до початку активного лікування за методом ЕКЗ слід провести повне дослідження сперми, що включає бактеріологічне дослідження і посів, одночасно з дослідженням вагінальних і цервікальних мазків з метою виключення патології, викликаної гонококами, мікоплазмою, грибами, трихомонадами і іншими збудниками. Лікування інфекційних захворювань статевих органів робиться з метою попередження зараження культури, в якій проводиться запліднення, і ускладнень після перенесення ембріона. Крім цього, рекомендується зробити мазки по Папаніколау з метою виключення раку шийки матки і поразки статевих органів вірусом герпесу.

Під час предовуляторой фази дослідного циклу беруть кров для приготування ембріокультури та проведення серологічних досліджень на токсоплазмоз, краснуху, цитомегаловірус і вірус герпесу, гепатит В і сифіліс. Також слід досліджувати кров на хромосоми для ідентифікації осіб з підвищеним ризиком відтворення анеуплоідних гамет. Сироватку крові слід досліджувати не предмет виявлення спермантітел і антитіл блискучої оболонки.

На етапі попереднього обстеження необхідно виміряти довжину цервікального каналу і порожнини матки за допомогою маткового зонда, враховуючи наступний перенесення ембріона катетером.

Хоча існує думка, що при природному циклі шанси на успіх досить великі, більшість фахівців вважають, що при "стимулювало" циклі частота настання вагітності вище. Добре відомо, що зі збільшенням числа трансплантуються ембріонів зростає ймовірність імплантації. Але відзначено, що частота багатоплідної вагітності також збільшується зі збільшенням числа внесених ембріонів. Рекомендовано тому введення не більше трьох ембріонів. З метою отримання найбільшої кількості яйцеклітин широко і успішно застосовують методи гормональної стимуляції овуляції.

Схеми стимуляції суперовуляції:

  1. Кломіфену цитрат призначають з 5-го дня менструального циклу протягом 5 днів у дозі 50 мг на добу. Не рекомендується застосовувати при низькій естрогенної насиченості, надлишку маси тіла, гіпертензії, гіперволемії, набряклості.

  2. Тамоксифен (зітазоніум) найбільш показаний при безплідді з НЛФ. Препарат призначають у дозі 10 мг на добу протягом 5 днів. При відсутності позитивного результату дозу збільшують до 20-40 мг / сут.

  3. Хоріогонін є препаратом вибору при початково низькому рівні естрогенів і НЛФ. З цією метою хоріогонін вводять внутрішньом'язово на 5,7,9-й дні циклу по 750 ОД, на 11,13,15-й дні циклу - по 1500 ОД, на 17,19,21-й дні - по 750 ОД.

  4. Сігетін показаний оперованих жінкам з хворобою полікістозних яєчників з метою реабілітації менструальної і репродуктивної функції. Препарат використовують у дозі 100 мг / добу з 5-го по 9-й день циклу.

  5. Хумегон (прегнив) - вводять по 2 ампули, починаючи з 3-го дня циклу, з визначенням естрадіолу крові, цервікального циклу, УЗД. При досягненні фолікулом діаметра 18 мм і більше вводять ХГ.

  6. Люліберіна призначають одноразово в / в у дозі 100 мг напередодні передбачуваної овуляції.

  7. Людський менопаузальний гонадотропін вводять в / м з 6-го по 10 день (6,8,10-й дні) - по 150 ОД - для індукції та додаткового зростання декількох фолікул. З 3-го по 7-й день включно можлива доза по 2 ампули через день.

  8. Парлодел - для індукції овуляції при нормопролактинемії використовують за схемою: 1,25 мг (1 / 2 табл.) 2 рази на день протягом першого тижня, з другого тижня - по 2,5 мг (1 табл.) 2 рази на день, зберігаючи дозування надалі. На 21 день від початку лікування оцінюють зміст естрогенів, прогестерону в крові і по ТФД. За відсутності овуляції дозу збільшують до 2 рази на день, а в подальшому - східчасто, використовуючи емпіричний підхід до тих пір, поки не наступить овуляція і вагітність (але не більше 40 мг / добу).

  9. Поєднані методи:

  1. пергонал по 75-150 ОД з 2-го дня циклу щодня до досягнення домінантним фолікулом зазначених розмірів 16-18 мм. Через 24-48 годин після досягнення фолікулом зазначених розмірів вводять внутрішньом'язово 5000-10000 ОД хоріонічного гонадотропіну. Застосування даної схеми стимуляції суперовуляції призводить до утворення до 20 фолікулів. Протягом усього цього часу жінка перебуває під постійним динамічним контролем; проводять щоденне ультразвукове дослідження з вимірюванням діаметру фолікулів, визначення естрадіолу і лютенизирующего гормону в крові;

  2. кломіфену цитрат - по 50-100 мг / сут. з 3-го або 5-го дня циклу протягом 5 дн. в залежності від тривалості менструального циклу. При досягненні розмірів домінантного фолікула діаметром 17-18 мм в / м вводять 10000 ОД хоріогоніна о 22.00. Через 35-36 год виробляють аспірацію ооцитів (ультразвукова пункція, лапароскопія);

  3. кломіфену цитрат - по 100 мг на добу. з 3-го по 7-й день і по 3 ампули хумегона на 6, 8, 10 дні циклу. При виникненні домінантного фолікула діаметром 18 мм і більше та рівні естрадіолу (Е 2) 300 400 пг / мл на один зростаючий фолікул вводять в / м 1000 ОД ХГ. Поєднані методи володіють більшою ефективністю через потенціювання дії один одним.

Для стимуляції росту фолікулів найчастіше використовують кломіфен, менопаузного гонадотропін людини, хоріогонадотропін, Фоллікулостімулірующий гормон, а також їх різні поєднання.

Забір яіцеклеток

Існує кілька методів забору яіцеклеток для запліднення. Ооцити можуть бути отримані при лапароскопії, мінілапаротоміі або шляхом аспірації фолікулів під контролем УЗД.

Методика лапароскопії

Премедикація і загальна анестезія проводяться також, як і при звичайній лапароскопії.

У черевну порожнину вводиться газова суміш, яка містить 5% CO, 5% O, 90% N.

Аспірацію предовуляторние фолікула виробляють довгою голкою (24 см), зігнутої під кутом 45 з зовнішнім діаметром1, 3 мм і просвітом в 1,1 мм. Голка проводиться через канюлю, введену у черевну порожнину в точці, розташованій на середині між лонним зчленуванням і пупком по середньої лінії живота.

Для аспірації фолікула застосовується знижений тиск. Точка пункції фолікула повинна розташовуватися в неваскулярізованной області або примикати до стромальних елементів яєчника для того, щоб запобігти витоку фолікулярної рідини з переповненого фолікула. Зібрана фолікулярна рідина може бути відразу досліджена на вміст у ній яйцеклітини

Обробка яйцеклітини

Предовуляторние яйцеклітина людини може бути виявлена ​​неозброєним оком по наявності в аспіраті масивних і клейких пластівців розміром до 5 мм і більше. Однак важливо переконатися, що яйцеклітина дійсно знаходиться в цих пластівцях шляхом їх перегляду в препараціонном мікроскопі.

Яйцеклітина 2 рази обмивається запліднюючої середовищем, яка видаляє більшу частину фолікулярної рідини. Потім вона переноситься у краплі рівноважної запліднюючої середовища під стерильне парафінове масло. Як запліднюючої середовища застосовується розчин Тироде, що містить піруват, альбумін, антибіотики.

Приготування сперматозоїдів

Для отримання свіжої сперми, чоловіка хворий просять зібрати свій еякулят у стерильний контейнер в окремій кімнаті. Сперму з урахуванням її розрідження при кімнатній температурі розводять в 2 змивах запліднюючої середовища. Видалення насіннєвої плазми проводять таким чином. Невелика кількість сперми розводять у 4-кратному обсязі запліднюючої середовища, потім суспензію сперматозоїдів центрифугують, видаляють надсадочную рідина, ресуспензіруют грудочку сперматозоїдів і повторюють цю процедуру. Отриманий таким чином грудочку сперматозоїдів знову ресуспендіруют, визначають їх концентрацію і рухливість і доводять ці параметри до значень, які вважаються стандартними для процедури запліднення яйцеклітини.

Запліднення

Потім сперматозоїди переносять у спеціальний термостат, де вже знаходяться яйцеклітини. При осіменінні на 1 яйцеклітину додають 200000-300000 сперматозоїдів.

Процес культивування відбувається в спеціальному середовищі з абсолютною вологістю, при температурі 37 о С в розчині з рН, рівним приблизно 7,6, в атмосфері, що містить 5% СО 2, 5% О 2 і 90% N 2. Яйцеклітину залишають в суспензії сперматозоїдів на 6 18 год

Наступні морфологічні особливості яйцеклітини, більшість яких може бути виявлена ​​з допомогою мікроскопа, можуть визначити ознаки стався запліднення:

  1. Виштовхування другого полярного тільця у желточном простір.

  2. Цитоплазма яйцеклітини стискається, відступаючи від оболонки.

  3. У ранній стадії запліднення в цитоплазмі яйцеклітини може спостерігатися головка, серединний сегмент і хвіст сперматозоїда. Ці ознаки можуть відзначатися тільки при сильному збільшенні, використовуючи фазово-контрастну методику.

  4. У більш пізні стадії (близько 12 18 год після інсемінації) в цитоплазмі можуть бути чоловічі і жіночі проядра.

Розподіл зиготи

Після завершення періоду інсеменаціі яйцеклітину переносять в рівноважну краплю середовища по парафінове масло. Середовище складається з свіжоприготованого розчину Ham F10 з додаванням 15% сироватки крові хворої. Зростаючий ембріон людини культивується при температурі 37 о С в атмосфері, що містить 5% СО 2, 5% О 2 і 90% в середовищі з рН, рівним 7,3.

Про нормальному розвитку ембріона в культурі свідчить поява клітин, які діляться приблизно однакового розміру і форми, які рівномірно заповнюють велику частину простору в межах блискучої оболонки. Розподіл клітин має бути наростаючим і спостерігатися під час чітко визначеного часу. Так, ембріон повинен містити 2 клітки через 35-46 годин, 4 клітини через 51-63 години, 8 кліток через 68-86 годин після інсемінації, а стадія 16 клітин повинна бути досягнута в межах 84-112 годин після.

Якщо клітини розвивається ембріона мають неправильну форму або відходять від блискучої оболонки, або ж швидкість поділу клітин істотно відрізняється від описаної вище, то розвиток ембріона вважається патологічним і він непридатний для перенесення в порожнину матки.

Перенесення ембріона

Так як в більшості випадків ембріон переноситься в порожнину матки на стадії 8 або 16 клітин, то це означає, що ембріон людини перед імплантацією повинен міститися в культурі протягом 3 4 діб.

Ембріон в 0,05 мл культурального середовища обережно засмоктується в стерильний катетер діаметром 1,4 мм. Потім катетер проводиться через цервікальний канал у порожнину матки, де в області дна ембріон вивільняється з катетера. З метою полегшення проведення цієї процедури катетер слід розмістити по довжині для контролю положення його кінця в порожнині матки. Крім цього, слід дуже акуратно маніпулювати шийкою матки щоб уникнути скорочення м'язів матки.


Контроль підтвердження вагітності

Для контролю ранніх строків вагітності, що розвивається проводять динамічне визначення-субодиниці хоріонічного гонадотропіну, яке допомагає визначити вагітність з 7-9-го дня після ТЕ. При настанні вагітності за жінками ведеться постійне спостереження методами, прийнятими для ведення вагітності та пологів жінок з обтяженим акушерським анамнезом.

Повинно проводитися серійне ультразвукове обстеження плоду. На 1 7 й тижня вагітності визначається положення амніону і серцева діяльність плода. Після цього контроль повинен здійснюватися на 20 й ,28-му тижні і далі з метою визначення ступеня розвитку плоду. На підставі отриманої інформації можна спостерігати характеристики росту плода протягом вагітності та виявити певну патологію розвитку скелета. Пункцію амніону можна виробляти приблизно на 16 му тижні вагітності. Таким чином, може бути визначений каріотип і рівень -фетопротеїну, що визначає наявність дефектів розвитку нервової трубки плода.


Список літератури:

  1. Нікітін А.І. "Акушерство і гінекологія", 1989, № 8, с. 10-13

  2. Ниркове В.І. "Акушерство і гінекологія", 1991, № 6

  3. Малевич К.І., Русакевич П.С., "Лікування та реабілітація при гінекологічних захворюваннях", Мінськ, 1994

  4. Пшеничникова Т.Я., "Безпліддя в шлюбі", Москва, 1991

  5. Акунц К.Б., "Актуальні питання безпліддя в шлюбі", Єреван, 1979

  6. Пшеничникова Т.Я., "Безплідний шлюб (проблеми та перспективи)", М. 1989

  7. Машковский М.Д., "Лікарські засоби", М. 1993

  8. Орлова В.Г., "Стимуляція овуляції гонадотропінами", Акуш. , гін. № 9, 1988

  9. Манушлова І.А., "Сучасні принципи лікування ендокринного безпліддя", Рад. мед. № 6, 1986

  10. Пепперелл Р. Дж., "Безплідний шлюб", М. 1986

  11. Савельєва Г.М., "Довідник з акушерства і гінекології", М. 1992

Додати в блог або на сайт

Цей текст може містити помилки.

Медицина | Реферат
29.1кб. | скачати


Схожі роботи:
Запилення та запліднення Суть подвійного запліднення Будова насінини одно- і дводольних рослин 2
Запилення та запліднення Суть подвійного запліднення Будова насінини одно- і дводольних рослин
Запліднення 2
Подвійне запліднення
Запліднення імплантація плацентація
Запліднення і розвиток організму
Запліднення розвиток зародка та плоду 2
Запліднення розвиток зародка та плоду
Правове регулювання штучного запліднення в РФ

Нажми чтобы узнать.
© Усі права захищені
написати до нас
Рейтинг@Mail.ru